चूहे के छोटे आंत्र को लक्षित करना: सुपीरियर मेसेन्टेरिक धमनी में दीर्घकालिक इन्फ्यूश़न

Summary

चूहों की बेहतर मेसेन्टेरिक धमनी (एसएमए) में दीर्घकालिक जलसेक के लिए पहुंच एक सर्जिकल प्रक्रिया है जिसमें एसएमए की समीपस्थ शाखा की कैनुलेशन शामिल है। प्रवेशनी पेट के घाव से बाहर निकलती है और चमड़े के नीचे की जगह के माध्यम से वापस इंटरस्कैपुलर गुना में सुरंग की जाती है।

Abstract

बेहतर mesenteric धमनी ऊरु या एक्सिलरी धमनी के न्यूनतम इनवेसिव रेडियोलॉजिकल कैथीटेराइजेशन के माध्यम से मनुष्यों में cannulated किया जा सकता है। छोटे शारीरिक आयामों के कारण चूहों में एसएमए कैनुलेशन अधिक कठिन है। अध्ययन का उद्देश्य अप्रतिबंधित जानवरों में एसएमए संवहनी बिस्तर में दवाओं के दीर्घकालिक जलसेक का प्रदर्शन करने के लिए चूहों में एसएमए के कैनुलेशन के लिए एक सर्जिकल तकनीक का वर्णन करना है, जिसके परिणामस्वरूप 24 घंटे के लिए पोस्ट सर्जिकल रिकवरी के बाद कैथेटर पैटेन्सी की उच्च दर होगी।

एसएमए घनास्त्रता या प्रत्यक्ष पहुंच से रक्तस्राव के जोखिम से बचने के लिए, एसएमए की एक समीपस्थ शाखा को अलग किया जाता है, दूरस्थ रूप से लिगेट किया जाता है और 0.25 मिमी पॉलीयुरेथेन केशिका ट्यूब के साथ कैनुलेट किया जाता है, जिसकी नोक महाधमनी से एसएमए की उत्पत्ति के करीब उन्नत होती है। कैनुला को तब जानवर की गर्दन के पीछे और एक कृत्रिम वाल्व के माध्यम से त्वचा के माध्यम से चमड़े के नीचे सुरंग किया जाता है। प्रवेशनी के बाहरी हिस्से को एक अर्ध-कठोर समर्थन प्रणाली में डाला जाता है और पिंजरे के बाहर निरंतर जलसेक पंप से जोड़ा जाता है जहां चूहा स्थानांतरित करने के लिए स्वतंत्र होता है।

प्रवेशनी की सही स्थिति पोस्ट-सर्जिकल एंजियोग्राफी और ऑटोप्सी निष्कर्षों द्वारा प्रदर्शित की गई थी। एसएमए क्षेत्र में खारा जलसेक के 24 घंटे के बाद कैथेटर पैटेन्सी को अधिकांश चूहों में पंप के कुल निर्वहन और रक्त के नमूने या खारा जलसेक के लिए एक कार्यात्मक प्रवेशनी की मान्यता से आश्वासन दिया गया था।

Introduction

चूहों के रूप में मनुष्यों में बेहतर मेसेन्टेरिक धमनी (एसएमए) पेट की महाधमनी से उत्पन्न होती है और ग्रहणी से समीपस्थ अनुप्रस्थ बृहदान्त्र तक धमनी रक्त के साथ आंत्र की आपूर्ति करती है। एसएमए कई शाखाओं को जन्म देता है।

केशिका परफ्यूजन के बाद, मेसेन्टेरिक परिसंचरण को पोर्टल शिरा के माध्यम से जिगर में सूखा जाता है, जहां यह प्रणालीगत परिसंचरण में फिर से भर्ती होने से पहले यकृत चयापचय से गुजरता है। एसएमए की कैनुलेशन नैदानिक उद्देश्यों, चिकित्सीय एम्बोलाइजेशन और दवा जलसेक के लिए एक चयनात्मक या निरंतर तरीके से आंत्र या सबसे महत्वपूर्ण बात, यकृत चयापचय और रासायनिक निकासी पर प्रभाव का मूल्यांकन करने के लिए उपयोगी है। मनुष्यों में, एसएमए के न्यूनतम इनवेसिव रेडियोलॉजिकल कैथीटेराइजेशन को एंडोवैस्कुलर उपचार ¹ या चयनात्मक दवा जलसेक 2 के लिए किया जाता है^, जिसमें ट्रांसफेमोरल या ट्रांसएक्सिलरी पंचर और कैनुलेशन जैसे कई पर्कुटेनियस दृष्टिकोणों का उपयोग किया जाता है।

