Questo articolo descrive come eseguire il bypass cardiopolmonare in topi. Questo modello di romanzo faciliterà l'indagine dei meccanismi molecolari coinvolti nel danno dell'organo.
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Articolo metodologico
Esclusione cardiopolmonare in un modello murino: un nuovo approccio
* These authors contributed equally
In questo articolo
Sommario
Abstract
Come bypass cardiopolmonare prolungata diventa più essenziale durante gli interventi cardiaci, una crescente domanda clinica si pone per l'ottimizzazione della procedura e per minimizzare il danno d'organo derivanti da circolazione extracorporea prolungata. L'obiettivo di questa carta era di dimostrare un modello completamente funzionale e clinicamente rilevante dell'esclusione cardiopolmonare in un mouse. Segnaliamo il dispositivo progettazione, ottimizzazione del circuito di perfusione e le tecniche microsurgical. Questo modello è un modello acuto, che non è compatibile con la sopravvivenza a causa della necessità per più disegni di sangue. A causa della gamma di strumenti disponibili per i topi (ad es., marcatori, forature, ecc.), questo modello faciliterà la ricerca sui meccanismi molecolari del danno d'organo e l'effetto dell'esclusione cardiopolmonare in relazione agli altri comorbilità.
Introduzione
Fin dall'introduzione dell'esclusione cardiopolmonare (CPB) in clinica, esso ha svolto un ruolo essenziale in cardiochirurgia1. In cardiochirurgia moderna, prolungato tempo CPB è essenziale per eseguire vaste ricostruzioni aortiche e procedure unite. Anche se i progressi tecnologici sono stati enormi, l'uso della circolazione extracorporea è associato con intra - e postoperatorie sistemica e locale organo danni2,3.
Grandi modelli animali sono stati sviluppati per studiare il ruolo di CPB su processi fisiologici4,
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Protocollo
tutti gli esperimenti sugli animali sono stati eseguiti in conformità con la legge di protezione animale tedesco (TierSchG) e sono stati approvati dal comitato locale benessere degli animali (ufficio di stato della Sassonia inferiore per tutela del consumatore e sicurezza alimentare, protocollo TSA 14/1556). Il peso minimo del mouse è adatto per questo modello è di 25 g.
1. preoperative preparazioni
Nota: tutte le procedure vengono eseguite in condizioni di pulito, non sterile, con strumenti sterilizzati nell'autoclave.
- Posto 50-60 8 cm lungo propilene hollow fibre in parallelo in un tubo e c....
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Risultati
Questo protocollo descrive il circuito di perfusione, interventi chirurgici e il monitoraggio dei parametri fisiologici durante CPB di un mouse. Quando eseguita da un Microchirurgo adeguatamente qualificato, i risultati si ottengono costantemente e riproducibile.
Per mantenere la perfusione tissutale adeguata, la pressione arteriosa media è sempre tra 40 e 60 mmHg regolando il flusso di sangue CPB e aggiunta di volume supplement.......
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Discussione
Abbiamo sviluppato un modello clinicamente rilevante perfettamente funzionante di CPB in un mouse. Con più di trenta ceppi di topi con malattie cardiovascolari, il nostro modello potrebbe essere un punto di partenza per lo sviluppo di nuovi protocolli prospettici correlati a CPB. Inoltre, a causa della pletora di reagenti specifici del mouse e topi knockout, questo modello non può solo sostituire l'attuale modello di ratto di CPB ma faciliterà la dissezione dei meccanismi molecolari coinvolti nel danno dell'organo CPB-co.......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla a rivelare.
Ringraziamenti
Gli autori non hanno nessun ringraziamenti.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Sterofundin | B.Braun Petzold GmbH | PZN:8609189 | volume di primering, 1:1 con Tetraspan |
| Tetraspan 6% HES Solution | B. Braun Melsungen AG | PZN: 05565416 | volume di priming, 1:1 con Sterofundin |
| Heparin Natrium 25.000 | Ratiopharm GmbH | PZN: 3029843 | 2,5 UI per ml di soluzione di primer |
| NaHCO3 8,4% Solution | B. Braun Melsungen AG | PZN: 1579775 | 3% in soluzione di priming |
| KCL 7,45 % Soluzione | B. Braun Melsungen AG | PZN: 2418577 | 0,1 mL per cardioplegia |
| Carprofen | Zoetis Inc., USA | PZN:00289615 08859153 | 5 mg/kg/BW |
| 1 Fr Catetere PU | Instechlabs INC., USA | C10PU-MCA1301 | arteria carotide |
| 2 Fr Catetere PU | Instechlabs INC., USA | C20PU-MJV1302 | vena giugulare |
| Vasofix Catetere di sicurezza 20G | B.Braun Medical | 4268113S-01 | intubazione orotracheale |
| 8-0 Sutura di seta intrecciata | Ashaway Line & Twine Mfg. Co., USA | 75290 | legatura |
| Isoflurane | Piramal Critical Care Deutschland GmbH | PZN:9714675 | narcosi |
| CLINITUBES capillari sanguigni | Radiomed GmbH | 51750132 | prelievo di sangue 60 - 95 microlitri |
| Forbici a molla - Lame da 6 mm Fine | Science Tools GmbH | 15020-15 | strumenti |
| Forbici a molla - Lame da 2 mm | Strumenti per la scienza fine GmbH | 15000-03 | strumenti |
| Halsted-Mosquito Hemostat | Fine Science Tools GmbH | 13009-12 | strumenti |
| Dumont #55 Pinza | Fine Science Tools GmbH | 11295-51 | strumenti |
| Castroviejo Micro Needle Holder - 9cm | Fine Science Tools GmbH | 12060-02 | strumenti |
| Micro Serrefines | Fine Science Tools GmbH | 18555-01 | strumenti |
| Bulldog Serrefine | Fine Science Tools GmbH | 18050-28 | strumenti |
| Ventilatore MiniVent per topi (modello 845) | Harvard Apparatus | 73-0044 | ventilazione meccanica |
| Vaporizzatore isoflurano Dräger 19.1 | Drä gerwerk AG & Co. KGaA | anestesia 1,3 - 2,5% | |
| Dispositivo di acquisizione dati PowerLab 4/35 | ADInstruments Ltd, Nuova Zelanda | PL3504 | pressione invasiva, ECG, temperatura |
| ABL 800 Flex | Radiometer GmbH | analisi dei gas ematici | |
| NMRI | Charles River Laboratories | Crl:NMRI(Han) | maschio, 30 - 35 g, 12 settimane, alloggiato almeno 1 settimana prima dell'esperimento |
Riferimenti
- Edmunds, L. Cardiopulmonary Bypass after 50 Years. N. Engl. J. Med. 351 (16), 1601-1603 (2004).
- Goto, T., Maekawa, K. Cerebral dysfunction after coronary artery bypass surgery. J. Anesth. 28 (2), 242-248 (2014).
- Uysal, S., Reich, D. L.
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Ristampe e permessi
