Создание первого поля как сердце сердца прародителями и кардиомиоцитов желудочков как от человеческих плюрипотентных стволовых клеток

Michael S. Yu; Sean Spiering; Alexandre R. Colas

doi:10.3791/57688

Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Создание первого поля как сердце сердца прародителями и кардиомиоцитов желудочков как от человеческих плюрипотентных стволовых клеток

6.8K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/57688

⸱

19 июня 2018 г.

Michael S. Yu^*¹^,² , Sean Spiering^*¹ , Alexandre R. Colas¹

¹Sanford Burnham Prebys Medical Discovery Institute, ²Department of Bioengineering, University of California at San Diego

^* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

Здесь мы описываем масштабируемый метод, используя простое сочетание Activin и Лентивирусы опосредованной Id1-гиперэкспрессия, для создания первого сердца поле как сердечная прародителями и кардиомиоцитов желудочков как из человеческих плюрипотентных стволовых клеток.

Аннотация

Поколение большое количество функциональных человеческих плюрипотентных стволовых клеток, полученных сердца прародителями и кардиомиоцитов определенных сердце области происхождения является предварительным условием для терапии сердечной клетки и моделирование болезней. Недавно мы показали, что гены Id необходимых и достаточных для указания первого прародителями поля сердца во время развития позвоночных. Эта дифференциация протокол использует эти выводы и использует гиперэкспрессия Id1 в сочетании с Activin как мощным указание подсказки производить первый сердце поля как прародителями (FHF-L). Важно отметить, что результирующая прародителями эффективно дифференцироваться (~ 70 – 90%) в кардиомиоцитов желудочков как. Здесь мы описываем подробный метод 1) генерировать Id1 экспрессирующих hPSCs и 2) дифференцировать cryopreservable прародителями FHF-L и кардиомиоцитов желудочков как масштабируемые количествах.

Введение

Крупномасштабное производство человеческих плюрипотентных стволовых клеток (hPSCs)-производных сердца прародителями и кардиомиоцитов является предпосылкой для основанного на стволовых клеток лечение¹, болезни,²^,³ и быстрое характеристика моделирования Роман пути регулирования сердца дифференциация⁴^,⁵^,⁶ и физиологии⁷^,,⁸. Хотя ряд исследования⁹^,¹⁰^,,^11<....