छोटे पेट वाहिकाओं के कैनुलेशन की विभिन्न तकनीकों की साहित्य रिपोर्टें हैं: बेहतर मेसेंटेरिक नस (एसएमवी) ³, अवर मेसेन्टेरिक धमनी (आईएमए) ⁴, मेसेन्टेरिक लिम्फ डक्ट ⁵, यकृत धमनी ⁶ या चूहों में आंत्र परफ्यूजन ⁷ पर पूर्व विवो के लिए अध्ययन। शिरापरक पक्ष की तुलना में, चूहों में एसएमए की कैनुलेशन घनास्त्रता और रक्तस्राव के एक साथ जोखिम के कारण बहुत अधिक मांग है, इसके उच्च दबाव को प्रदान किया। विशेष रूप से, समस्याएं उत्पन्न होती हैं यदि कैनुलेशन ऑपरेशन में होता है जब चूहा सर्जिकल बिस्तर पर एनेस्थीसिया से जागता है और अधिक यदि प्रयोग को सर्जरी के बाद पिंजरे में एक मुक्त जानवर की आवश्यकता होती है।

हाल ही के एक पेपर ने एसएमए कैनुलेशन को एनेस्थीसिया 8 के तहत एक जानवर में प्रयोग (रक्तचाप माप) के एक हिस्से के रूप में वर्णित किया ^है। हालांकि, एक अप्रतिबंधित जानवर में दीर्घकालिक जलसेक के लिए एसएमए के सर्जिकल कैनुलेशन पर कोई तकनीक वर्णित नहीं है। इस पांडुलिपि का उद्देश्य एक समीपस्थ शाखा के माध्यम से एसएमए के दीर्घकालिक कैनुलेशन के लिए एक सर्जिकल तकनीक का चरण-दर-चरण वर्णन करना है, जो कम से कम 24 घंटे (और उससे अधिक) के लिए मेसेन्टेरिक बिस्तर में दवाओं के चयनात्मक जलसेक के लिए अनुमति देता है। जैसा कि एक स्थिर और मजबूत कैनुलेशन के लिए स्थायी बंधाव और पोत के बंद होने की आवश्यकता होती है जहां कैथेटर डाला जाता है, यह तकनीक इसके बजाय कैथेटर को सीधे एसएमए ⁹ में डालने से बचती है और एक समीपस्थ शाखा के कैनुलेशन के माध्यम से पोत तक पहुंचती है, महाधमनी से एसएमए की उत्पत्ति के लिए यथासंभव समीपस्थ। समीपस्थ जलसेक संक्रमित दवा को प्रमुख पोत के माध्यम से रक्त प्रवाह को बंद किए बिना, संभव व्यापक शारीरिक बिस्तर तक पहुंचने की अनुमति देता है।

चूहे एसएमए cannulation तकनीक कई अनुप्रयोगों है. जठरांत्र संबंधी स्तर पर स्थानीय कार्रवाई प्राप्त करने और प्रणालीगत प्रभावों और यकृत दवा चयापचय से बचने के लिए मेसेन्टेरिक धमनी डिब्बे में चुनिंदा रूप से दवाओं का प्रशासन करना संभव होगा। एसएमए-कैनुलेटेड चूहे के मॉडल में बड़े पशु मॉडल पर फायदे हैं: यह कम महंगा है, यह नैतिक रूप से स्वीकार्य है, और प्रदर्शन करना और सीखना आसान है। एसएमए कैनुलेशन सर्जरी भी माउस मॉडल की तुलना में चूहे मॉडल में प्रदर्शन करने के लिए आसान है।

