Summary
이 문서에서는 대동맥 풍선 부상 후 murine 모델 myointimal 증식 (수소)의 개발 연구를 보여줍니다.
Abstract
동물 모델의 사용은 수소, 동맥 협 착 증에 대 한 하나의 주요 원인의 더 나은 이해를 위해 근본적 이다. 이 문서에서는, 큰 동물에 설립된 선박 부상 모델 비교는 murine 풍선 노출 모델을 설명 합니다. 풍선 카 테 터 대동맥 노출 모델 임상 설정을 모방 하 고 유사한 pathobiological 및 생리 적 변화를 리드. 간단히, 대동맥 abdominalis에 수평 절 개 후, 풍선 카 테 터 혈관에 삽입, 팽창, 고 됩니다 retrogradely 소개. 풍선의 인플레이션 intima 상해 및 선박의 overdistension 이어질 것입니다. 카 테 터 제거 후 대동맥 절 개 한 stiches 함께 종료 됩니다. 이 문서에 표시 된 모델은 재현, 수행, 쉬운 및 신속 하 고 안정적으로 설정할 수 있습니다. 그것은 특히 비싼 실험 치료제, 경제적인 방식으로 적용 될 수 있는 평가 적합 합니다. 다른 녹아웃 마우스 종자를 사용 하 여 수소 개발에 다른 유전자의 영향 평가 될 수 있다.
Introduction
동맥 협 착 증 관상 동맥 및 주변 동맥에 병 적 상태와 환자1의 사망률에 큰 효과가 있다. 1 기본 병 적인 메커니즘은 myointima 증식 (MH), 증가 확산, 마이그레이션, 및 혈관 평활 근 세포 (SMC)2에서 세포 외 기질 단백질의 합성에 의해 특징입니다. SMC는 선박의 미디어 계층에 있으며 루멘의 표면에 자극에 따라 마이그레이션할. 물질로 신호 등 성장 인자, cytokines, 셀 연락처, 지질, 기질 구성 요소, 기계적 전단 고 힘3,4,,56을 스트레칭. 부상 병 적인 또는 의원 성, 혈관 벽의 내 피 세포 및 평활 근 세포 손상 원인 및 염증 성 반응, 자극 고 따라서 수소7.
다른 동물 모델 동맥 상해 및 myointima 증식 연구를 현재 사용할 수 있습니다. 큰 동물 같은 돼지 또는 개 인간과 유사한 동맥 및 관상 동맥 해부학을 공유의 장점은 특히 혈관 기술, 절차, 및 장치8조사 연구에 적합. 그러나, 돼지 모델 개 하나만 배 부상11가벼운 응답 하는 동안 더 높은 thrombogenicity9,10, 단점이 있다. 또한, 모든 큰 동물 모델 특별 한 주택, 장비, 및 직원, 높은 비용으로 연결 되 고 항상 기관에 제공 하지 않습니다 필요 합니다. 작은 동물 모델에는 쥐와 쥐 포함 됩니다. 쥐에 비해, 쥐 있고 저렴 한 비용의 장점 다양 한 모델에 밖으로 노크의 존재. 이 비디오에서 설명 하는 모델 ApoE-/-생쥐 서양 다이어트 먹이 밀접 하 게 혈관 동맥 경 화성 혈관12의 임상 설정 모방 하 결합 될 수 있다. 이전 모델 유도 철사 부상13, 액체 건조14,15봄 또는 팔목 부상16통해 혈관 상해. 상해의 자연 크게 개발 및 수소의 헌법에 영향을 미칠 것 이다, 혈관 상해를 유발 하는 풍선 카 테 터를 사용 하 여 이므로 임상 설정을 모방 하는 가장 좋은 방법은.
이 문서에서 우리는 쥐에서 풍선 카 테 터와 수소를 유도 하는 소설 방법을 설명 합니다. 풍선 카 테 터 (1.2 m m x 6 m m) RX 포트 (그림 1A)와 함께 사용 하면 된다고 내 층의 하 고, 동시에, 선박에의 한 overdistension의 유도에 있습니다. 이러한 요소 둘 다는 MH의 개발에 대 한 중요 한 트리거입니다. 이 모델에 대 한 관측 시간 28 일17이다.
