Uso de sistemas robóticos para procesar e integrar colónicas murinas muestras para análisis histológicos

Fulvia Milena Cribiù; Claudia Burrello; Roberta Tacchi; Francesca Boggio; Dario Ricca; Flavio Caprioli; Stefano Ferrero; Federica Facciotti

doi:10.3791/58654

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Artículo de método

Uso de sistemas robóticos para procesar e integrar colónicas murinas muestras para análisis histológicos

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DOI:

10.3791/58654

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7 de enero de 2019

Fulvia Milena Cribiù^*¹ , Claudia Burrello^*² , Roberta Tacchi¹ , Francesca Boggio¹ , Dario Ricca¹ , Flavio Caprioli³^,⁴ , Stefano Ferrero¹ , Federica Facciotti²

¹Pathology Unit, Fondazione IRCCS Cà Granda, Ospedale Maggiore Policlinico, ²Department of Experimental Oncology, European Institute of Oncology, ³Gastroenterology and Endoscopy Unit, Fondazione IRCCS Cà Granda, Ospedale Maggiore Policlinico, ⁴Department of Pathophysiology and Transplantation, Università degli Studi di Milano

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Resumen

Falta de estandarización para el procesamiento de tejido murino reduce la calidad del análisis histopatológico murino en comparación con los especímenes humanos. Aquí, presentamos un protocolo para realizar el examen histopatológico de tejidos colon inflamados y uninflamed murinos para demostrar la viabilidad de sistemas robóticos que se utilizan habitualmente para el tratamiento y la inclusión de muestras humanas.

Resumen

La comprensión de enfermedades humanas se ha ampliado considerablemente gracias al estudio de modelos animales. Sin embargo, la evaluación histopatológica de modelos experimentales debe ser tan riguroso como el que aplica para muestras humanas. De hecho, extraer conclusiones fiables y precisas críticamente está influenciada por la calidad de la preparación de la sección de tejido. Aquí, describimos un protocolo para el análisis histopatológico de los tejidos murinos que implementa varios pasos automatizados durante el procedimiento, desde la preparación inicial para la inclusión en parafina de las muestras murinas. La reducción de variables metodológicas mediante la estandarización de protocolo riguroso de procedimientos automatizados contribuye al aumento de la fiabilidad global del análisis patológico murino. Específicamente, este protocolo describe la utilización de tratamiento automatizado e incorporar sistemas robóticos, utilizado habitualmente para el proceso de tejido y la inclusión en parafina de muestras humanas, para procesar a muestras murinas de inflamación intestinal. Concluimos que la fiabilidad de la examinación histopatológica de los tejidos murinos se aumentó significativamente con la introducción de técnicas estandarizadas y automatizadas.

Introducción

En las últimas décadas, se han desarrollado varios modelos experimentales para diseccionar los mecanismos patogénicos que conducen a enfermedades humanas¹^,². Para evaluar la severidad de una enfermedad, los investigadores deben evaluar el efecto de un tratamiento y estudiar las variaciones citológicas e histológicas arquitectónicas o la cantidad de inflamación³. Para realizar en los modelos experimentales, son necesarios los análisis histopatológicos detallados, a menudo comparando muestras murino y humano⁴^,⁵.