Protocol

इस पांडुलिपि में वर्णित अध्ययनों को स्थानीय पशु नैतिकता समिति (Università Cattolica del Sacro Cuore, Roma) द्वारा अनुमोदित किया गया था और इतालवी स्वास्थ्य मंत्रालय के अनुसार आयोजित किया गया था। 1. एसएमए के समीपस्थ शाखा में सम्मिलन के लिए प्रवेशन के लिए प्रवेशनी की तैयारी 0.93 मिमी O.D. के बड़े प्रवेशनी, 0.5 मिमी आईडी को आवश्यक लंबाई (लगभग 30 सेमी) तक काटें। छोटे कैनुला (0.4 मिमी ओ.डी., 0.25 मिमी आईडी) को लंबाई में लगभग 5 सेमी तक काट लें और इसे बड़े प्रवेशनी में 1 सेमी डालें। cyanoacrylate गोंद द्वारा दो cannulas एक साथ ठीक, लुमेन के रोड़ा से बचने. एक Luer स्टब एडाप्टर (23 जी) के लिए बड़े प्रवेशनी के मुक्त छोर कनेक्ट एक 1 mL नमकीन समाधान से भरा सिरिंज पर घुड़सवार. एसएमए की शाखा में कैथेटर के सम्मिलन की सुविधा के लिए कैंची के साथ छोटे कैनुला की मुक्त नोक को तेज करें। खारा समाधान के साथ flushing द्वारा cannula की patency की जाँच करें.नोट: कैनुला का तेज अंत जानवर के आंदोलन के दौरान धमनी को नुकसान नहीं पहुंचाएगा क्योंकि यह तय किया जाएगा और पोत के साथ स्लाइड नहीं करेगा। 2. शल्य चिकित्सा प्रक्रिया के लिए चूहे की तैयारी केटामाइन / xylazine (100/10 मिलीग्राम / किग्रा) के साथ इंट्रामस्क्युलर एनेस्थीसिया करें।नोट: पर्याप्त संवेदनाहारी गहराई की अनुपस्थिति या पंजा-चुटकी पलटा की निकट-अनुपस्थिति से न्याय किया जाता है। सर्जिकल क्षेत्रों से फर को शेव करें: एसएमए कैनुलेशन की शाखा के लिए पेट, और कैनुला से बाहर निकलने के लिए गर्दन के पीछे। एक सर्जिकल पंजा चुटकी पलटा का उपयोग कर aseptically सर्जिकल क्षेत्रों को साफ.नोट: सभी तैयारी एसेप्टिक तकनीक के साथ किया जाना चाहिए। स्क्रब या समाधान एक परिपत्र गति में लागू होता है, इसके बाद बाँझ खारा या 70% इथेनॉल, 3 बार। जानवर को एक सुपाइन स्थिति में रखें, चार अंगों को स्थिर करें। 3. एसएमए की एक समीपस्थ शाखा की कैनुलेशन चीरा से पहले पंजा चुटकी पलटा का परीक्षण करके उचित संवेदनाहारी गहराई सुनिश्चित करें। एक बाँझ सर्जिकल, पानी प्रतिरोधी ड्रेप लागू होते हैं। एक स्केलपेल ब्लेड के साथ, पेरिटोनियम में सभी पेट के विमानों के माध्यम से मेसोगैस्ट्रिक क्षेत्र की मध्यरेखा पर सीधे 3 सेमी चीरा के साथ पेट की दीवार खोलें। सर्जिकल ड्रेप के शीर्ष पर लैप्रोटॉमी चीरा के चारों ओर खारा समाधान के साथ भिगोया हुआ, धुंध रखें। सर्जिकल चीरा खुला रखने के लिए टांके का उपयोग करें।