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Protocol
동물은 실험실 동물의 원칙에 대 한 가이드 준수 인도적인 치료를 받은 하 고 준비 하 여 연구소의 실험 동물 자원, 건강의 국가 학회에 의해 출판. 모든 동물 프로토콜 ('Amt에 Gesundheit und Verbraucherschutz, 타트 (건강 및 소비자 보호를 위한 사무실) 함부르크') 책임 있는 지방 기관에 의해 승인 되었다.
1. 카 테 터 준비
참고: 카 테 터에 관한 정보에 대 한 테이블의 자료 를 참조 하십시오.
- 카 테 터 홀더에서 카 테 터를 가져가 라.
- 밖으로 원심 포트를 통해 루멘에서 guidewire를 당겨.
- 카 테 터의 원심 끝에 cyanoacrylate 접착제 한 방울 넣어.
주의: 라텍스 또는 니트 릴 장갑을 착용 한다. - 카 테 터의 RX 포트에는 guidewire를 놓고 원심 포트 루멘을 통해 사전. 나중에, 당겨는 guidewire 다시 약간 공간을 두도록 ~ 5 mm의 끝에.
- 접착제를 건조 수 있도록 5 분 기다립니다.
- guidewire를 이동, 수정 되어야 합니다. 그것은 여전히 모바일, 단계 1.3-1.6을 반복 합니다.
- 1.5 mL 0.9% 식 염 수로 3 mL 주사기를 풍선 인플레이션 포트에 연결.
- 풍선 인플레이션 테스트 주사기 플런저를 밀어. 두고 0.6 mL 주사기에 식 염 수 있습니다.
2. 마우스 준비
- 14 주 약 30 g 무게의 나이에 남성 쥐를 얻을.
참고: 우리는 동물 실험실 동물 연구소에서 얻은 사용 합니다. 우리 여기 C57BL/6J 사용. - 유도 챔버를 사용 하 여 2.0-2.5 %isofurane (500 mL/min 산소 유량)와 마우스를 anaesthetize.
- 생리대에 그것의 뒤에 마우스를 놓고 마우스의 코 및 입 안 면 마 취 유지 합니다. 뒷 다리와 꼬리를 반사의 부재를 확인 곤란 하 여 마 취의 충분 한 깊이를 확인 합니다.
- 헤어 트리머를 사용 하 여 복 부 머리를 제거 합니다.
- 뒷 다리를 확산 하 고 수정 테이프를 사용 하 여 그들의 위치.
- Povidone-요오드, 뒤에 80% 에탄올을 사용 하 여 복 부 영역을 치료. 두 번 이상이 단계를 반복 합니다.
- 외과 용 드 레이프를 사용 하 여 수술 부위의 오염 얻이 되지 않습니다 보장 하기 위해. 따라 피부와 근육 층을 열고는 교육 알바 복 부 장기 노출 시저 (또는 메스).
- 0.9% 염 분 촉된 장갑에 내장을 그들을 축축한 유지로.
- 두 개의 미세 집게를 사용 하 여 복 부 대동맥 위에 지방 조직을 제거.
- 인슐린 주사기 (30 G)를 사용 하, 열 등 한 베 나 정 맥 (IVC)에 250 µ L 덤플링 솔루션 (50 U/mL)의 주입 하 고 그것의 조직 분포에 대 일 분을 기다릴. 헤 파 린 hemostasis 억제 하 고 수술 하는 동안 원하지 않는 응고 방지.
- 두 개의 집게를 사용 하 여 그것의 분기와 그 보내는 분기 선박 infrarenal 대동맥 해 부.
- 높은 온도 cauterizer와 클램핑 된 지역에 배치 될 것으로 예상 된다 하는 쪽 배 선
- 신장 동맥 바로 아래 infrarenal 대동맥 클램핑 함으로써 혈액의 흐름을 중지.
- 두 번째 클램프 바로 위에 대동맥 분기 원심 위치에 놓습니다.
- 작은 가로 절 개를 그릇에 따라 클램프의 중간에가 위를 사용 하 여 수행 합니다.
참고: 절 개의 크기 배 둘레의 1/3에 해당 해야 합니다. - 절 개에 (30 G) 바늘으로 주사기를 삽입 하 고 250 µ L 덤플링 솔루션 (50 U/mL)와 대동맥을 플러시.
- 10-0 봉합을 사용 하 여, 절 개의 각 측면에 하나의 단일 매듭을 배치 합니다.
