Эта статья представляет изменение экспериментальные протоколы для dimethylmonothioarsinic кислоты (VDMMTA) и dimethyldithioarsinic кислота (VDMDTA) синтеза, вызывая dimethylarsinic кислоты (VDMA) thiolation путем смешивания DMAV , Na2S и так4H2. Измененный Протокол обеспечивает экспериментальный руководящего положения, тем самым преодоления ограничений синтеза шагов, которые могло вызвать экспериментального сбоев в количественном анализе.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Подготовка DMMTAV и DMDTAV с использованием DMAV для окружающей среды приложений: синтеза, очистки и подтверждение
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Dimethylated thioarsenicals как dimethylmonothioarsinic кислоты (DMMTAV) и dimethyldithioarsinic кислота (DMDTAV), которые производятся метаболический путь dimethylarsinic кислоты thiolation (VDMA), были недавно Найдено в окружающей среде, а также органов человека. DMMTAV и DMDTAV может быть определена количественно определить экологические последствия dimethylated thioarsenicals и их устойчивость в окружающей среде. Метод синтеза этих соединений нестандартизированного, делая репликации предыдущие исследования сложной. Кроме того существует недостаток информации о технологии хранения, включая хранение соединений без видов трансформации. Кроме того потому что доступен лишь ограниченный объем информации о методах синтеза, может быть экспериментальной трудности в обобщения стандартных химических веществ и количественного анализа. Протокол, представленная в настоящем документе предоставляет метод практически модифицированных синтез dimethylated thioarsenicals, DMMTAV иVDMDTA и поможет в количественной оценке видов разделение анализа с использованием высокопроизводительных жидкости хроматографии в сочетании с масс-спектрометрия индуктивно связанной плазмы (ВЭЖХ-ICP-MS). Экспериментальные шаги этой процедуры были изменены, сосредоточив внимание на подготовке химических реагентов, методы фильтрации и хранения.
Введение
Так как dimethylarsinic кислоты (VDMA) была продемонстрирована выставлять острой токсичности и генотоксичности благодаря метилирования и thiolation после приема1,2, метаболический путь thiolation мышьяка имеет был интенсивно изучали как in vitro и in vivo3,4 , также как и окружающей среды (например, фильтрата полигона)5,6. Предыдущие исследования показали, как сокращение и аналогов thiolatedV DMA в живых клеток, например, dimethylarsinou....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
1. синтез DMMTAV
-
Химическая подготовка и молярное соотношение смешивания DMAV, Na2S и H2т4
Примечание: DMAV: Na2S:H2так4 = 1:1.6:1.6- Распустить 5.24 gV DMA в 40 мл деионизированная и N2-очищенные (очищенные для по крайней мере 30 мин) воды в пластиковых пробирок 50 мл.
- Подготовка реагента2S Na, растворяя 14.41 g Na2S·9H2O в 50 мл деионизированная и N2-очистка воды в колбу 250 мл.
- Подготовка H2так деионизированная4 реагента, ....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Поскольку метод синтеза DMAIII 19ошибочно подготовлен DMMTAV , проверке синтезированных DMMTAV и DMDTAV является важным шагом для синтеза и извлечения и определения идеального стандарта химические материалы. Синтезированные химические вещества могут быть проверены пик DMMTAV (154 МВт г•моль-1) и DMDTAV (170 МВт г•моль-1) масса заряд соотношение (m/z) с использованием ре.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Разработанный протокол разъяснил важнейшие шаги, что предыдущие исследования1,3,4,8,15 опущен или аббревиатура, которая может привели к трудности с или неудачи во время СинтезV V DMMTA и DMDTA. Как DMMTAV -чувствительных к окислению1,5, химических реагентов для его синт.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Авторы не имеют ничего сообщать.
Благодарности
Это исследование было поддержано программы фундаментальных исследований науки (номер проекта: 2016R1A2B4013467) через национальные исследования фонд из Кореи (NRF) финансируется министерством науки, ИКТ и будущего планирования 2016 и также поддерживается Корея фундаментальной науки Институт исследований программы (номер проекта: C36707).
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Какодиловая кислота | Sigma-Aldrich | 20835-10G-F | |
| Нонагидрат сульфида натрия | Sigma-Aldrich | S2006-500G | |
| Серная кислота 96% | J.T.Baker | 0000011478 | |
| ацетат аммония | Sigma-Aldrich | A7262-500G | |
| Муравьиная кислота 98% | Wako Pure Chemical Industries, Ltd. | 066-00461 | |
| Диэтиловый эфир (экстра чистый) | Junsei Chemical | 33475-0380 | |
| Колпачок адаптера для 60 мл Bond Elut catridges | Agilent Technologies | 12131004 | Тип шприца SPE |
| Bond Elut C18 картридж | Agilent Technologies | 14256031 | Тип шприца SPE |
| HyPURITY C-18 | Thermo Scientific | 22105-254630 | 5 мкм, 125 x 4,6 мм |
| Перчаточный ящик | Chungae-chun, Республика Корея | Customized | |
| Agilent 1260 Infinity Bio-inert LC | Agilent Technologies | DEAB600252, DEACH00245 | |
| Agilent Technologies 7700 Серия ICP-MS | Agilent Technologies | JP12031510 | |
| Finnigan LCQ Deca XP MAX Mass Spectrometer System | Thermo Electron Corporation | LDM10627 |
Ссылки
- Suzuki, K. T., et al. Dimethylthioarsenicals as arsenic metabolites and their chemical preparation. Chem. Res. Toxicol. 17, 914-921 (2004).
- Kuroda, K., et al. Microbial metabolite of dimethylarsinic acid is highly toxic and genotoxic. Toxicol. Appl. Pharmacol. 198, 345-353 (2004).
- Naranmandura, H., Iwata, K., Suzuki, K.....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
