Die Einnahme von Leuchtstofflampen, magnetische Nanopartikel für die Bestimmung der Fluid-Aufnahme Fähigkeiten bei Insekten

Summary

Flüssigkeit-Fütterung Insekten haben die Fähigkeit, kleinste Mengen von Flüssigkeiten aus porösen Oberflächen zu erwerben. Dieses Protokoll beschreibt eine Methode um die Fähigkeit der Insekten zu Verschlucken von Flüssigkeiten aus porösen Oberflächen mit Fütterung Lösungen mit Leuchtstofflampen, magnetische Nanopartikel direkt zu bestimmen.

Abstract

Flüssigkeit-Fütterung Insekten nehmen eine Vielzahl von Flüssigkeiten, die in der Umwelt als Pools, Filme, oder beschränkt sich auf kleine Poren. Studien von flüssigen Erwerb erfordern Beurteilung Mouthpart Struktur und Funktion Beziehungen; flüssige Aufnahme Mechanismen sind jedoch historisch aus der Beobachtung der strukturellen Architektur, manchmal ohne Begleitung mit experimentellen Beweis abgeleitet. Hier berichten wir über eine neuartige Methode zur Beurteilung der Fähigkeiten der Flüssigkeit-Aufnahme mit Schmetterlingen (Lepidoptera) und fliegen (Diptera) mit kleinen Mengen von Flüssigkeiten. Insekten werden mit 20 % Saccharose-Lösung gemischt mit Leuchtstofflampen, magnetische Nanopartikel aus Filterpapiere bestimmten Porengrößen gefüttert. Die Ernte (interne Struktur zum Speichern von Flüssigkeiten verwendet) ist das Insekt entnommen und auf einem confocal Mikroskop gelegt. Ein Magnet ist winkte, von der Ernte, das Vorhandensein von Nanopartikeln, zu bestimmen, die angeben, ob die Insekten Flüssigkeiten aufnehmen können. Diese Methode wird verwendet, um einen weit verbreiteten Fütterung Mechanismus (Kapillarwirkung und flüssigen Brückenbildung) aufzudecken, der möglicherweise unter Lepidoptera und Diptera geteilt wird, bei der Fütterung von porösen Oberflächen. Darüber hinaus können mit dieser Methode für Studien der Fütterung Mechanismen unter einer Vielzahl von Flüssigkeit-Fütterung Insekten, darunter diejenigen wichtig in einer Krankheitsübertragung und Biomimetik und möglicherweise andere Studien, die Nano-Mikro-Größe oder Leitungen beinhalten wo Flüssigkeitstransport erfordert Überprüfung.

Introduction

Viele Insektengruppen haben Mundwerkzeuge (Proboscises) geeignet für die Fütterung auf Flüssigkeiten, wie Nektar, faulenden Früchten, sap, fließt (z.B. Diptera¹, Lepidoptera², Hymenoptera³), Xylem (Hemiptera⁴), Tränen (Lepidoptera ( ⁵), und Blut (Phthiraptera⁶, besitzen⁷, Diptera⁷, Hemiptera⁸, Lepidoptera⁹). Die Fähigkeit der Insekten ernähren sich von Flüssigkeiten ist Krankheit Getriebe^4,

Protocol

(1) Insektenarten, Zubereitung von Lösungen und Fütterung Station Setup

Hinweis: Kohl Schmetterlinge (Pieris Rapae L., Pieridae) sind wie die Arten der Vertreter Lepidoptera ausgewählt, weil sie in früheren Studien der Flüssigkeit-Aufnahme Fähigkeiten und Mouthpart Morphologie^22,23verwendet wurden. Stubenfliegen (Musca Domestica L., Muscidae) und blaue Flasche fliegt (Hexamerinaufnahme Vomitoria L., Calliphoridae) werden verwendet, da sie oft beobachtet werden, Fütterung auf porösen Oberflächen¹³.

1. Bestellung p. Rapae....

Results

Die Studie der Muster in Flüssigkeit-Aufnahme Fähigkeiten unter Flüssigkeit-Fütterung Insekten erfordert Entschlossenheit der Fütterung auftreten. Das Protokoll hier skizzierten wird verwendet, um die begrenzende Pore Größe Hypothese unter Lepidoptera und Diptera¹³. Die begrenzende Pore Größe Hypothese besagt, dass Flüssigkeit-Fütterung Insekten aus Flüssigkeit gefüllten Poren nicht ernähren können, wenn der Porendurchmesser Größe kleiner als der Durchmesser der Fü.......

