Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

En murin modell av vertikal Sleeve Gastrectomy

Published: December 18, 2017 doi: 10.3791/56534

Summary

Följande beskriver prestandan för vertikal sleeve gastrectomy hos möss. Detta är en typ av viktminskning kirurgi som innebär avlägsnande av cirka 70% av magen.

Abstract

Bariatric kirurgi, såsom vertikal hylsa gastrektomi (VSG), är en operation i mag-tarmkanalen som utförs i syfte att viktminskning. Fetmakirurgi är för närvarande den mest effektiva långsiktig behandlingen av fetma. Förutom viktminskning, obesitaskirurgi producerar ytterligare hälsofördelar såsom eftergift av typ 2-diabetes, eftergift av hypertoni, och minskade risken att utveckla vissa typer av cancer. Mekanismerna bortom viktminskning för dessa förmåner förbli ofullständigt definierade. Därför djurmodeller av Magsäckskirurgi håller på att utvecklas och valideras för att identifiera de mekanismer som leder till dessa fördelar, med målet att förbättra förståelsen av gastrointestinal fysiologi och identifiera nya terapeutiska mål. VSG har blivit det mest utförda bariatric förfarandet i kliniken i USA eftersom det är mycket effektiva på att producera viktminskning och metabolisk förbättring och är enklare att utföra än andra bariatric förfaranden. Därför har vi utvecklat och validerat en murin modell av VSG. Denna murina VSG modell recapitulates många av effekterna av VSG som ses hos människa, inklusive förbättrad glukos och blodtryck förordning. Metoden är baserad på isolering av magen, ligering av gastric fartyg och avlägsnande av 70% av magen av transecting längs större krökning i magen. Vi har framgångsrikt tillämpat detta kirurgiska protokoll till olika genetiskt modifierade mus linjer att definiera mekanistiska bidragsgivarna till fördelarna med VSG. Dessutom har denna murina VSG-modell kombinerats med andra kirurgiska tekniker, för att uppnå djupare mekanistisk insikt. Därför, detta är en enkel och mångsidig modell för att studera gastrointestinal fysiologi och hälsofördelar av bariatrisk kirurgi.

Introduction

Som fetmaepidemin fortsätter att växa världen över har obesitaskirurgi vunnit popularitet eftersom det är den mest effektiva långtidsbehandling för fetma1. Viktminskning genom kost och motion är tyvärr svårt att uppnå och relativt ineffektivt över långsiktiga2,3. Bariatric kirurgi, såsom vertikal hylsa gastrektomi (VSG), definieras som manipulering av mag-tarmkanalen i syfte att vikt förlust1,4. Även om viktminskning är ett framstående resultat av bariatrisk kirurgi, ger fetmakirurgi andra hälsofördelar såsom att förbättra fetma samsjuklighet och förlänga livslängden5. Till exempel resulterar obesitaskirurgi i höga andelen eftergift av typ 2-diabetes och hypertoni och minskningar i livstid risken för utveckling av vissa typer av cancer1,6,7. Att notera, är effekten av bariatrisk kirurgi orsakar eftergift av typ 2 diabetes och hypertoni ofta observeras snart efter operationen och före vikt förlust8,9. Detta belyser konceptet att det finns mekanismer som är oberoende av kroppsvikt bidrar till de hälsofördelar som observerats efter kirurgi. Djurmodeller av Magsäckskirurgi har utvecklats och används för att studera de mekanismer genom vilka dessa hälsofördelar uppstå10,11,12.

Vi har validerat en musmodell av VSG, som vi har ansökt om olika genetiskt modifierade musmodeller att studera de mekanismer som förbättrar obesitaskirurgi fetma samsjuklighet såsom typ 2-diabetes, hypertoni och kolorektal cancer10 , 11 , 12. gnagare modeller tillåta mer experimentell kontroll och förmåga att utföra genetiska eller farmaceutiska manipulation för att definiera rollen av specifika gener eller signalvägar sevärdheter. Vi fokuserar främst på VSG eftersom VSG är det mest utförda bariatric förfarandet i kliniken i USA13. VSG är dessutom en enkel kirurgisk modell med färre anatomiska ändringar jämfört med andra förfaranden såsom Roux-en-Y gastric bypass eller biliopancreatic avledning.