नोट: सभी swabs और सर्जिकल उपकरणों बाँझ होना चाहिए. छोटी आंत की पहचान करने और उजागर करने के लिए कपास झाड़ू का उपयोग करें। मेसेंट्री की पहचान करने के लिए इसके प्राकृतिक स्वभाव का पालन करें। लैपरोटोमिक कट से बाहर mesentery निकालें और इसे नीचे की ओर धुंध (चित्रा 1A) पर रखें। स्पंदन महसूस करके एसएमए की पहचान करें। मेसेन्टेरिक वसा के बीच “रास्ता बनाने” के लिए कपास के स्वैब का उपयोग करें और एसएमए और इसकी समीपस्थ शाखाओं के 2-3 को उजागर करें। कैनुलेशन के सर्जिकल पैंतरेबाज़ी की अनुमति देने के लिए एसएमए की एक समीपस्थ शाखा को पर्याप्त रूप से बड़ा चुनें। इस शाखा को बांधें (4-0 रेशम टांके के साथ) इसकी उत्पत्ति से 3-4 सेमी डाउनस्ट्रीम इसके विस्तार की अनुमति देने के लिए सिवनी के सिरों को बाद में हेरफेर करने के लिए लंबे समय तक रखा जा सके। एसएमए की शाखा के नीचे एक कठोर समर्थन रखें। सर्जिकल संदंश का हैंडल यहां पर्याप्त है। संदंश का उपयोग करके प्रमुख हाथ के साथ छोटे कैनुला (विपरीत छोर पर बड़े प्रवेशनी के साथ जुड़ा हुआ) के चरम को पकड़ें और पोत को तनाव देने और कैथेटर के प्रवेश की सुविधा के लिए दूसरे हाथ से टांके के सिरों को खींचें (चित्रा 1 बी)। रक्त प्रवाह के विपरीत दिशा में पोत के विमान से 20° के कोण पर कैनुला की नोक को पकड़ो। धमनी की दीवार में प्रवेश करने और प्रवेशनी डालने के लिए टिप को हल्के से दबाएं।नोट: धमनी को काटने के बिना कैनुलेशन किया जाता है; कैथेटर की नोक पोत की दीवार को तोड़ देगी और प्रवेश की सुविधा प्रदान करेगी। प्रवेशनी में वापस बहने वाला रक्त सही सम्मिलन की पुष्टि करता है। एसएमए से मूल के करीब धमनी शाखा में एक और 1 सेमी के लिए कैनुला के सम्मिलन को जारी रखें। एक सर्जिकल गाँठ (4-0 रेशम) के साथ धमनी के लिए प्रवेशनी को ठीक करें और बाँझ खारा समाधान के 1 मिलीलीटर फ्लशिंग या रक्त के नमूने के साथ इसके सही कामकाज को सत्यापित करें। 4. जलसेक समर्थन प्रणाली में प्रवेशनी और प्लेसमेंट की सुरंग जानवर की स्थिति को बदलने से पहले चीरा पर एक बाँझ सर्जिकल ड्रेप रखें।नोट: वापस से पेट तक सुरंग एक नुकीले सर्जिकल उपकरण के साथ चमड़े के नीचे की जगह में दबाव डालकर बनाई गई है। पेट और पीठ के चीरों पर एक बाँझ सर्जिकल ड्रेप का उपयोग किया जाना चाहिए। गर्दन के पीछे के क्षेत्र का 1 सेमी चीरा बनाएं और एक गोलाकार वाल्व को समायोजित करें। चमड़े के नीचे के ऊतकों (चित्रा 2 ए) के माध्यम से गर्दन में रखे गए वाल्व तक लैप्रोटोमी एक्सेस से कैनुला पास करें। हवा के प्रवाह से बचने के लिए कैथेटर प्लग के साथ कैनुला डिस्टल चरम को बंद करें। उदर गुहा में छोटे आंत्र को बदलें। पेट की दीवार को बंद करें और एक निरंतर 3-0 रेशम टांके के साथ त्वचा के चीरों को बंद करें। टांके के साथ गर्दन की त्वचा के लिए वाल्व को सुरक्षित करें। एक निरंतर 3-0 रेशम टांके के साथ त्वचा चीरों को बंद करें। 