- 절 개 배 확장기를 삽입 하 여 대동맥 팽창 하 고 약간 배를 확산. 팽창 2 ~ 3 회 반복 합니다.
- 0.9% 식 염 수와 풍선 카 테 터를 보습.
- 대동맥으로 평면화 된 풍선 카 테 터를 삽입 하 고 대동맥에 인접 클램프 승급.
- 근 위 클램프에 도달, 신중 하 게 인접 클램프 열고 ~0.6 mL 식 염 수를 주입 하 여 혈액 누출을 방지 하기 위해 풍선을 부 풀 려.
참고: 혈관을 팽창 된 풍선의 비율은 1.5:1 이다. - 약 2 cm 역행 카 테 터를 사전.
- 확장 된 카 테 터, 주사기를 방출 하 여 약간 풍선 deflating 동안 당겨.
- 카 테 터 대동맥의 절 개를 도달할 때 인접 클램프를 다시 연결 합니다. 풍선을 완전히 빼 다 고 그것을 제거 합니다.
- 250 µ L 덤플링 솔루션 (50 U/mL)와 대동맥 30 G 주사기를 사용 하 여 린스 합니다.
- 10-0 봉합을 사용 하 여 대동맥 절 개를 닫습니다. 장소는 복 부 쪽에 하나 또는 두 개의 바늘 뒤 측면 양쪽에 바늘을 중단.
- 원심 클램프를 엽니다. 출혈, 경우 클램프 다시 닫고 추가 바늘을 배치 합니다.
- 신중 하 게 인접 클램프를 엽니다.
- 그것을 지원 하 고 어떤 출혈을 멈추게 하는 봉합에 두 개의 면봉을 배치 합니다.
- 그것을 유지 하기 위해 봉합에 흡수 hemostats를 놓습니다.
참고: 대동맥 펄스 distally 절 개에서에서 표시 되어야 합니다. - 내장 복 부에 다시 놓습니다.
- 된 37 ° c에 미리 데워 살 균 0.9% 식 염 수와 복 부 구멍을 씻어
- 6-0 실행 봉합을 사용 하 여 복 부 근육 레이어를 닫습니다.
- 5-0 실행 봉합 피부를 닫습니다.
- 마우스를 허용 하기 전에 Carprofen 4-5 mg/kg을 피하 주사. 그것은 식을 얻고 있다 때까지 동물을 모니터링, sternal recumbency를 유지. 동물 혼자 장에 계속 완전 한 회복.
- 3 일에 대 한 진통제로 서 식 수 (50 mg/100 mL)에 Metamizole를 추가 하 고 매일 동물을 모니터링. 일반적으로 달콤한 처럼 마우스 metamizole의 맛 하 고는 수술 후 즉시 마시는 시작 합니다. 선호 하는 경우 metamizole 대신 지속 릴리스 에이전트를 사용할 수 있습니다.
참고:이 모델에 대 한 관찰 기간은 28 일입니다.
3입니다. histopathology
- 28 일 후 풍선 부상 대동맥을 수확 단계 2.2 2.9에서에서 설명한 대로 쥐를 준비 하 여.
- 가 위를 사용 하 여 풍선 부상 대동맥 (분기 신장 혈관 위에 0.3 m m 사이)를 제거 하 고 그것의 심 혼을 절단 하 여 마우스를 안락사.
- 0.9%로 선박의 루멘 플러시 NaCl.
- 밤새 4 %paraformaldehyde (PFA)에서 수확된 한 배를 해결 하 고 5 시간 동안 2 시간, 2 시간, 1 시간에 80% 에탄올, 95% 에탄올에 대 한 70% 에탄올으로 시작 하는 에탄올과 100% 에탄올의 농도 증가에 탈수. 그런 다음, 품 어 크 실 렌에 샘플 2 시간 동안 3 번 샘플 파라핀을 침투 하기 전에.
참고: 0.9% 수확된 배를 내리는 대신 NaCl, 4%와 플러시 수 PFA.
주의: PFA 및 크 실 렌 독성이 있으며 특별 한 관리와 처리 해야 합니다. - 파라핀에 샘플을 포함 하 고 있는 톰을 사용 하 여 5 µ m 두께의 조각으로 잘라.
- 3 시간 5 분 동안 크 실 렌과 슬라이드를 deparaffinize.