Våra musmodell av VSG recapitulates följande effekter av Magsäckskirurgi som observerats hos människor: viktminskning, nedsatt födointag, förbättrad glukos förordning förbättrade holme funktion, ökad utsöndring av postprandiellt glukagonlik peptid-1 (GLP-1), minskade arteriellt blodtryck och ökad cirkulerande gallsyra koncentrationer10,11,12,13,14,15. Därför är detta en idealmodell att studera kropp vikt beroende och oberoende mekanismer genom vilka VSG förbättrar eller åtgärdar fetma samsjuklighet. Dessutom är det en pålitlig modell som kan kombineras med andra kirurgiska ingrepp, vilket möjliggör undersökning av effekterna av VSG under olika sjukdomstillstånd med större mekanistisk insikt12.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Alla experimentella protokoll har godkänts av Cornell University institutionella djur vård och användning kommittén.

1. före kirurgisk beredning

Obs: Studie möss är vanligtvis på en C57BL kost-inducerad feta bakgrund att göra studier translationally relevant för människors fetma och insulinresistens. Manliga och kvinnliga möss kan studeras som beskrivs i de efterföljande stegen.

  1. Vid en ålder av 2 månader, placera möss på en 45 eller 60 procent fett kost i 2 månader (se Tabell för material).
    Obs: Möss matas en hög fett diet för att skapa en feta och insulinresistenta fenotyp. Kortare eller längre perioder av hög fett diet utfodring kan användas beroende på syftet med studien.
  2. Fortsätt att mata möss ad libitum tills kirurgi. Om baslinjen mätningar behövs, efter 7 veckors hög fett diet utfodring, snabb möss för 6 h eller över natten och ta en baslinje blodprov för mätning av metaboliter av intresse (t.ex. glukos).
  3. Fortsätt möss på hög fett diet och tillåta möss en vecka att återhämta sig efter bloduppsamling före sham kirurgi eller VSG. Placera möss på en flytande kost (se Tabell för material) för 4 dagar före operation.
    Obs: Möss bibehålls på en flytande kost innan och efter operationen för att rensa mag-tarmkanalen av partiklar som kan försämra den helande reaktionen.
  4. Sterilisera följande före operation: folie, gasbinda, bomull spets applikatorer (CTA) och kirurgiska instrument (hemostat, operativsystem sax, iris sax, dumont forcep, sågtandade Brown-Adson forcep, sondmatning nål, microneedle drivrutin, våren sax ).