5. पोस्ट ऑपरेटिव प्रबंधन बटन वाल्व की रक्षा के लिए एक जैकेट के साथ चूहे पोशाक। जलसेक के दौरान एक स्टील रॉड के साथ कैनुला के उजागर हिस्से की रक्षा करें और इसे वाल्व (चित्रा 2 बी) में सुरक्षित करें।नोट: चूंकि सर्जरी एसेप्टिक तकनीक के तहत की जाती है, इसलिए एंटीबायोटिक दवाओं का संकेत नहीं दिया जाता है। एनएसएआईडी को दर्द नियंत्रण के लिए पूर्व-ऑपरेटिव रूप से प्रशासित किया जाना चाहिए (5 मिलीग्राम / एमएल मेलोक्सिकैम इंजेक्टेबल, 1 मिलीग्राम / किलोग्राम एक बार दैनिक रूप से 3 दिनों तक)। ऑपरेशन के बाद, जलसेक (24h) के समय के लिए एक चयापचय पिंजरे में चूहे को स्थिर करें। फिर जलसेक प्रणाली को अलग करने के लिए आवश्यक समय के लिए आइसोफ्लुरेन इनहेलेशन के साथ चूहे को फिर से एनेस्थेटिक करें। बाद में चूहे को 12 घंटे के प्रकाश / अंधेरे चक्र और भोजन और पानी तक मुफ्त पहुंच के साथ एक सामान्य पिंजरे में रखना संभव है। जलसेक के समय के लिए एक चयापचय पिंजरे में चूहे को स्थिर करें। चूहा अब जाग रहा है और पिंजरे में स्थानांतरित करने और खाने के लिए स्वतंत्र है। कैनुला के डिस्टल छोर को एक इलास्टोमेरिक पंप (100 मिलीलीटर वॉल्यूम अधिकतम, 5.0 एमएल / एच प्रवाह दर) से कनेक्ट करें जो बाँझ खारा समाधान के 50 मिलीलीटर से भरा हुआ है। 24 घंटे के लिए जलसेक के साथ आगे बढ़ें (चित्रा 2 सी)। पहले दिन, इंट्रामस्क्युलर एंटीबायोटिक्स (पहले 24 घंटे के लिए एनरोफ्लोक्सासिन 10 मिलीग्राम / किलोग्राम) का प्रशासन करें और फिर मौखिक प्रशासन (पीने के पानी में 500 मिलीलीटर में एनरोफ्लोक्सासिन 100 मिलीग्राम) को पास करें। जागृति (केटोप्रोफेन 5.0 मिलीग्राम / किग्रा) के दौरान और निम्नलिखित दिनों में मौखिक रूप से (पीने के पानी में पेरासिटामोल 200 मिलीग्राम) के दौरान इंट्रामस्क्युलर रूप से एनाल्जेसिक थेरेपी वितरित करें।नोट: एक सहन करने योग्य स्वाद प्राप्त करने के लिए पीने के पानी में प्रशासित मौखिक चिकित्सा को पतला करें। शरीर के वजन माप और जलयोजन की निगरानी करें। जलसेक समय (24 घंटे) के अंत में पंप, जैकेट, स्टील रॉड और वाल्व को चूहे से हटाकर जानवर की बाहरी जलसेक प्रणाली को अलग कर देता है। गर्दन से बाहर आने के साथ ही कैनुला को बंद करें और काटें, घाव के बाद गर्दन की त्वचा के नीचे इस छोर को छोड़ दें।नोट: इस चरण में isofluorane साँस लेने के द्वारा कुछ मिनटों के लिए चूहों anesthetize करने के लिए आवश्यक हो सकता है। चूहे को व्यक्तिगत रूप से, 12 घंटे के प्रकाश / अंधेरे चक्र और भोजन और पानी तक मुफ्त पहुंच के साथ एक सामान्य पिंजरे में रखें।नोट: बेसलाइन पोस्ट-ऑप भोजन का सेवन लगभग 30 ग्राम / दिन है बेसलाइन पानी का सेवन लगभग 50 मिलीलीटर / दिन है। औसत वजन लगभग 400 मिलीग्राम होना चाहिए।

