Aplicação da tecnologia de Microfluidic Biochip para detectar soro alérgeno-específicas E de imunoglobulina (sIgE)

Zhifeng Huang; Wenting Luo; Xiangwei Zou; Xiaoqing Liu; Chuanxu Cai; Zehong Wu; Haisheng Hu; Baoqing Sun

doi:10.3791/59100

Method Article

Aplicação da tecnologia de Microfluidic Biochip para detectar soro alérgeno-específicas E de imunoglobulina (sIgE)

DOI:

10.3791/59100

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April 21st, 2019

Zhifeng Huang*¹ , Wenting Luo*¹ , Xiangwei Zou¹ , Xiaoqing Liu¹ , Chuanxu Cai¹ , Zehong Wu¹ , Haisheng Hu¹ , Baoqing Sun¹

¹Guangzhou Institute of Respiratory Health, State Key Laboratory of Respiratory Disease, First Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University, Guangzhou Medical University

Summary

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Este trabalho apresenta um protocolo para a detecção de imunoglobulina soro específico E com um sistema de cartucho-baseado da quimioluminescência microfluídicos e a avaliação de sua utilidade no diagnóstico de alergia.

Abstract

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Doença alérgica é comum em adultos e crianças. Identificação dos alérgenos causadores é significativa na prevenção e gestão de doença. No entanto, um sistema de medição específico de imunoglobulina E (IgE) com uma relação preço-desempenho elevado está faltando na China continental, especialmente nos hospitais de cuidados primários. Este artigo descreve os procedimentos de princípio e operação de usando um sistema de cartucho-baseado da quimioluminescência microfluidic para detectar IgE alérgeno-específicos no soro. Os resultados foram comparados com os do ImmunoCAP (sistema 1), o padrão industrial, e a reprodutibilidade do sistema para detectar pacientes sensibilizados a alérgenos comuns é avaliada. Os resultados mostraram que, em comparação com o ImmunoCAP (sistema 1), o sistema BioIC (sistema 2) tem boa precisão e sensibilidade na detecção de IgE específicos do soro contra vários alérgenos inalantes e alimentos, mas com um custo significativamente menor. Ele pode servir como uma boa alternativa para sistema 1 em hospitais de cuidados primários na China continental, que têm menor disponibilidade financeira.

Introduction

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A prevalência de alergias aumentou de forma constante nas últimas décadas e está afetando 20% - 30% da população global¹. Identificação dos alérgenos causadores tem um significado importante na gestão das doenças. Na China, uma vez que testes cutâneos de pele in vivo registrado não estão disponíveis no país, determinação in vitro de IgE do soro específico é o mais importante e ferramenta comumente usada para tipo I alergia diagnostica². Isso é semelhante às práticas no mundo ocidental, mas embora ImmunoCAP sistema (sistema 1), um sistema de base de enzima-lig da imunoabsorção fluorescência, é percebido como o padrão ouro....

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Protocol

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Este estudo e o uso de amostras de soro humano foram aprovados pelo Comitê de ética da Universidade o primeiro afiliado Hospital de Guangzhou Medical (GYYY-2016-73). Todos os participantes têm dado o seu consentimento escrito independentemente ou através de seus pais (no caso das crianças).

1. base informações do grupo de estudo

Nota: O repositório de informações de alergia do estado chave laboratório de doença respiratória (ar-SKLRD) é um banco de grande soro estabelecido dentro do Hospital Instituto de Guangzhou respiratória (GIRH). Iniciada na última década, o ar-SKLRD já começou a coletar e armazenar amostras d....

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Results

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Taxas positivas para 19 alérgenos comuns
Os resultados em 293 soro são mostrados na Figura 3. Entre todos os alérgenos inalantes, d. farinae tiveram a maior taxa positiva (80,89%, 273/293), seguido por D. pteronyssinus (% 78.84, 231/293). Entre os alérgenos alimentares, caranguejo tem a maior taxa positiva (20.48%, 60/293), seguido por 13.65% (40/293) para camarão. A taxa total de positiva para alérgenos inalante.......

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Discussion

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Semelhante aos resultados de muitos outros estudos¹⁵^,¹⁶^,¹⁷, os resultados do sistema microfluidic baseado em soros de 293 pacientes alérgicos mostrou aquela casa ácaros (incluindo d. pteronyssinus, D. farinaee b. tropicalis) são os principais alérgenos inalantes, levando a doenças alérgicas no sul da China, Considerando que para o alimento, leite, amendoim, camarão e caranguejo são os alérgenos mais c.......

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Disclosures

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Os autores não têm nada para divulgar.

Acknowledgements

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Os autores Obrigado Professor Mei Jiang pela ajuda na análise estatística e Sr. Hammer Tsui na preparação do manuscrito. Este estudo foi suportado por tecnologia Fundação (201804020043) e a ciência de Guangzhou e Nacional Natural Science Foundation da China (NSFC 81572063 e 81802076 NSFC). Grupos de financiamento de acordo com o projeto de estudo, análise de dados, preparação de manuscrito e decisão de publicar. Nenhum outro financiamento foi recebido para este estudo.

....

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Materials

List of materials used in this article
Name	Company	Catalog Number
Analisador Agnitio BioIC	Agnitio Science & Tecnologia(Taiwan, China)	BA-G2000
BioIC Kit de detecção de IgE específica para alérgenos	Agnitio Science & Tecnologia (Taiwan, China)	DR17A12
BioIC Cartrideg Placa de colocação	Agnitio Science & Tecnologia (Taiwan, China)	T20SET
BioIC Reagent Dispenser	Agnitio Science & Tecnologia (Taiwan, China)	DS-1
Imagem bidimensional máquina de código de barras	Agnitio Science & Tecnologia(Taiwan, China)	Pacote de software NLS-HR200
, LabIT	Agnitio Science & Tecnologia(Taiwan, China)	Versão 2.4.12
Misturador de vórtice VORTEX-5	Haimen Kylinbell Lab Lastruments Co., Ltd.	VÓRTICE-5

References

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Kamble, S., Bharmal, M. Incremental Direct Expenditure of Treating Asthma in the United States. Journal of Asthma Research. 46 (1), 73-80 (2009).
Paganelli, R., et al. Specifi....

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