2. vertikal Sleeve Gastrectomy och Sham förfaranden

  1. På operationsdagen väga möss för att erhålla en baslinjemätning för vikt.
  2. Utrusta kirurgiska rummet med en narkos system, uppvärmda vattenbad och värmedyna. Inställt i vattenbad på 37 ° C och använda den för att värma 0,9% koksaltlösning för bevattning. Rengöra operationsområdet med 70% etanol och Använd steril teknik för att öppna Ånghärdad kirurgi pack och verktyg.
    Obs: Värmedyna används för att värma djuret under operation och återhämtning från anestesi.
  3. Använder en induktion kammare, söva musen med 5% isofluran och O2 flöde på 1 L/min. bekräfta att musen är i lämpliga planet av anestesi genom att utföra en tå nypa. Upprätthålla musen med 1-3% isofluran och en O2 flöde på 0,6 L/min när en konsekvent plan av anestesi har uppnåtts.
  4. När musen är sövda, placera ögonsalva (se tabell för material) på sina ögon att hålla dem fuktiga under operation. Vid denna tid också administrera en smärtstillande, såsom meloxikam (2 mg/kg subkutant). Klipp håret från umbilicus till den axill håller huden ner försiktigt för att ge spänning.
    1. Som musens hud är tunn och känslig, var noga med att inte orsaka hudskador när klippning håret. Ren huden med povidonjod och alkohol.
    2. Don sterila handskar och förbereda sterila kirurgiska området och instrument. Utföra resten av proceduren med steril teknik. Förbered det sterila kirurgiska området genom att placera sterila kirurgiska draperier på vardera sidan av musen. Använda Ånghärdad aluminiumfolie för att skapa en kirurgiska draperi för musen.
    3. Klipp ett litet hål i den aluminiumfolie att tillåta åtkomst till musens buken.
  5. Gör ett snitt i huden från mitten av buken (naveln) till nivån för xiphoid brosk med en iris-sax. Identifiera linea alba och använda iris sax för att klippa igenom kroppen väggen längs linea alba. Använd CTAs försiktigt lyfta magen ur buken och sedan rakt på sak dissekera den större omentum bort av större krökning i magen.
  6. Ligera den korta gastric artär som går mellan fundus i magen och mjälten genom att placera två ligaturer med 7-0 monofilament resorberbar sutur. Använd våren sax för att klippa mellan de två ligaturer. När artären är transected, fullt exteriorize magen från bukhålan. Placera gasbinda under magen och våt med koksaltlösning att hålla vävnaden fuktiga.
  7. Bluff förfarande
    1. För förfarandet för sham, placera en lös enkel kontinuerlig mönster av suturen med 6-0 monofilament resorberbar sutur med en konisk nål. Börja 2 mm till höger (kirurgens höger) i matstrupen. Placera suturlinjen längs ventrala gastric väggen och sedan fortsätta längs den dorsala gastric väggen.
      Obs: För alla gastric manipulationer, använda endast monofilament resorberbar sutur för att minska risken för infektion. Dessutom Använd endast sutur med en konisk nål för alla gastric manipulationer, som användning av en skärande nål ökar risken för suturen ”pull-through” leder till gastric vävnadsskada och såret sårruptur.
    2. Passera nålen helt genom en gastric vägg medan placera suturen. Kontrollera att suturen är liggande, men inte begränsa magen. Försiktigt knyta suturen av med 3-4 kastar och hoppar till steg 2,9.
    3. VSG förfarandet för hoppa över steg 2,7 och fortsätt med steg 2,8.
  8. VSG förfarande
    1. För förfarandet för VSG, ligera framstående grenarna av den gastric artär och ven med 7-0 monofilament resorberbar sutur med en konisk nål med 3 kastar för varje Knut. Placera ligaturer precis nedanför (dvs.mot den mindre krökningen i magen) den avsedda linjen av transection.
      Obs: Den avsedda linjen av transection startar på ~ 2 mm ovanför (menande mot större krökning i magen) Den kardiella notch i magen och minst 2 mm nedanför de margo pilcatus och sträcker sig till proximala ände höger lob i bukspottkörteln. Vanligtvis finns det 4 fartyg per magsäckens vägg som behöver vara sammanskrivna; Detta kan dock variera mellan möss.
    2. För att förhindra spill av maginnehållet under gastrektomi, placera en enkel kontinuerlig linje av suturen passerar både mag-väggar precis nedanför den avsedda linjen av transection med 6-0 monofilament resorberbar sutur med en konisk nål. Påbörja suturlinjen till kirurgens höger i matstrupen och under margo pilcatus och slutet precis ovanför bukspottkörteln.
    3. Placera tunn spets Peanger ovanför suturlinjen och använda våren sax för att klippa mellan suturlinjen och Peanger. Ta bort transected gastric vävnaden från fältet sterila kirurgiska.
Använd uppmaningar för att rengöra blod och digesta utanför magen.
  • Förstärka apposition i mag-väggar med 6-0 monofilament resorberbar sutur med en konisk nål med ett enkelt diskontinuerligt mönster.
    Obs: En enkel kontinuerliga suturen mönster rekommenderas eftersom detta ger säkrare stängning än enkel kontinuerlig sutur mönstret.
  • Spola den gastric återstoden med saltlösning under hela förfarandet för att hålla vävnaden fuktig och ren. Använd en 20G sondmatning nålen bifogas en 20 mL spruta för att utföra magsköljning med saltlösning. Använd denna storlek för att säkerställa tillräcklig tryck tillhandahålls utan att riskera gastric vävnadsskada från övertryck eller oavsiktlig gastric vävnadsskada från användning av en regelbunden spetsig nål.
  • Använda ett minimum av 20 knop till Stäng ordentligt magen; uppmärksamma stängningen längs esofagus, som denna sida är svårare att komma åt och därför är ofta en plats för sårruptur.
  • Se till att det inte finns några läckor genom att försiktigt trycka på magen med CTA. Om läckor identifieras, placera ytterligare enkla diskontinuerligt knutar på områden av läckage och sedan läcka test igen. Läckagetest tills inget läckage upptäcks.
  • Göra en sista noggrann lavage i magen med minst 60 mL koksaltlösning för att säkerställa att ingen infektiös partiklar har lämnats kvar.
  • Placera magen tillbaka i bukhålan under levern använder en CTA. Placera CTAs längs den dorsala delen av bukhålan att absorbera alla överflödig vätska. Med hjälp av en trubbig 18G nål, injicera ringer-laktat lösning (LRS) med eller utan antibiotika (0,5 mL LRS +/-20 mg/kg Enrofloxacin) direkt i bukhålan, strax före stängning.
    Obs: Detta ersätter vätskeförlusten erfarna under operation och ger en metod för direkt tillämpning av antibiotika till operationsområdet att hjälpa till med återhämtning.
  • Stäng magmuskelstation lagret med 6-0 monofilament resorberbar sutur med en konisk nål i ett enkelt diskontinuerligt mönster. Stäng sedan hudlagret med 6-0 monofilament resorberbar sutur i en enkel kontinuerlig mönster.
  • Placera vävnad lim på huden och vik huden över suturlinjen att begrava suturen så att musen inte kan störa sårslutning postoperativt.
  • Stäng av isofluran och låt musen återställa på värme pad för 10-15 minbefore returneras till dess buren. Lämna inte djuret utan uppsikt tills den har återfått medvetandet och kan flytta.
  • Hålla djur inrymt ensamma tills helt återhämtat sig från operationen.
    Obs: Om korrekt mat intag mätningar skall erhållas under hela studien, möss bör fortsätta att hållas ensamma under hela studien. Det finns en risk för främmande kropp obstruktion från att äta buren sängkläder. Djur bör hållas i burar utan sängkläder förutom häckande material för att ge berikande (se Tabell för material).
  • 3. postoperativ mus vård och mätningar