Representative Results

इस अध्ययन में, प्रक्रिया 15 चूहों पर की गई थी। खारा जलसेक के 24 घंटे के अंत में, चयापचय पिंजरों में खारा या रक्त की हानि का कोई संकेत नहीं देखा गया है और पेट का घाव सभी जानवरों में साफ था जैसा कि पिंजरों थे। सामान्य पिंजरों में, चूहों को वजन और पानी / भोजन के सेवन की दैनिक निगरानी के साथ 5 दिनों के लिए देखा गया था। इस अवधि के दौरान, सकल परीक्षा में जानवरों की सामान्य स्थिति व्यवहार संबंधी असामान्यताओं के कोई संकेत के साथ अच्छी थी। सर्जरी के तुरंत बाद सभी चूहों ने फिर से खाना शुरू कर दिया। औसत दैनिक भोजन और पानी का सेवन 3 दिनों के बाद सामान्य होने तक उत्तरोत्तर बढ़ गया, जैसा कि क्रमशः चित्र 3 ए और 3 बी में दिखाया गया है। चित्रा 3 सी में, यह देखना संभव है कि वजन बढ़ना नियमित था, धीरे-धीरे अवलोकन अवधि के अंत तक बढ़ रहा था। मल त्याग का कोई परिवर्तन नहीं हुआ और दैनिक मल और मूत्र उत्पादन सामान्य थे। 24 घंटों के बाद, केवल 2 पंपों में खारा अवशेष (क्रमशः, 40 एमएल और 20 एमएल) था, जो 50 एमएल खारा समाधान से भरा था, जबकि अन्य सभी (86.7%) खाली थे। इसके अलावा, इस जलसेक अवधि के बाद, 12 कैनुला (80%) अभी भी रक्त के नमूने और खारा जलसेक (5 एमएल) दोनों के लिए कार्यात्मक थे, जबकि 3 कैनुला अब पेटेंट नहीं थे (इनमें से 2 अवशेषों के साथ पंपों से जुड़े कैनुला थे) (तालिका 1)। necropsy में, कैनुला (एन = 15) का 100% अभी भी एसएमए शाखा में स्थित था और किसी भी चूहे में आंत्र ischemia (चित्रा 4 बी) या इंट्राब्डोमिनल रक्तस्राव के संकेत नहीं थे। 3 occluded cannulas क्रमशः 0.5 सेमी, 1 सेमी और 1.5 सेमी पर SMA शाखा में सम्मिलन से kinked पाया गया. यह घटना शायद पिंजरों में जानवरों के आंदोलनों के कारण है। 5 चूहों में, प्रक्रिया के तुरंत बाद और पंप कनेक्शन से पहले, 2 मिलीलीटर आयोडिनेटेड कंट्रास्ट माध्यम को एक छवि तीव्रता के माध्यम से एंजियोग्राफी प्राप्त करने के लिए मेसेन्टेरिक कैनुला में इंजेक्ट किया गया था (एंजियोग्राफी को इंट्राऑपरेटिव रूप से किया गया था)। प्रत्येक चूहे (एन = 5) में, यह मेसेंटेरिक धमनी सर्कल और एसएमए और इसकी मुख्य शाखाओं को पेट में फैलने वाले विपरीत माध्यम के बिना देखने के लिए संभव था जैसा कि चित्र 4 ए में दिखाया गया है। इसने पुष्टि की कि प्रवेशनी को अच्छी तरह से रखा गया था और एसएमए की शाखा में तय किया गया था। चित्रा 1: प्रयोगात्मक तस्वीरें. (ए) एक धुंध पर अपने प्राकृतिक स्वभाव का पालन करने वाली छोटी आंत (सभी शाखाओं के साथ एसएमए की कल्पना करना संभव है); (बी) एसएमए शाखा में प्रवेश द्वार डालने वाला ऑपरेटर। ट्यूब के सम्मिलन की गारंटी देने के लिए पोत के नीचे एक ठोस समर्थन होना आवश्यक है। डिस्टल सिल्क सीवन पोत को बंद कर देता है और समीपस्थ एक शाखा के अंदर कैथेटर को ठीक करता है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें. चित्रा 2: इन्फ्यूश़न समर्थन प्रणाली। (ए) एक बार चमड़े के नीचे सुरंग होने के बाद, कैनुला सफेद वाल्व के माध्यम से गर्दन के पीछे के क्षेत्र से उभरता है; (बी) सफेद वाल्व को स्थिर करने के लिए जैकेट पहने हुए एक चूहा। एक स्टील की छड़ जलसेक के दौरान कैथेटर की रक्षा करती है। (c) स्टील की छड़ से बाहर निकलने वाली कैनुला से जुड़े इलास्टोमेरिक पंप के साथ खारा के जलसेक के दौरान एक चयापचय पिंजरे में रखे गए चूहे का आरेखीय निरूपण। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें. चित्रा 3: 5 दिनों की अवलोकन अवधि में भोजन के सेवन, पानी के सेवन और चूहों के वजन में वृद्धि (एन = 15) के लिए प्रतिनिधि डेटा। औसत दैनिक भोजन (ए) और पानी (बी) का सेवन उत्तरोत्तर बढ़ जाता है, और यह 3 दिनों के बाद शारीरिक स्तर पर स्थिर हो जाता है। औसत वजन बढ़ना (सी) धीरे-धीरे अवलोकन अवधि के अंत तक बढ़ जाता है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें. चित्र 4: (A) कैनुला (पर्याप्त रूप से रखे गए कैनुला का प्रमाण) और (B) के माध्यम से कंट्रास्ट इन्फ्यूजन के बाद मेसेन्टेरिक धमनी क्षेत्र की कंट्रास्ट एंजियोग्राफी की तस्वीरें और (B) ऑटोप्सी के दौरान अभी भी अच्छी तरह से स्थित कैनुला। कृपया इस आंकड़े के एक बड़े संस्करण को देखने के लिए यहां क्लिक करें। इलास्टोमेरिक पंप प्रवेशिका खाली अवशेषों के साथ पेटेंट पेटेंट नहीं n=15 13 2 12 3 % 86.7 13.3 80 20 तालिका 1: Elastomeric पंप निर्वहन और खारा जलसेक के 24 घंटे के बाद cannula patency. पैटेन्सी का परीक्षण एक सिरिंज के साथ रक्त खींचकर और कैनुला में 5 मिलीलीटर खारा को शामिल करके किया गया था।

Discussion

इस चूहे एसएमए जलसेक मॉडल का मुख्य लाभ जानवरों के विशाल बहुमत में कम से कम 24 घंटे के लिए इसकी स्थिरता और स्थायित्व है। एंटी-कोगुलेंट का जलसेक इस समय अंतराल को लंबा कर सकता है। मॉडल mesenteric क्षेत्र में चुनिंदा दवाओं के एक विश्वसनीय जलसेक की अनुमति देता है, छोटे आंत्र और बृहदान्त्र के समीपस्थ भाग को लक्षित.

