Biz neden ve LPS enjeksiyon olabilir Sprague-Dawley sıçanlarda neden CMHs gelecekte CMHs patogenezinde üzerine araştırma araştırmalar kullanılan algılamak için bir protokol mevcut.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Alt akut serebral Microhemorrhages sıçanlarda Lipopolysaccharide enjeksiyonla indüklenen
* These authors contributed equally
Bu makalede
Özet
Özet
Serebral microhemorrhages (CMHs) yaşlı hastalarda yaygındır ve çeşitli Nöropsikiyatrik bozukluklar correlated. CMHs etyolojisinde karmaşıktır ve neuroinflammation kez ortak bir olay görülmektedir. Burada, biz alt akut tarif CMHs fare modeli lipopolysaccharide (LPS) enjeksiyon yanı sıra CMHs. sistemik LPS enjeksiyon algılamak için bir yöntem tarafından indüklenen nispeten basit, ekonomik ve uygun maliyetli. LPS enjeksiyon bir büyük avantajı istikrarı iltihap neden olduğunu. LPS enjeksiyonu ile neden CMHs brüt gözlem, Hematoksilen ve eozin (o) boyama, Perl Prusyalı boyama, Evans mavi (EB) çift-etiketleme ve manyetik rezonans görüntüleme-duyarlılık ağırlıklı görüntüleme (MRG-SWI) teknolojisi tarafından tespit edilemedi. Son olarak, CMHs hayvan modelleri, kendi avantajları ve dezavantajları, dahil olmak üzere gelişmekte olan diğer yöntemleri de bu raporda ele alınmıştır.
Giriş
Kırmızı kan hücrelerinin beyin1' den küçük perivasküler mevduat hemosiderin gibi kan bozulma ürünleri klasik serebral microhemorrhages (CMHs) bakın. Tarama Rotterdam araştırmaya göre CMHs kişi 60-69 yaş arası yaklaşık % 17,8 ve %38.3 80 yıl2üzerinde bulunamadı. CMHs yaygınlığı yaşlılarda nispeten yüksektir ve CMHs birikimi ve bilişsel ve nöropsikiyatrik disfonksiyon arasında bir ilişki kurulmuş3,4olmuştur. CMHs çeşitli hayvan modeller son zamanlarda, tip IV collagenase stereotaksik enjeksiyon5, APP transgenik6, β-N-....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Tüm yöntem tanımlamak burada hayvan bakım ve kullanım Komitesi (ACUC) PLA Ordu Genel Hastanesi tarafından onaylanmıştır.
1. malzeme
- LPS enjeksiyon hazırlanması
- S. typhimurium son konsantrasyonu 1 mg/mL için türetilmiş LPS tozu 25 mg 25 mL distile su ekleyin. Enjeksiyon steril tüp 4 ° C'de depolayın
Dikkat: LPS zehirli. - EB enjeksiyon çalışma konsantrasyonu tutmak için normal % 0,9 serum fizyolojik çözüm % 2 EB çözeltilerine hazırlayın.
- S. typhimurium son konsantrasyonu 1 mg/mL için türetilmiş LPS tozu 25 mg 25 mL distile su ekleyin. Enjeksiyon steril tüp 4 ° C'de depolayın
2. hayvanlar
- LPS 10 hafta yaşlı erkek Sprague-Dawley (SD) rats için yönetmek (Ortalama ağırlık: 280 ± 20 g) may....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
CMHs çeşitli yaklaşımlar kullanarak tespit edilebilir. En iyi kabul edilen yöntemler şunlardır: (1) Brüt gözlem ve değerlendirme yüzey CMHs ( Şekil 1' de üst panel gösterilen); (2) o kırmızı kan hücreleri (gösterildiği Şekil 2A, üst panel) veya algılama ferrik demir boyama Prusya tespiti için boyama kırmızı kan hücreleri (Şekil 2A, alt panel); lizis türetilmiş (3) BBB sızıntı (paneli yaptı
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Araştırma çalışmaları CMHs üzerinde son birkaç yılda artmıştır. Ancak, CMHs mekanizması bilim adamları bu belirli bir koşula taklit hayvan modeller kurmak isteyen, belirsizdir. Örneğin, Hoffmann vd. CMHs hipoksi ve serebrovasküler autoregulation12bozulmasına neden olduğu gösteren hipoksi indüklenen CMHs fare modeli geliştirdi. Reuter vd. 5 bu serebral amiloid angiopathy önemli bir rol CMHs. Fisher ve ark. etyolojisinde bildirdi LPS enjeksiyon
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarlar ifşa gerek yok.
Teşekkürler
Biz öğretmen Jian Feng Lei ve sermaye Tıp Üniversitesi meslektaşlarıyla MRG sırasında rehberlik için teşekkür ederiz. Biz de Jing Zeng Nöroloji ikinci People's Hastanesi teknik destek sağlamak için Yichang dan teşekkür ederiz.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Enflamasyon indüksiyonu için | LPS | Sigma-Aldrich | L-2630 |
| EB sızıntı tespiti için | EB | Sigma-aldrich | E2129 |
| DAPI boyama solüsyonu | Servicbio | G1012 | için sayım ortamı |
| s Prusya boyama | Solarbio | G1424 | Prusya boyama kiti |
| HE boyama | Solarbio | G1120 | HE boyama için kit |
| kloral hidrat | Sigma-Aldrich | 47335U | Anestezi için |
| fosfat tampon salin (PBS) | Solarbio | P1022 | deneyde yaygın olarak kullanılan bir tür tampon çözelti |
| %0.9 tuzlu su çözeltisi | Hainan DonglianChangfu Pharmaceutical Co., Ltd., Çin | perfüzyon | |
| paraformaldehit | Sigma-Aldrich | 158127 | fiksasyon için yaygın olarak kullanılan bir tür çözeltidir |
| %20 sükroz çözeltisi | Solarbio | G2461 | fiksasyon için yaygın olarak kullanılan bir tür çözelti |
| %30 sükroz çözeltisi | Solarbio | G2460 | fiksasyon |
| veteriner merhemi | Solcoseryl göz jeli, Bacel, | sıçan gözlerinin korunması için |
Kaynaklar
- Sumbria, R. K., et al. A murine model of inflammation-induced cerebral microbleeds. J Neuroinflammation. 13 (1), 218(2016).
- Vernooij, M. W., et al. Prevalence and risk factors of cerebral microbleeds the Rotterdam Scan Study. Neurology. 70....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