    1. Återgå musen till dess buren och placera buren på en värmedyna. Upprätthålla möss på ett flytande kost i minst 7 dagar efter operation. Administrera en smärtstillande, såsom meloxikam (2 mg/kg subkutant), för 2 dagar efter operationen.
      Obs: Ett antibiotikum, såsom enrofloxacin (20 mg/kg), kan ges i upp till 7 dagar efter operation. Antibiotika ges för att minimera risken för infektion från det kirurgiska ingreppet och kan eller kan inte krävas beroende på nivån på sterilitet underhålls under hela förfarandet. Om antibiotika används, måste de dock administreras till alla möss i samma studie att upprätthålla konsistens.
    2. Under den postoperativa perioden bedöma kroppsvikt, födointag, defekation, aktivitetsnivå och disposition minst dagligen för att säkerställa korrekt läkning och återhämtning. Genomföra postoperativ övervakning i 14 dagar efter operation.
      Obs: Kirurgiska misslyckande är typiskt sett antingen omedelbart efter kirurgi eller inom tre dagar efter operativt. Djur som inte äter eller dricker på den andra dagen efter operationen måste övervakas noga för kirurgiska komplikationer.
    3. Efter avslutad postoperativa perioden, mäta kropp vikt och mat intag regelbundet under hela studien att säkerställa bevarandet av den lämpliga fenotypen.
    4. Utföra ett oral glukostoleranstest (OGTT) för att bedöma glukostolerans, glukos-stimulerad insulinsekretion, och gut hormon.
      1. Utföra OGTT hos möss efter fasta dem för 6 h och sedan sondmatning möss med glukoslösning 50% vid en dos på 1 g/kg.
      2. Samla svans blodprov på 0, 2,5, 5, 15, 30, 60 och 120 minuter efter sondmatning. Mät blodsockret med en Glukometer vid dessa tidpunkter. Samla serumprover vid varje tidpunkt för mätning av olika hormoner såsom insulin och GLP-1.
      3. Snabb möss för 6 h före dödshjälp. Ta en sista blod prov och glukos mätning. Jämför slutliga glukos mått baslinjemätning. Euthanize möss med en intraperitoneal injektion av pentobarbital vid en dos på 200 mg/kg.
      4. Använd baslinjen och slutliga serumprov att mäta ytterligare analyter och jämföra pre- och postoperativ kirurgiska värden.

    Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

    Representative Results

    De sham och VSG förfaranden avbildas i figur 1. Figur 1A visar där suturlinjen är placerad längs mag-väggar under förfarandet för sham. Detta samma område är där magsäcken skärs under VSG operation. Figur 1B visar tubulära kvarlevan av magen vänster efter utförandet av VSG.

    Statistik och dataanalys
    Data presenteras som medelvärde ± SEM. Data analyserades av ANOVA med Tukeys efter test eller Students t-test som anges. Skillnader ansågs signifikant på P< 0,05.

    VSG minskar energi intag och kroppsvikt och förbättrar glukostolerans
    High fat diet utfodras manliga C57BL möss var opererad och studerade som beskrivs ovan. VSG manövrerade möss uppvisade lägre energiintag och kroppsvikt jämfört med ad libitum matas sham manövrerade möss (kumulativ energiintag: Sham = 474 ± 19, VSG = 385 ± 14 kcal; Slutliga kroppsvikt: Sham = 34,5 ± 2,1, VSG = 29,9 ± 1 g; Figur 2A-B, *P< 0,05). Tre veckor efter operationen utfördes ett oralt glukostoleranstest. Glukos mätningar gjordes med hjälp av en Glukometer (se Tabell för material). Serum insulin och GLP-1 koncentrationer mättes av multiplex smörgås elektrokemiluminescens immunoassay (se Tabell för material). VSG förbättrad glukostolerans (glukos AUC0-120: Sham = 1 467 ± 76, VSG = 1 061 ± 72 mmol/L x 120 minuter; Figur 3A-B, P < 0,01), ökat glukos-stimulerad insulinsekretion (procent ökning av insulin från baslinjen till 15 minuter efter glukos sondmatning: Sham = 92 ± 54, VSG = 2,720 ± 1 241%; Figur 3 C, P < 0,05), och ökade postprandiellt GLP-1 sekretion jämfört med sham manövrerade ad libitum matas kontroll möss (GLP-1 AUC0-120: Sham =-124 ± 45, VSG = 111 ± 48 pmol/L x 120 minuter; Figur 3D, *P < 0,01). Dessa resultat överensstämmer med vad som ses hos människa och andra gnagare modeller efter obesitaskirurgi9,17,18,19.

    Figure 1
    Figur 1: Diagram över VSG. Skildring av rad transection under VSG. (A) detta samma område är där en enkel kontinuerlig linje av suturen är placerad längs mag-väggar under förfarandet för sham. (B) skildring av tubulär kvarlevan vänster efter avslutning av förfarandet VSG. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

    Figure 2
    Figur 2: VSG sänker energi intag och kroppsvikt. Kumulativ energi intag (A) och kropp vikt (B). P < 0,05 jämfört med Sham med Student's t-test och *P < 0,05 Sham jämfört med VSG genom tvåfaktorsautentisering ANOVA. Resultaten visas som betyda ±SEM. n = 6-7 per grupp. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

    Figure 3
    Figur 3: VSG förbättrar glukostolerans, ökar glukos-stimulerad insulinsekretion och ökar postprandiellt GLP-1 utsöndring under en OGTT. (A) blodglukoskoncentration, (B) glukos area under kurvan (AUC), (C) procent ökning av insulin serumkoncentrationer från baslinjen till 15 minuter efter glukos sondmatning, och (D) serum totalt GLP-1 koncentrationer under en OGTT. P < 0,05, **P < 0,01, ***P < 0,001 VSG jämfört med Sham med Student's t-test av AUC eller procentuella förändringen av insulin. Resultaten visas som menar ± SEM. n = 6-7 per grupp. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

    Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

    Discussion

    Magsäckskirurgi är mest effektiva långsiktig behandling av fetma och leder andra hälsofördelar såsom höga priser på typ 2 diabetes och hypertoni eftergift1,9,15. Murina modeller av bariatrisk kirurgi ger ett kraftfullt verktyg att identifiera de mekanismer som orsakar obesitaskirurgi snabb och uttalad förbättringar i fetma samsjuklighet. Dessutom ger murina modeller av bariatrisk kirurgi ett nytt paradigm för att studera grundläggande biologi som tarmen reglerar olika processer, såsom ämnesomsättning, kardiovaskulär funktion och carcinogenes10,11, 12.