- 에탄올의 감소 시리즈를 사용 하 여 조직 슬라이드 리하이드레이션 2 시간 5 분, 3 분 95%, 80%, 70% 에탄올의 뒤에 100% 에탄올으로 시작 합니다.
- 슬라이드 설명된18로 Masson의 trichrome 얼룩과 얼룩.
- 2 시간 10 분 대 한 100% 에탄올에 얼룩진된 슬라이드를 탈수. 2 시간 10 분 대 한 자일 렌을 하 고 설치 매체에 탑재.
- 밝은 분야 현미경 슬라이드를 볼. 5 배 확대와 0.12의 숫자 조리개와 렌즈를 사용 하 여 개요 그림 이나 자세한 관찰을 위해 0.35의 숫자 조리개와 20 x 확대와 렌즈에 대 한.
4. 면역 형광 검사 현미경 검사 법
- 에탄올의 감소 시리즈를 사용 하 여 조직 슬라이드 리하이드레이션 2 시간 5 분, 3 분 95%, 80%, 70% 에탄올의 뒤에 100% 에탄올으로 시작 합니다.
- 20 분 동안 증기선에서 항 원 복구 솔루션에 슬라이드를가 열 하 여 항 원 복구를 수행 합니다.
- 실내 온도 아래로 슬라이드 식 지.
- 버퍼링 하는 인산 염 (PBS)와 3 시간 동안 슬라이드를 씻은 후 30 분에 대 한 섹션에 항 원을 차단 솔루션을 적용.
- PBS 가진 5 분에 대 한 세 번 슬라이드를 씻어.
- 1 차적인 항 체 희석제에 희석 주 항 체와 섹션을 품 어.
참고: 적절 한 농도 및 부 화 시간 각 항 체에 대 한 개별적 선택 되어야 한다. - 슬라이드 언바운드 항 체를 제거 하는 PBS 가진 5 분 동안 세 번 씻는 다.
- 이차 항 체 희석제에 희석 사전 활용 된 이차 항 체와 섹션을 품 어.
참고: 적절 한 농도 및 부 화 시간 각 항 체에 대 한 개별적 선택 되어야 한다. - 5 분에 대 한 슬라이드 세 번 세척 하 여 언바운드 항 체를 제거 합니다.
- 15 분; 4', 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) 사용 하 여 셀 핵 counterstain 최종 DAPI 농도 350 이어야 한다 nM.
- 면역 형광 검사 솔루션 장착 호환에 슬라이드를 탑재 합니다.
참고: 잘못 설치 솔루션을 사용 하 여 형광 신호를 모호한 수 있습니다. - 형광 현미경 슬라이드를 볼. 1.3 숫자 조리개와 40 x 확대 렌즈를 사용 합니다.
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Representative Results
풍선 노출은 쥐에 있는 수소의 개발 연구에 적합 한 모델. 동물 수술에서 잘 복구와 우수한 건강 상태 후 작업을 표시 합니다. 우리는 수술으로 인해 3% 사망률 보다 적은 50 쥐에이 모델을 설립. 그림 1B -C 키 수술 단계를 보여줍니다. 따라 피부 절 개 후는 교육 알바, 대동맥 abdominalis식별. Microsurgical 클램프 (그림 1B)를 배치 합니다. 대동맥의 한가운데에 작은 절 개, 배와 역행 하는 혈액의 흐름 (그림 1C)의 방향에 대 한 슬라이드에 풍선 카 테 터를 설정. 팽창 된 풍선의 운동 된다고 intima의 하 고, 동시에, 그릇의 overdistension에 이끌어 낸다. 대동맥 절 개 한 stiches 함께 종료 됩니다. 대동맥 펄스 distally 절 개에서에서 표시 되어야 합니다.
MH는 시간이 지남에는 이식에서 점차적으로 발전 한다. Masson의와 얼룩 조직학 trichrome 내부 탄력 있는 lamina (그림 2A) 내부 myointima 형성을 보여줍니다. Myointimal 병 변 SM22 및 일부 기질 구성 요소 (그림 2B)에 대 한 긍정적인 세포 구성 성분의 주로 구성 되어 있습니다. Myointimal 셀 추가 면역 형광 염색 법에 의해 평가 됩니다. 부드러운 근육 (평활 근 걸 (SMA) 긍정적인) 세포와 myofibroblasts (섬유 아 세포 활성화 단백질 (FAP) 긍정적인) 세포 (그림 2B)는 myointima에서 주요 인구에 의하여 이루어져 있다.
