We beschrijven de oprichting van een lymfkliertest model voor de ziekte van Parkinson met behulp van MPTP en gedrags evaluaties met behulp van cilinder en open veldproeven voor het meten van de motorische functie. We gebruiken dan levodopa een voorbeeldfunctie te laten zien hoe dit model in de studie van PD drugs van toepassing.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Gedrags evaluaties van spontane voortbewegen in een lymfkliertest MPTP-geïnduceerde ziekte Parkinson's Model
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
De ziekte van Parkinson (PD) is een gemeenschappelijk neurodegeneratieve stoornis ziekte, veroorzaakt het verschijnsel schudden, stijfheid en traagheid van beweging en dementie. 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP) kan leiden tot bepaalde Parkinson-achtige symptomen door het vernietigen van de Dopaminerge neuronen in de substantia nigra van de hersenen. Het is dus gebruikt om PD modellen in verschillende dierstudies. Hier, muizen ontvangen MPTP injecties (20 mg/kg/dag) voor zeven dagen en de gedragsmatige tests worden uitgevoerd op de achtste dag. Dit model is efficiënt in de studie van PD aangepast. Hier de gedrags tests omvatten de cilinder en de veldtest van het open. Het experiment van de cilinder wordt gebruikt voor het detecteren van de dieren kunnen heffen hun voorste poten waarop in een andere omgeving gebracht. Als de PD model muizen Toon overkoepelende — de muis bogen zijn rug — het aantal paw liftings daling. Deze test is eenvoudig uit te voeren. Het open veldtest wordt gebruikt voor het detecteren van de hoeveelheid tijd dat de muizen op hardlopen, wandelen, en resterende immobiel. Wij analyseren van dieren bewegingen in open veld met behulp van software en gegevens te verkrijgen. Tot slot, we gebruiken levodopa, een van de meest gebruikte PD drugs, als een voorbeeld om te tonen hoe toe te passen van dit model op de studie van PD drugs. Onze resultaten wijzen erop dat MPTP neurotoxiciteit induceert motor tekort, die kan worden verzacht door levodopa.
Inleiding
De ziekte van Parkinson (PD), een van de meest voorkomende ziekten onder oudere personen, is een lange termijn neurodegeneratieve stoornis1. Patiënten weergeven altijd het fenomeen schudden, stijfheid en traagheid van beweging en dementie die over tijd2verergeren. Andere symptomen zoals zintuiglijke, zijn slaap, en emotionele problemen ook vaak waargenomen2. De oorzaak van PD is nog onduidelijk, maar het is algemeen aangenomen dat zowel genetische en ecologische factoren, die leiden verlies van de Dopaminerge neuronen in de substantia nigra3, en ontwikkeling van ....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
Deze studie is uitgevoerd volgens de regels van het internationaal, nationaal en institutioneel gezien van dierproeven. Het studie-protocol werd goedgekeurd door het Comité dierenethiek van Nankai Universiteit.
1. MPTP en levodopa administratie
Opmerking: Tien weken oude vrouwelijke BALB/c muizen werden verstrekt door het Instituut voor Dierkunde, Chinese Academie van Wetenschappen. Muizen werden gehuisvest zes per cage onder een 12u licht/donker cyclus (lichten op op 08:00-20:00), een constante temperatuur van 21-22 ° C en een relatieve vochtigheid van 55% ± 5%. Gesteriliseerde met autoclaaf standaard muizen chow ....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
In de test van de cilinder, werd de daling van steigert tegen de muur waargenomen in muizen (groep 2) behandeld met MPTP vanaf dag 1 tot dag 7 en zoute op dag 8 ten opzichte van saline-behandelde muizen (groep 1), terwijl een verhoging van steigert werd waargenomen in de muizen (groep 3) behandeld met MP TP vanaf dag 1 tot en met dag 7 en levodopa op dag 8 ten opzichte van de muizen (groep 2) behandeld met MPTP vanaf dag 1 tot dag 7 en zoute op dag 8 (Figuur 1
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
Als gevolg van de vernietiging van de Dopaminerge neuronen in de substantia nigra van de hersenen veroorzaakt MPTP Parkinson-achtige symptomen in muizen7. Levodopa is de meest aangewezen geneesmiddel voor PD ooit sinds het klinische gebruik ervan, omdat het helpt bij het handhaven van de normale dagelijkse activiteiten bij patiënten met PD, met effectieve onderdrukking van motor afwijkingen, met inbegrip van de Akinesie en rigiditeit15. De muizen behandeld met MPTP toonde b.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
De auteurs hebben niets te onthullen.
Dankbetuigingen
Ons werk wordt gefinancierd door Tianjin Undergraduate opleidingen voor innovatie en ondernemerschap (Grant nr. 63183004). Dit project werd gestart in de staat sleutel laboratorium voor geneeskrachtige chemische biologie Nankai Universiteit. De auteurs verklaren dat er geen conflicten van belangen.
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| 70% Ethanol | Ruiboxing Company | RBX-64175 | |
| Camera | BASLER | acA645-100gm | |
| Cylinder test | Gemaakt in-house aan Nankai University | N/A | |
| Excel | Microsoft | N/A | |
| Levodopa | Sigma-Aldrich | 72816 | |
| Matalb 2017a | Mathworks | N/A | |
| Mice | Institute of Zoology, Chinese Academy of Sciences | Balb/c | Volwassen vrouwelijke muizen (10 weken) |
| MPTP | Yuanye Biological Technology Company Ltd., Shanghai | S31504-500mg | |
| Open field test | Gemaakt in-house aan Nankai University | N/A | |
| Spuit | Solelybio | S-xsgwz-w | Irrigation |
| Spuit | Jiangxi Fenglin Medical Application Co. | hc3824 | Intraperitoneale injectie |
Referenties
- Dehay, B., Bourdenx, M., Gorry, P., Przedborski, S., Vila, M., Hunot, S., Singleton, A., Olanow, C. W., Merchant, K. M., Bezard, E. Targeting -synuclein for treatment of Parkinson's disease: mechanistic and therapeutic considerations. Lancet Neurology. 14, 855-866 (2015).
- Weintraub, D., Comella, C., Horn, L., S,
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