    Vi har utvecklat en musmodell av vertikal sleeve gastrectomy att studera de mekanismer genom vilka obesitaskirurgi förbättrar fetma samsjuklighet såsom typ 2 diabetes och hypertoni10,11,12. Denna modell av VSG består av ligering av magen fartyg följt av borttagning av 70% av magen. Villkoret kontroll är en bluff operation där suturen är placerad längs gastric väggen på samma plats där magen skulle vara transected i ett VSG förfarande. Häri, presenterar vi data där simulerade manövrerade möss matades ad libitum efter operation. För att undersöka kroppen vikt-oberoende effekter, en simulerad manövrerade kontrollgrupp som är mat begränsas i syfte att matcha sin kroppsvikt till VSG manövrerade möss bör studeras, som vi tidigare har beskrivit11,12. Våra data visar att denna VSG modell uppnår både minskning av kroppsvikt och födointag jämfört med ad libitum utfodrats sham manövrerade kontroller. Oralt glukos tolerans tester görs minst två veckor efter operationen för att tillåta att djur tillräckligt med tid att återhämta sig helt från operation, så att kirurgiska återhämtning inte är en störande faktor. Konsekvent med minskningen av kroppsvikt, den presenterade modellen uppvisar förbättrad glukostolerans. Liknar vad observeras hos patienter efter obesitaskirurgi, VSG manövrerade möss uppvisar anmärkningsvärda ökningar av glukos-stimulerad insulinsekretion och postprandial GLP-1 sekretion14,17.

    Lab medlemmar är grundligt utbildade på sham kirurgi och VSG och praxis i flera månader för att behärska denna teknik och uppnå en överlevnad av mer än 95%. Detta varierar dock beroende på tidigare erfarenhet. Innan en fullständig undersökning, rekommenderas det att en ny kirurg validera sin VSG och bluff operationer genom att mäta kroppsvikt, födointag och glukostolerans i praktiken sham och VSG manövrerade möss att säkerställa att lämpliga fenotypen uppnåtts. Dessutom är det viktigt att noga övervaka möss efter operation för tecken på kirurgiska fel. Den vanligaste postoperativa komplikationen är läckage av maginnehåll. Postoperativ tecken på denna komplikation innefattar bristande livsmedelskonsumtion, avsaknaden av fekal produktion och en påtaglig övre buken massa. Djur som uppvisar tecken på kirurgisk komplikation bör bli euthanized omgående. Om postoperativa komplikationer är ett återkommande problem, måste en omvärdering av operationsteknik utföras. Det vanligaste problemet är otillräcklig slutning av gastric väggen leder till läckage av maginnehållet. Stängningen av gastric väggen är det viktigaste steget i protokollet. När suturen placering är klar, bör det finnas utan synliga luckor mellan knop. Det är klokt att CTAs används för att kontrollera att det finns inget läckage av maginnehåll före stängning buken. En annan mindre vanligt problem är induktion av gastrointestinala stasis genom oavsiktlig manipulation av tunntarmen när du först tar bort magen från bukhålan. Var noga med att inte manipulera tunntarmen eftersom musen tunntarmen är mycket bräcklig och överdriven manipulation av tunntarmen kan leda till stagnation.

