É necessária uma assinatura do JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou inicie seu teste gratuito.
Artigo de método
* These authors contributed equally
O presente protocolo descreve lesões traumáticas de nervos periféricos (TPNIs), incluindo esmagamento precisamente calibrado, laceração estritamente alinhada e desalinhada, bem como lacunas enxertadas e não enxertadas do nervo ciático em camundongos. Sensores personalizados são desenvolvidos para avaliar o trauma nervoso, induzido com ferramentas comumente disponíveis para garantir resultados pós-TPNI reprodutíveis.
A lesão traumática do nervo periférico (TPNI) é uma causa comum de morbidade após trauma ortopédico. Métodos reprodutíveis e precisos de lesão nervosa e desnervação muscular têm sido um objetivo na pesquisa musculoesquelética. Muitos membros traumaticamente lesionados têm trauma nervoso que define o resultado a longo prazo do paciente. Ao longo de vários anos, métodos precisos de produção de lesões nervosas microcirúrgicas foram desenvolvidos, incluindo esmagamento, lacerações e enxerto de lacuna nervosa, permitindo avaliações de resultados reprodutíveis. Além disso, novos métodos são criados para lesões por esmagamento calibradas que oferecem correlações clinicamente relevantes com os resultados usados para avaliar pacientes humanos. Os princípios de manipulação mínima para garantir baixa variabilidade na lesão nervosa permitem adicionar ainda mais lesões teciduais associadas a esses modelos. Isso inclui esmagamento muscular direto e outros componentes de lesões nos membros. Finalmente, a avaliação da atrofia e a análise precisa dos resultados comportamentais tornam esses métodos um pacote completo para estudar o trauma musculoesquelético que incorpora de forma realista todos os elementos da lesão traumática humana do membro.
A lesão traumática de nervos periféricos (TPNI) é uma causa comum de morbidade após trauma ortopédico1,2,3. Anualmente, aproximadamente 3% dos pacientes traumatizados sofrem lesão nervosa 1,4, com incidência de 3,50.000 casos5, resultando em 50.000 reparos cirúrgicos6. As NPTs ocorrem em uma ampla faixa de gravidade, e a recuperação funcional depende diretamente do tipo e da gravidade dessas lesões 7,8,9
Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.
O desenho experimental e os protocolos dos animais foram aprovados pelo Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais (IACUC) da Faculdade de Medicina da Universidade Estadual da Pensilvânia. Camundongos machos C57BL/6J adultos, com 10 semanas de idade, pesando 20-25 g, foram usados para os estudos. Os animais foram alojados no biotério em condições de manejo estéril e aclimatados pelo menos 5 dias antes da realização dos estudos.
1. Preparação animal
Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.
O dispositivo sensor de pressão digital feito sob medida (Figura 1D) opera detectando a mudança na resistência do FSR quando uma força é aplicada. Este dispositivo detecta e registra as quantidades de pressão mais modestas aplicadas a ele com um tempo de resposta de <5 μs, uma taxa de amostragem de 20 Hz e uma faixa de pressão de 2,5-25 lbs31. As diferenças na pressão do SNCI induzida pelo fórceps (Figura 1C) (Figu.......
Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.
A história da pesquisa em TPNI se estende por várias décadas11,12. Os primeiros experimentos com cães e espécies maiores estabeleceram a importância dos modelos animais no estudo dos resultados do TPNI 36,37,38. Com o tempo, esses modelos mudaram para roedores menores, com suas medidas de resultados validadas estabelecidas e comumente us.......
Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.
Os autores não têm nada a divulgar.
Este trabalho foi apoiado por doações do NIH (K08 AR060164-01A) e DOD (W81XWH-16-1-0725; W81XWH-19-1-0773), além do apoio institucional da Faculdade de Medicina da Universidade Estadual da Pensilvânia, Hershey, PA 17033, EUA.
....Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Preparação de álcool | COVIDIEN | 5110 | |
| Buprenorfina | ZooPharm | BSRLAB0.5-211706 | |
| C57BL/6J | Jackson Laboratories, Bar Harbor | N/A | |
| Aplicadores com ponta de algodão | Puritan | 25-8062WC | |
| Tesoura de dissecação | ASSI | ASSI. | |
| Cola de fibrina-TISSEEL | Baxter | 1501263 | |
| Resistor sensível à força (FSR) | N / A | FlexiForce A301 | |
| Fórceps | FST-Dumont | 5SF Inox, 11252-00 | |
| GraphPad Prism | GraphPad Software Inc. | Versão 8.4.3. | |
| Almofada de aquecimento homeotérmica | Kent Scientific | RJ1675 | |
| Cetamina/Ketaved | VEDCO | VED1220 | |
| Pinça Microcirúrgica | Miltex Instrumentos Premium | BL1901 | |
| Pomada lubrificante oftálmica | Akorn Saúde Animal | NDC 59399-162-35 | |
| Placa de Petri | VWR | 25384-092 | |
| Solução salina tamponada com fosfato | Gibco | 14190-144 | |
| Iodopovidona | Solimo | L0017765SA | |
| Dispositivo sensor de pressão de aperto de precisão | Tesoura N | /A | |
| estéreo Miltex Premium | 21-536 | ||
| World Precision Instruments | Modelo PZMIII | ||
| Luvas estéreis | Cardinal Health | 9L19E511 | |
| Grampos cirúrgicos | 3M-Precise | DS-25 | |
| Fita cirúrgica | 3M-Microphore | 1530-0 | |
| Suturas | Ethicon | BV130-5 | |
| Seringa | BD | 309597 | |
| aparador | Philips Electronics | MG3750 | |
| xilazina / anased | Akorn Saúde Animal, Inc. |
Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.
Este artigo foi publicado
Vídeo em breve