तकनीक की सफलता के लिए कई कदम महत्वपूर्ण हैं। एक बहुत छोटे पोत में कैनुलेशन प्राप्त करने के लिए कम से कम 400 ग्राम वजन वाले चूहों का चयन करना महत्वपूर्ण है; लिंग और उम्र प्रासंगिक नहीं हैं। सही सर्जिकल उपकरणों और कैनुला के प्रकार का चयन करना भी महत्वपूर्ण है। यहां, एक छोटे पॉलीयुरेथेन कैनुला (0.4 मिमी ओ.डी., 0.25 मिमी आईडी) को बड़े कैनुला (0.93 मिमी ओ.डी., 0.5 मिमी आईडी) में 1 सेमी डाला जाता है ताकि एक कार्यात्मक और उपयोगी कैथेटर प्राप्त किया जा सके ताकि छोटे धमनी और बड़े जलसेक प्रणाली दोनों कनेक्शनों को अनुमति दी जा सके।

पहला सर्जिकल महत्वपूर्ण कदम एसएमए और शाखा को आसपास के वसा ऊतक (चरण 3.5) से कैनुलेशन के लिए पहचाना जाता है। यह ऊतक और धमनी के बीच कैनुला के सम्मिलन से बचने में मदद करता है, जो एक आम गलती है। हालांकि, यह सफाई कदम मुश्किल है क्योंकि एसएमए की छोटी शाखा नाजुक और नुकसान पहुंचाना आसान है। यदि शाखा घायल हो जाती है, तो लिगेचर द्वारा रक्तस्राव को रोकना और एक अलग समीपस्थ शाखा चुनना संभव है, क्योंकि जानवर को बर्बाद नहीं करना है।

कैनुला के भीतर हवा के बुलबुले के गठन को रोकने और गैस एम्बोलिज्म से बचने के लिए, शाखा में सम्मिलन से पहले टिप तक कैनुला को खारा से भरा जाना चाहिए। जगह में प्रवेशनी को सुरक्षित करने के लिए, सर्जिकल थ्रेड (4-0 सिल्क) का आवेदन धमनी में सम्मिलन के बिंदु और कैनुला टिप के बीच होना चाहिए, सीधे कैथेटर के चारों ओर पोत के शीर्ष पर। सर्जिकल गाँठ कैनुला को ठीक करने के लिए पर्याप्त तंग होना चाहिए, लेकिन इसे रोकने के लिए बहुत तंग नहीं होना चाहिए (चरण 3.12)।

एक सही कैनुलेशन सुनिश्चित करने का सबसे अच्छा तरीका यह है कि रक्त प्रवाह को कैनुला (चरण 3.10) के माध्यम से वापस देखा जाए। समस्या निवारण के संदर्भ में, यदि ऐसा नहीं होता है, तो यह निम्न कारणों से हो सकता है:

प्रवेशनी को धमनी में सही ढंग से नहीं डाला गया था;

प्रवेशनी धमनी के अंदर है, लेकिन एक गलत स्थिति में नोड द्वारा occluded;

प्रवेशनी धमनी के अंदर है और कैनुला में एक हवा का बुलबुला प्रवाह को धीमा कर रहा है;

कैनुला के भीतर एक थक्का बन गया है।

एक गलत सम्मिलन धमनी और वसा ऊतक के बीच की जगह में कैनुला स्थिति के कारण हो सकता है। इस मामले में फिर से सम्मिलन आवश्यक है। जब पोत के ऊपर की गाँठ कैनुला को रोकती है, तो इसे बहुत सावधानी से खोलना और इसे रीमेक करना संभव है। कैथेटर में छोटे हवा के बुलबुले आम तौर पर कैनुलेशन से समझौता नहीं करते हैं और जीवन के लिए खतरा नहीं हैं; लेकिन अगर कैनुला में एक बड़ा हवा का बुलबुला है तो सिरिंज का उपयोग करके कैनुला पर वापस आकर्षित करना या कैथेटर को एक अलग शाखा में फिर से रखना आवश्यक है। आमतौर पर, थक्के के गठन से बचना और ऑपरेशन के दौरान थोड़ी देर में एक बार खारा के 0.2 एमएल बोलस को शामिल करके कैनुला पेटेंट रखना संभव है।