    Våra musmodell av VSG har liknande kirurgiska resultat till andra grupper och överlevnaden mer än 95%. Liknar mänskliga patienter och andra musmodeller av VSG, presenterade mus VSG modeller utställda viktminskning, nedsatt födointag, förbättrad glukostolerans och ökade postprandiellt GLP-1 sekretion4,18, 19. denna bluff förfarande skiljer sig från andra modeller eftersom det handlar om placering av suturen även andra modeller enbart gäller trycket på magen med trubbig pincett19,20. Att placera suturer tillåter kontroll av effekten av att placera främmande material i magen samtidigt som kirurgisk manipulation av den gastric vävnaden. Liksom någon musmodell är begränsningarna av denna teknik att översättningen av data som genereras från denna musmodell för människor begränsas av arter skillnader. Men möjliggör möss större kontroll och experimentella manipulation, som ger en djupare mekanistisk insikt än kan uppnås hos patienter. Även om majoriteten av murina bariatric studierna har främst fokuserat på glucoregulatory fördelarna med dessa förfaranden, använder vi presenterade murina VSG modellen för att definiera drivkrafterna bakom effekterna av bariatrisk kirurgi om hypertoni och cancer12 . Detta belyser viktiga framtida tillämpningar av denna modell.

    Murina modeller av bariatrisk kirurgi ger ett viktigt verktyg för att studera de mekanismer genom vilka obesitaskirurgi producerar viktminskning och ger hälsofördelar. Bariatric modeller ger dessutom ett nytt paradigm att studera hur tarmen gränssnitt med andra fysiologiska processer i kroppen. Beskrivs här är en modell av VSG som tidigare har validerats och recapitulates många av de effekter som ses hos människa efter VSG10,11,12. Dessutom är detta en mångsidig modell som framgångsrikt kan kombineras med andra kirurgiska förfaranden för bedömning av olika sjukdomsprocesser och/eller mer detaljerade mekanistiska bedömning12.

    Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

    Disclosures

    Författarna förklarar inga intressekonflikter, förutom Dr Cummings fick finansiering från Eli Lilly and Company.

    Acknowledgments

    Denna forskning stöds av NIH/NCI R21CA195002-01A1, The presidents råd Cornell kvinnor och SUNY Graduate mångfald gemenskap. Dr. Cummings laboratorium fick också finansiering under projekttiden från Cornell jämförande Cancer biologi träningsprogram och Eli Lilly and Company.

    Materials

    Name Company Catalog Number Comments
    45% high fat diet Research Diets D12451
    60% high fat diet Research Diets D12492
    Boost Nestle 160-67538 rich chocolate flavor
    6-0 Suture Ethicon Z432 monofilament absorbable/taper
    7-0 Suture Covidien 8866127-01 monofilament absorbable/taper
    Cotton Swabs Fisherbrand 23-400-118 small
    Cotton Swabs Fisherbrand 233-400-101 large
    Gauze Various 4x4 4 ply and 2x2 4 ply
    Foil Various
    Surgery drape Various
    0.9% saline solution Various
    LRS Hospira 170RX
    Betadine Various
    Alcohol Various
    Eye Ointment Paralube® Vet Ointment 17033-211-38
    Tissue Adhesive Vetbond 1469SB
    Meloxicam (Metacam) Boehringer Ingelheim 141-213 5 mg/ml
    Enrofloxacin Baytril 08713254-186599 22.7 mg/ml
    Thin tipped hemostats Fine Science Tools 13021-12
    Metzenbaum Scissor Fine Science Tools 14018-18
    Iris Scissors Fine Science Tools 14058-09
    Dumont Forcep Fine Science Tools 11251-20
    Serrated Forcep Fine Science Tools 11020-12
    Gavage needle Fine Science Tools 18060-20
    Microneedle driver Fine Science Tools 12075-14
    Spring Scissor Fine Science Tools 15396-00
    Insulin syringe Various
    1mL syringe Various
    20mL syringe Various
    Glucometer (one touch ultra mini) Lifescan 70021208
    Multiplex insulin and GLP-1 kit Meso Scale Discovery K15171C-1
    GraphPad Prism 6.00 GraphPad Software
    Nestlets Ancare NES3600