Discussion

Insekt Mouthpart Funktionalität ist historisch aus Studien von Brutto Morphologie abgeleitet (z. B.., Lepidoptera Rüssel Funktionalität im Zusammenhang mit einem trinken Stroh^25,-²⁶); jedoch haben neuere Studien, die experimentelle Beweise enthalten einen Paradigmenwechsel im Verständnis von der Komplexität der Insekten Mundwerkzeuge und Struktur-Funktions-Beziehungen-^2,-^12,-

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
20%ige Saccharoselösung	Domino Zucker		Zucker, der zur Herstellung der Saccharoselösung benötigt wird, mit dH2
O Phosphatgepufferte Kochsalzlösung (PBS)	Sigma-Aldrich	P5493	10-fache Konzentration verdünnt auf 1X in dH2O für Insektendissektionen
Konkave Objektträgerin mit einfacher Vertiefung	AmScope	BS-C6	Objektträger ist für die Einrichtung
Filterpapier	EMD	Millipore NY6004700 (60 & Mikro; m)	Nylon-Netzfilter und Isoporenfilter, die zur Herstellung einer porösen Oberfläche für die Insektenfütterung benötigt
werden Filterpapier	EMD Millipore	NY4104700 (41 & micro; m)	Nylon-Netzfilter und Isoporenfilter, die zur Herstellung einer porösen Oberfläche für die Insektenfütterung benötigt
werden Filterpapier	EMD Millipore	NY3004700 (30 & Mikro; m)	Nylon-Netzfilter und Isoporenfilter, die zur Herstellung einer porösen Oberfläche für die Insektenfütterung benötigt
werden Filterpapier	EMD Millipore	NY2004700 (20 & Mikro; m)	Nylon-Netzfilter und Isoporenfilter, die zur Herstellung einer porösen Oberfläche für die Insektenfütterung benötigt
werden Filterpapier	EMD Millipore	NY1104700 (11 & micro; m)	Nylon-Netzfilter und Isoporenfilter, die zur Herstellung einer porösen Oberfläche für die Insektenfütterung benötigt
werden Filterpapier	EMD Millipore	TCTP04700 (10 & Mikro; m)	Nylon-Netzfilter und Isoporenfilter, die zur Herstellung einer porösen Oberfläche für die Insektenfütterung benötigt
Filterpapier	EMD Millipore	TETP04700 (8 & Mikro; m)	Nylon-Netzfilter und Isoporenfilter, die zur Herstellung einer porösen Oberfläche für die Insektenfütterung benötigt
Filterpapier	EMD Millipore	TMTP04700 (5 & Mikro; m)	Nylon-Netzfilter und Isoporenfilter, die zur Herstellung einer porösen Oberfläche für die Insektenfütterung benötigt
werden Filterpapier	EMD Millipore	RTTP04700 (1 & micro; m)	Nylonnetzfilter und Isoporenfilter, die zur Herstellung einer porösen Oberfläche für die Insektenfütterung benötigt
Iris-Mikrodisparierschere	Carolina Biological Supply Company	623555	Scheren für das Sezieren
Insektenstifte	Bioquip Products	1208B1	Stifte, die bei Präparier- und Fütterungsversuchen verwendet werden
Präparierzange mit extrafeiner Spitze	Carolina Biological Supply Company	624684	Präpariergeräte
Leica M205 C Stereoskop	Leica Microsystems	M205 C	Stereoskop zum Sezieren
Inverses konfokales Mikroskop	Olympus	IX81	Fluoreszenzmikroskop zum Nachweis magnetischer Nanopartikel
Fisherbrand PTFE Einweg-Rührstab Fisherscientific		S68067	Magnet zum Nachweis von Nanopartikeln
Kimtech Science Kimwipes	Kimberly-Clark Professional	34155	Taschentücher zur Sicherung von Insekten während der Fütterung
Stubenfliege (Musca domestica) Puppen	Mantisplace.com	Insekten für Experimente
		Insekten für Experimente	Puppen
Larven des Kohlschmetterlings (Pieris rapae)	Carolina Biological Supply Company	144102	Insekten für Experimente
Finnpipette F1	ThermoFisher Scientific	4641080N	Mikropipette zum Dispensieren von Flüssigkeiten
Finntip 250 Pipettenspitzen	ThermoFisher Scientific	9400250	Mikropipettenspitzen
Mikroskop Glasabdeckfolien (=Deckgläser) (24 x 24 mm)	AmScope	CS-S24-100	Deckgläser zur Betrachtung des Insektenstamms am konfokalen Mikroskop