इस अध्ययन की एक सीमा लंबे समय तक जलसेक समय में कैनुला की पैटेन्सी का एक अंडर-मूल्यांकन है: यहां, चूहों के दौरान 24 घंटे का जलसेक किया गया था जहां एक चयापचय पिंजरे में रखा गया था। एक लंबी जलसेक अवधि प्राप्त करने के लिए, एंटी-कोगुलेंट थेरेपी का उपयोग करना उपयोगी हो सकता है, जो इस अध्ययन में प्रशासित नहीं है। हालांकि, जलसेक के दौरान, चूहे को चयापचय पिंजरे में रखा जाना चाहिए क्योंकि यह एकमात्र ऐसा है जो जलसेक प्रणाली का समर्थन करता है। यह स्थान जानवर के लिए असहज है जिसे लंबे समय तक इलाज किए जाने पर जोर दिया जा सकता है। इसके अलावा, जलसेक के लिए केवल खारा समाधान का उपयोग किया गया था, इसलिए विशिष्ट दवा प्रशासन के बारे में कोई परिणाम नहीं हैं। विधि की एक सीमा कैथेटर के लिए उपयोग किए जाने वाले ऊपर धमनी शाखाओं (यदि मौजूद हो) में डालने की असंभवता है। इस कारण से महाधमनी से निकटतम शाखा को कैनुलेट करने की सिफारिश की जाती है।

अनियंत्रित जानवरों के लिए कोई अन्य चूहा एसएमए दीर्घकालिक जलसेक मॉडल साहित्य में मौजूद नहीं है। कई ^{साल पहले वर्णित} आईएमए कैनुलेशन मॉडल की तुलना में, यहां वर्णित तकनीक में एक व्यापक प्रयोगात्मक लक्ष्य है क्योंकि यह एसएमए परफ्यूजन क्षेत्र में दवा जलसेक की अनुमति देता है और बृहदान्त्र तक सीमित नहीं है। हाल ही में, पहली बार, एसएमए की एक शाखा के चयनात्मक कैनुलेशन का उपयोग आंतों की ^{चिकनी मांसपेशियों} पर प्रभाव का अध्ययन करने के लिए सीधे धमनी मेसेन्टेरिक क्षेत्र में बोटुलिनम विष के जलसेक के लिए किया गया था, लेकिन भविष्य में कई अन्य दवाओं का परीक्षण किया जा सकता है। उदाहरण के लिए, एंटीकोआगुलंट्स को मेसेन्टेरिक थ्रोम्बोसिस, या आंतों के माइक्रोबायोटा एक्शन ¹¹ या यहां तक कि सूजन आंत्र रोगों के लिए दवाओं के साथ दवाओं का अध्ययन करने के लिए संक्रमित किया जा सकता ^है। इंट्रा-धमनी जलसेक विशेष रूप से आंतों के चयापचय अध्ययन के लिए उपयोगी है, क्योंकि रक्त पोर्टल परिसंचरण के माध्यम से जाने से पहले दवा प्रभाव अमूल्य है जहां यह यकृत चयापचय के अधीन है।

Materials

Crile-Wood Needle Holder	2Biological Instruments		Tip Shape: Straight; Tip Width: 2 mm; Clamping Length: 14 mm; Lock: Yes; Scissors: No; Alloy / Material: Stainless Steel; Length: 15 cm; Serrated: Yes
Extra Fine Graefe Forceps	2Biological Instruments		Tip Width: 0.5 mm; Tip Dimensions: 0.5 x 0.5 mm; Alloy / Material: Stainless Steel; Length: 10 cm
Luer Stub Adapter	BD Intramedic		23 gauge for use with 427410 tubing
Membrane valve	Biomed	Mod 617
Poliurethane Catheter	ENKI		external diameter: 0.4 mm, internal diameter: 0.25 mm
Silastic Catheter Laboratory tubing	Healthcare industries	508-002
Spring Scissors	2Biological Instruments		Tip Shape: Angled; Tips: Sharp; Alloy / Material: Stainless Steel
Student Surgical Scissors	2Biological Instruments		Tip Shape: Straight; Alloy / Material: Student Stainless Steel; Serrated: No; Feature: Student Quality