    DOWNLOAD MATERIALS LIST

    References

    1. Buchwald, H., et al. Bariatric surgery: a systematic review and meta-analysis. JAMA. 292 (14), 1724-1737 (2004).
    2. Wadden, T. A., Butryn, M. L., Byrne, K. J. Efficacy of lifestyle modification for long-term weight control. Obes Res. 12, Suppl . 151s-162s (2004).
    3. Yanovski, S. Z., Yanovski, J. A. Obesity. N Engl J Med. 346 (8), 591-602 (2002).
    4. Abbatini, F., et al. Long-term effects of laparoscopic sleeve gastrectomy, gastric bypass, and adjustable gastric banding on type 2 diabetes. Surg Endosc. 24 (5), 1005-1010 (2010).
    5. Sjostrom, L., et al. Effects of bariatric surgery on mortality in Swedish obese subjects. N Engl J Med. 357 (8), 741-752 (2007).
    6. Adams, T. D., et al. Cancer incidence and mortality after gastric bypass surgery. Obesity (Silver Spring). 17 (4), 796-802 (2009).
    7. Vest, A. R., Heneghan, H. M., Schauer, P. R., Young, J. B. Surgical management of obesity and the relationship to cardiovascular disease. Circulation. 127 (8), 945-959 (2013).
    8. Ahmed, A. R., et al. Laparoscopic Roux-en-Y gastric bypass and its early effect on blood pressure. Obes Surg. 19 (7), 845-849 (2009).
    9. Pories, W. J., et al. Who would have thought it? An operation proves to be the most effective therapy for adult-onset diabetes mellitus. Ann Surg. 222 (3), 339-350 (1995).
    10. Garibay, D., et al. beta-Cell Glucagon-Like Peptide-1 Receptor Contributes to Improved Glucose Tolerance After Vertical Sleeve Gastrectomy. Endocrinology. 157 (9), 3405-3409 (2016).
    11. McGavigan, A. K., et al. TGR5 contributes to glucoregulatory improvements after vertical sleeve gastrectomy in mice. Gut. 66 (2), 226-234 (2017).
    12. McGavigan, A. K., et al. Vertical sleeve gastrectomy reduces blood pressure and hypothalamic endoplasmic reticulum stress in mice. Dis Model Mech. 10 (3), 235-243 (2017).
    13. Esteban Varela, J., Nguyen, N. T. Laparoscopic sleeve gastrectomy leads the U.S. utilization of bariatric surgery at academic medical centers. Surg Obes Relat Dis. 11 (5), 987-990 (2015).
    14. Laferrere, B., et al. Effect of weight loss by gastric bypass surgery versus hypocaloric diet on glucose and incretin levels in patients with type 2 diabetes. J Clin Endocrinol Metab. 93 (7), 2479-2485 (2008).
    15. Adams, T. D., et al. Health benefits of gastric bypass surgery after 6 years. Jama. 308 (11), 1122-1131 (2012).
    16. McGavigan, A. K., et al. TGR5 contributes to glucoregulatory improvements after vertical sleeve gastrectomy in mice. Gut. , (2015).
    17. Peterli, R., et al. Improvement in glucose metabolism after bariatric surgery: comparison of laparoscopic Roux-en-Y gastric bypass and laparoscopic sleeve gastrectomy: a prospective randomized trial. Ann Surg. 250 (2), 234-241 (2009).
    18. Ryan, K. K., et al. FXR is a molecular target for the effects of vertical sleeve gastrectomy. Nature. 509 (7499), 183-188 (2014).
    19. Wilson-Perez, H. E., et al. Vertical sleeve gastrectomy is effective in two genetic mouse models of glucagon-like Peptide 1 receptor deficiency. Diabetes. 62 (7), 2380-2385 (2013).
    20. Pressler, J. W., et al. Vertical sleeve gastrectomy restores glucose homeostasis in apolipoprotein A-IV KO mice. Diabetes. 64 (2), 498-507 (2015).

    Tags

    Biomedical Engineering fråga 130 Vertikal hylsa gastrektomi mus fetma typ 2 diabetes murint diabetes
    En murin modell av vertikal Sleeve Gastrectomy
    Play Video
    PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

    Cite this Article

    Garibay, D., Cummings, B. P. AMore

    Garibay, D., Cummings, B. P. A Murine Model of Vertical Sleeve Gastrectomy. J. Vis. Exp. (130), e56534, doi:10.3791/56534 (2017).

    Less
    Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
    View Video

    Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

    Waiting X
    Simple Hit Counter