그림 1입니다. 카 테 터와 그것의 주입의 설계도입니다. (A) 카 테 터의 상세한 회로도. 원심 포트, 풍선, 신속한 exchange 포트 (RX 포트), guidewire, RX 포트에 단일 루멘 루멘 RX 포트에서 풍선, 허브, 풍선 인플레이션 포트 두 번. (B) 수술의 도식 적인 그림. 두 개의 마이크로 클램프와 대동맥 abdominalis 의 혈 중지 하 고 작은 절 개를 수행 됩니다. C. 비정상적된 카에 테 한 터 대동맥 abdominalis내부 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 2입니다. 내부 탄력 있는 lamina 내부 Myointima 형성입니다. (A) Denuded 마우스 aortas 수확, 파라핀 포함, 그리고 대표적인 횡단면 trichrome 얼룩에 표시 됩니다. (B) 표시는 더블 면역 형광 풍선 걸치기 aortae의 얼룩. 위 행 myointimal 병 변 SM22 및 III 콜라겐 스테인드 묘사. 아래쪽 행에서 배는 SMA와 FAP 스테인드. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
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Discussion
이 문서는 myointimal 증식 개발 연구는 murine 모델을 보여 줍니다 고 기본 병 적인 프로세스의 탐사와 새로운 약물 이나 치료 옵션의 테스트 수 있습니다.
이 프로토콜의 가장 중요 한 단계는 대동맥의 노출입니다. 으로 과도 한 노출 동맥 류 형성과 모델 실패 이어질 것입니다이 단계 동안 특별 한 주의 지불 합니다. 다른 한편으로, 노출 충분히 수행 됩니다, 너무 작은 myointima 개발할 것입니다. 따라서, 노출의 강도 결과이 동물 모델의 성공에 결정적 이다.
수술 절차에 관하여 그릇의 두 벽 선박 patency의 초기 실패에 발생할 수 있습니다 stiches를 설정 하 여 관통 하지는 중요 하다. 우리는 우리가 쥐18의 복 부 대동맥에서 혈관 협 착 증을 유발 하는 마우스 모델을 설명 이전 했습니다. 그러나,이 고 대부분의 다른 모델만 제공 매우 적은 양의 조직 분석에 대 한. 이 방법의 장점은 비교적 많은 양의 (~ 1 cm 선박 세그먼트)를 획득 하는 조직입니다. 단일 혈관 이식 이렇게 여러 부분으로 분할 하 고 다양 한 분석, 효과적으로 필요한 실험 동물의 수를 감소에 대 한 사용 수 있습니다.
또한, 적합 한 노크 아웃 동물 다른 질병 조건에서 myointima 증식의 개발 연구에 사용할 수 있습니다. 유전 배경 또한 다양 한 설정 또는 특정 유전자의 영향에서 myointimal 증식의 메커니즘을 이해 하는 것이 동물 모델 결합 수 있습니다.
요약 하면, 여기에 설명 된 모델은 재현할 수, 수행, 쉬운 및 신속 하 고 안정적으로 설정할 수 있습니다. 이 모델에서 옵션 더 큰 동물에 확인 될 수 있다 성공적으로 시험 된 치료 모델19.
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Disclosures
저자는 공개 없다.
Acknowledgments
저자는 그녀의 기술 지원에 대 한 크리스티안 Pahrmann 감사합니다.
