Dieses Protokoll beschreibt die Aufzeichnung des lokalen Feldes Potentiale mit Multi-Schaft, die lineare Silicon-Sonden. Umwandlung der Signale mit Hilfe der aktuellen Quelle dichteanalyse ermöglicht die Rekonstruktion der lokalen elektrischen Aktivität im Hippocampus Maus. Mit dieser Technik können räumlich begrenzten Gehirn Schwingungen frei beweglichen Mäusen untersucht werden.
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Methodenartikel
Aufzeichnung von räumlich eingeschränkt Schwingungen im Hippocampus Verhalten der Mäuse
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Das lokale Feld-Potenzial (LFP) ergibt sich aus Ionen-Bewegungen über neuronalen Membranen. Da die Spannung von LFP-Elektroden erfasst das summierte elektrische Feld eine große Menge von Hirngewebe widerspiegelt, ist die Gewinnung von Informationen über lokale Aktivitäten eine Herausforderung. Studium der neuronale Mikroschaltungen, erfordert jedoch eine sichere Unterscheidung zwischen wirklich lokale Veranstaltungen und Volumen durchgeführt Signale mit Ursprung in fernen Hirnregionen. Aktuelle Quelle Dichte (CSD) Analyse bietet eine Lösung für dieses Problem durch die Bereitstellung von Informationen über aktuelle Senke und Quelle in der Nähe der Elektroden. In Hirnarealen mit laminarer Cytoarchitecture wie Hippocampus erhalten Sie eindimensionale CSD durch Schätzung der zweiten räumliche Ableitung von der LFP. Hier beschreiben wir eine Methode zur Aufzeichnung Multilaminar drängendere mit linearen Silizium-Sonden in den dorsalen Hippocampus implantiert. CSD-Spuren werden auf einzelne Ableger der Sonde berechnet. Dieses Protokoll beschreibt somit ein Verfahren um räumlich begrenzten neuronalen Netzes Schwingungen im Hippocampus von frei beweglichen Mäuse zu beheben.
Einleitung
Schwingungen in die LFP engagieren sich kritisch in Informationsverarbeitung durch neuronale Schaltkreise. Sie decken ein breites Spektrum an Frequenzen, von langsamen Wellen (~ 1 Hz) bis hin zu schnellen Wellen Schwingungen (~ 200 Hz)1. Unterschiedliche Frequenzbänder sind verbunden mit kognitiven Funktionen, einschließlich Gedächtnis, emotionale Verarbeitung und Navigation2,3,4,5,6,7. Stromfluss über neuronalen Membranen bildet den größten Teil de....
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Protokoll
Alle Methoden, bei denen lebende Tiere sind durch das Regierungspräsidium Freiburg im Einklang mit dem deutschen Tierschutzgesetz genehmigt worden.
1. Vorbereitungen
- Entwerfen Sie und erstellen Sie eine entsprechende einsatzwerkzeug vorübergehend tragen die Silizium-Sonde und der Elektrode Stecker während des Prozesses der Implantation. Siehe Abbildung 1 für ein Beispiel benutzerdefinierte gebaute einsatzwerkzeug.
- Lösen Sie vorsichtig die Silizium Sonde und Elektrode Connector aus der Verpackung mit Keramik Spitzen Pinzette.
- Heben Sie die Anschlussplatine und sicher befestigen Sie ....
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Ergebnisse
Abbildung 1 zeigt das einsatzwerkzeug für die Implantation von Silizium-Sonden verwendet. Aufnahmen von chronisch implantierten Silizium-Sonden Ausrichtung der CA1-Region und das Granulat Zellschicht von dentate Gyrus sind in Abbildung 2dargestellt. Während der freien Bewegung in der Homecage verzeichneten wir drängendere aus der Sonde-Ableger. Um die Wirkung der Lautstärke Wärmeleitung zu minimieren, wurden die erhaltenen Signal.......
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Diskussion
Zunehmende Beweise zeigen, dass Gehirn Schwingungen in hippocampal neuronalen Schaltkreisen in diskreten räumlichen Bereichen10,11,16auftreten. CSD-Analyse reduziert drastisch den Einfluss der Lautstärke Wärmeleitung, eine entscheidende Voraussetzung für das Studium der lokalen Schwingung Veranstaltungen. Mit diesem Video stellen wir eine Anleitung zur Maus Hippocampus für die Analyse von CSD Daten Silizium Sonden implantiert. R.......
