La evaluación precisa de la respuesta al dolor en un modelo animal neuropático es fundamental investigar la patofisiología del dolor enfermedades y desarrollar nuevos analgésicos. Presentamos un método sensible y objetivo para determinar la función sensorial del roedor hind de la pata por un sistema de análisis automatizado de la marcha.
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Artículo de método
Análisis de la marcha automática en ratones con lesión de la constricción crónica
En este artículo
Resumen
Resumen
La prueba de von Frey es un método clásico que ha sido ampliamente utilizado para examinar la función sensorial de los animales de dolor neuropático. Sin embargo, tiene algunas desventajas como datos subjetivos y el requisito de un experimentador calificado y con experiencia. Hasta la fecha, una gran variedad de modificaciones han mejorado el método de von Frey, pero todavía tiene algunas limitaciones. Los informes recientes han sugerido que el análisis de la marcha producen datos más precisos y objetivos de los animales neuropáticos. Este protocolo muestra cómo realizar el análisis de la marcha automática para determinar el grado de dolor neuropático en ratones. Después de varios días de aclimatación, los ratones se les permitía caminar libremente en el piso de cristal para iluminar huellas. Entonces, la cuantificación de la huella y del paso fueron realizados a través de clips de vídeo con el análisis automático de diversos parámetros a pie, como área de impresión, oscilación tiempo pata, ángulo de pata, etc.
El objetivo principal de este estudio es describir la metodología de análisis de la marcha automática y brevemente compararla con los datos de la prueba sensorial clásica con filamentos de von Frey.
Introducción
Los cambios patológicos del sistema nervioso inducidos por trauma, disfunción metabólica, inflamación, infección, isquemia, o enfermedad autoinmune ocasionalmente dar lugar a dolor neuropático, que se define como un dolor que se presenta como una consecuencia directa de una lesión o enfermedad que afectan el sistema somatosensorial1. El dolor neuropático es generalmente insoportable y por desgracia, analgésicos convencionales generalmente no producen suficiente de alivio de dolor2. Una característica importante del dolor neuropático contiene dolor espontáneo y evocado por el estímulo(, alodinia o hiperalgesia). ....
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Protocolo
todos los experimentos se llevaron a cabo con arreglo a las normas éticas de la Asociación Internacional para el estudio del dolor y fueron aprobados por el cuidado institucional de animales y uso en la Universidad Nacional de Chungnam ( Daejeon, Corea del Sur).
1. inducción de CCI en nervio ciático
- casa ICR ratones machos pesa 20-25 g en un ciclo de luz/oscuridad de 12 h a temperatura ambiente controlada (mantenida a 20-25 ° C) y humedad (40-60%), con libre acceso a los alimentos y agua. Permite un periodo de aclimatación para los ratones en la sala de cuidado de los animales de al menos 1 semana antes de la cirugía.
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Resultados
Hemos realizado la prueba de von Frey y automatizado de análisis de la marcha en ratones de la CCI hasta 10 días después de la cirugía de la CCI. Para el análisis estadístico, medidas repetidas de dos vías de análisis de varianza (ANOVA) determina los efectos generales, y se realizó análisis de post-hoc de Dunnett para determinar el valor de p entre los grupos experimentales.
Los resultados que se muestran en la
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Discusión
Actualmente, medición del allodynia mecánico mediante el uso de filamentos de von Frey es el más ampliamente utilizado método en modelos animales de dolor para demostrar hipersensibilidad táctil. Como modelos animales de dolor neuropático han seguido a desarrollar, la metodología de evaluación para la función sensorial ha sido también mejorada8,9,10,15. En esos informes, se ha sugerido que esta.......
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Divulgaciones
Los autores no tienen nada que revelar.
Agradecimientos
Esta investigación fue apoyada por Chungnam University, Corea Instituto Nacional de Medicina Oriental (KIOM) y una donación de Corea salud tecnología R & D proyecto a través de la Corea salud industria desarrollo Institute (KHIDI), financiado por el Ministerio de salud & Bienestar, República de Corea (número: HI15C0007).
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| 0.9% Solución salina | JW Pharmaceutical | N/A | Vehículo para medicamentos |
| Jeringa de 1 ml | BD Plastipak | 300013 | Dispositivo de inyección |
| 2, 2, 2-tribromoetanol (97% de pureza) | Sigma | T48402 | Anestésico |
| 2-metil-2-butanol (99% de pureza) | Sigma | 152463 | Solvente para 2, 2, 2-tribromoetanol |
| Pasarela Sistema automatizado de análisis de la marcha | Noldus | N/A | Software de análisis automático de la marcha aniaml |
| Catgut crómico (4-0 grosor) | AILEE | C442 | Ligadura para hacer una lesión crónica por constricción en el nervio ciático |
| Gabapentina | Sigma | Y0001280 | Analgeisc, utilizado como fármaco de control positivo en este estudio |
| Pinzas de Graefe | F.S.T | 11051-10 | |
| Almohadilla térmica | DAESHIN ELECTRONICS | M-303AT | Regulación de la temperatura corporal |
| ICR Ratón | Samtaco | N/A | Animal de experimentación |
| Mersilk (espesor 3-0) | ETHICON | W598H | Material de sutura para el cierre quirúrgico de la piel |
| Micro-Mosquito | F.S.T | 13010-12 | Instrumento quirúrgico |
| Microtijeras | F.S.T | 14090-09 | Quirúrgico instrumento |
| Portaagujas | F.S.T | 12002-12 | Instrumento quirúrgico |
| Povidona Yodada | Firson | N/A | Desinfectante para prevenir infecciones después de la cirugía |
| Hoja de bisturí | F.S.T | 10010-00 (#10) | Instrumento quirúrgico para hacer una incisión |
| Mango de bisturí | F.S.T | 10003-12 (#3) | Instrumento quirúrgico para hacer una incisión |
| Filamentos Von-Frey | North Coast | NC12775-99 Dispositivo de | medición para probar la función sensorial de la estimulación mecánica |
Referencias
- Loeser, J. D., Treede, R. D. The Kyoto protocol of IASP Basic Pain Terminology. Pain. 137 (3), 473-477 (2008).
- Colloca, L., et al. Neuropathic pain. Nat Rev Dis Primers. 3, 17002(2017).
- Vranken, J. H. Mechanisms and treatment of neuro....
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Reimpresiones y permisos