D.W. 최대 kade 수 있다 재단에 의해 지원 되었다. T.D. 받은 보조금 다른 Kröner Fondation (2012_EKES.04)와 도이치 가운데 (DE2133/2-1_. S. S. 도이치 가운데 (DFG;에서 연구 보조금을 받은 SCHR992/3-1, SCHR992/4-1).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 10-0 Ethilon suture | Ethicon | 2814G | |
| 3 mL Syringe | BD Medical | 309658 | |
| 37% HCl | Sigma-Aldrich | H1758 | |
| 5-0 prolene suture | Ethicon | EH7229H | |
| 6-0 prolene suture | Ethicon | 8706H | |
| Acid Fuchsin | Sigma-Aldrich | F8129-25G | Trichrome staining |
| Antigen retrieval solution | Dako | S1699 | |
| Azophloxin | Waldeck | 1B-103 | Trichrome staining |
| Bepanthen Eye and Nose ointment | Bayer | 1578675 | Eye ointment |
| Betadine Solution | Betadine Purdue Pharma | NDC:67618-152 | |
| C57BL/6J | Charles River | Stock number 000664 | |
| Clamp applicator | Fine Science Tools | 18056-14 | JAW DIMS: 4 x 0.75 mm LENGTH: 13 mm |
| Collagen 3 | abcam | ab7778 | Antibody |
| DAPI | Thermo Fischer | D1306 | |
| Donkey anti-Goat IgG AF555 | Invitrogen | A21432 | Secondary antibody |
| Donkey anti-Rabbit IgG AF488 | Invitrogen | A21206 | Secondary antibody |
| Donkey anti-Rabbit IgG AF488 | Invitrogen | A11055 | Secondary antibody |
| Donkey anti-Rabbit IgG AF555 | Invitrogen | A31572 | Secondary antibody |
| Ethanol 70% | Th. Geyer | 2270 | |
| Ethanol 96% | Th. Geyer | 2295 | |
| Ethanol absolute | Th. Geyer | 2246 | |
| FAP | abcam | ab28246 | Antibody |
| Forceps fine | Fine Science Tools | 11251-20 | |
| Forceps standard | Fine Science Tools | 11023-10 | |
| Glacial Acetic Acid | Sigma-Aldrich | 537020 | |
| Hair clipper | WAHL | 8786-451A ARCO SE | |
| Heparin | Rotexmedica | PZN 3862340 | 25.000 I.E./mL |
| High temperature cautery kit | Bovie | 18010-00 | |
| Image-iT FX Signal Enhancer | Invitrogen | I36933 | Blocking solution |
| Light Green SF | Waldeck | 1B-211 | Trichrome staining |
| Microsurgical clamp | Fine Science Tools | 18055-04 | Micro-Serrefine - 4mm |
| MINI TREK Coronary Dilatation Catheter 1.20 mm x 6 mm / Rapid-Exchange | Abbott | 1012268-06U | |
| Molybdatophosphoric acid hydrate | Merck | 1.00532.0100 | Trichrome staining |
| NaCl 0,9% | B.Braun | PZN 06063042 Art. Nr.: 3570160 | |
| Needle holder | Fine Science Tools | 12075-14 | |
| Novaminsulfon | Ratiopharm | PZN 03530402 | Metamizole |
| Orange G | Waldeck | 1B-221 | Trichrome staining |
| Paraffin | Leica biosystems | REF 39602004 | |
| PBS pH 7,4 | Gibco | 10010023 | |
| PFA 4% | Electron Microscopy Sciences | #157135S | |
| Ponceau S solution | Serva Electrophoresis | 33427 | Trichrome staining |
| Primary antibody diluent | Dako | S3022 | |
| Prolong Gold Mounting solution | Thermo Fischer | P36930 | Mounting solution for immunofluorescence stained slides |
| Replaceable Fine Tip | Bovie | H101 | |
| Resorcin-Fuchsin Weigert | Waldeck | 2E-30 | Trichrome staining |
| Rimadyl | Pfizer | 400684.00.00 | Carprofen |
| Scissors | Fine Science Tools | 14028-10 | |
| Scissors Vannas-style | Fine Science Tools | 15000-03 | |
| Secondary antibody diluent | Dako | S0809 | |
| Fast acting Adhesive MINIS 3x1g | UHU | 45370 | Cyanoacrylate |
| Slide Rack | Ted Pella | 21057 | |
| SM22 | abcam | ab10135 | Antibody |
| SMA | abcam | ab21027 | Antibody |
| Staining dish | Ted Pella | 21075 | |
| Surgical microscope | Leica | M651 | |
| Tabotamp fibrillar | Ethicon | 431962 | Absorbable hemostat |
| Transpore Surgical Tape | 3M | 1527-1 | |
| U-100 Insulin syringe | BD Medical | 324825 | |
| Vessel Dilator | Fine Science Tools | 18603-14 | |
| Vitro-Clud | Langenbrinck | 04-0001 | |
| Weigerts iron hematoxylin Kit | Merck | 1.15973.0002 | Trichrome staining |
| Xylene | Th. Geyer | 3410 |
References
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