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Offenlegungen
Die Autoren haben nichts preisgeben.
Danksagungen
Wir sind dankbar, Karin Winterhalter und Kerstin Semmler für technische Hilfe. Diese Arbeit wurde durch des Exzellenzclusters BrainLinks - BrainTools (EXC 1086) von der Deutschen Forschungsgemeinschaft unterstützt.
....Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.
Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Krokodilklemme mit Stativ | Reichelt Elektronik | HALTER ZD-10D | |
| Silikonsonde | Cambridge Neurotech | P-Serie 32 | |
| Stereoskop | Olympus | SZ51 | |
| Lackisolierter Kupferdraht | Bü rklin Elektronik | 89 F 232 | |
| Schraubfundamente | Schrauben & Schrauben More GmbH (screwsandmore.de) | DIN 84 A2 M1x2 | |
| Flussmittel | Stannol | 114018 | |
| Keramikpinzetten | Fine Science Tools | 11210-60 | |
| Paraffine Wax | Sigma-Aldrich | 327204 | |
| Cauterizer | Fine Science Tools | 18010-00 | |
| Lötkolben | Kurtz | Ersa OIC1300 | |
| Multimeter | Uni-T | UT61C | |
| Ethanol | Carl Roth | 9065.1 | |
| Pasteurpipetten | Carl Roth | EA65.1 | |
| Hitzesterilisator | Fine Science Tools | 18000-45 | |
| Stereotaktischer Rahmen | David Kopf | Modell 1900 | |
| Stereotaktischer Elektrodenhalter | David Kopf | Modell 1900 | |
| Isofluran | Abbvie | B506 | |
| Sauerstoffkonzentrator | Respironix | 1020007 | |
| Buprenorphin | Indivior UK Limited | ||
| Elektrorasierer | Tondeo | Eco-XS Heizkissen | |
| Thermolux | 463265/-67 | ||
| Chirurgische Klemmen | Fine Science Tools | 18050-28 | |
| Wasserstoffperoxid | Sigma-Aldrich | H1009 | |
| Sterile Baumwolltücher | Carl Roth | EH12.1 | |
| Bohrer | Proxxon | Micromot 230/E | |
| 21G Injektionsnadel | B. Braun | 4657527 | |
| Phosphatpuffer/phosphatgepufferte Kochsalzlösung | |||
| Stereotaktischer Atlas | Elsevier | 9.78012E+12 | |
| Chirurgische Schere | Fine Science Tools | 14094-11 | |
| Chirurgische Zange | Fine Science Tools | 11272-40 | |
| 27G Injektionsnadeln | B. Braun | 4657705 | |
| Vaseline | |||
| Zahnzement | Sun Medical | SuperBond T& M | |
| Carprofen | Zoetis | Rimadyl 50mg/ml | |
| Aufnahmeverstärker | Intan Technologies | C3323 | |
| USB-Erfassungskarte | Intan Technologies | C3004 | |
| Aufnahmekabel | Intan Technologies | C3216 | |
| Elektrischer Kommutator | Dorische Objektive | HRJ-OE_FC_12_HARW | |
| Erfassungssoftware | OpenEphys (www.open-ephys.org) | GUI | ermöglicht plattformunabhängige Datenerfassung |
| Computer für die Datenerfassung | |||
| Analyseumgebung | Python (www.python.org) | ermöglicht plattformunabhängige Datenanalyse | |
| Urethan | Sigma-Aldrich | ||
| Vibratome | Leica | VT1000 | |
| Objektträger | Carl Roth | H868.1 | |
| Deckgläser | Carl Roth | H878.2 | |
| Einbettmedium | Sigma-Aldrich | 81381-50G | |
| Destilliertes Wasser | Millipore | Milli Q | Tischmaschine zur Herstellung von destilliertem Wasser |
| Tergazyme | Alconox | Tergazyme |
Referenzen
- Buzsáki, G., Draguhn, A. Neuronal oscillations in cortical networks. Science. 304 (5679), 1926-1929 (2004).
- Keefe, J., Recce, M. L. Phase relationship between hippocampal place units and the EEG theta rhythm. Hippocampus. 3 (3), 317-330 (1993).
- Benchenane, K., et....
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Nachdrucke und Genehmigungen
