Method Article

زرع القصبة الهوائية داخل الرغام: نموذج للتحقيق في مرض مجرى الهواء بعد زرع الرئة

DOI:

10.3791/65953

⸱

November 10th, 2023

 ,  ,  , 
1Latner Thoracic Research Laboratories, Toronto General Hospital Research Institute, University Health Network, 2Temerty Faculty of Medicine, University of Toronto

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يعد نموذج زرع القصبة الهوائية داخل الرئة (IPTT) ذا قيمة لدراسة مرض مجرى الهواء المسد (OAD) بعد زرع الرئة. يقدم نظرة ثاقبة على السلوك المناعي والوعائي الخاص بالرئة في طمس مجرى الهواء بعد الخيفي مع قابلية عالية للاستنساخ. هنا ، نصف إجراء IPTT ونتائجه المتوقعة.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يستخدم زرع القصبة الهوائية داخل الرئة (IPTT) كنموذج لمرض مجرى الهواء المسد (OAD) بعد زرع الرئة. تم الإبلاغ عن هذا النموذج في البداية من قبل فريقنا ، وقد اكتسب استخداما في دراسة OAD نظرا لقابليته العالية للتكاثر التقني وملاءمته للتحقيق في السلوكيات المناعية والتدخلات العلاجية.

في نموذج IPTT ، يتم إدخال طعم القصبة الهوائية للقوارض مباشرة في رئة المتلقي من خلال غشاء الجنب. يختلف هذا النموذج عن نموذج زرع القصبة الهوائية غير المتجانسة (HTT) ، حيث يتم زرع الطعوم في مواقع تحت الجلد أو تحت الجلد ، وعن نموذج زرع القصبة الهوائية التقويمية (OTT) حيث تحل القصبة الهوائية للمتبرع محل القصبة الهوائية للمتلقي.

يتطلب التنفيذ الناجح لنموذج IPTT مهارات تخدير وجراحة متقدمة. تشمل مهارات التخدير التنبيب الرغامي للمتلقي ، وتحديد معايير التهوية المناسبة ، ونزع الأنبوب في الوقت المناسب بعد الشفاء من التخدير. المهارات الجراحية ضرورية لوضع الكسب غير المشروع بدقة داخل الرئة ولضمان الإغلاق الفعال لغشاء الجنب الحشوي لمنع تسرب الهواء والنزيف. بشكل عام ، تستغرق عملية التعلم حوالي 2 أشهر.

على عكس نماذج HTT و OTT ، في نموذج IPTT ، يطور مجرى الهواء الخيفي طمس مجرى الهواء في البيئة المكروية للرئة ذات الصلة. يسمح هذا للباحثين بدراسة العمليات المناعية والأوعية الدموية الخاصة بالرئة التي تنطوي على طمس مجرى الهواء بعد زرع الرئة. علاوة على ذلك ، يعد هذا النموذج فريدا أيضا من حيث أنه يعرض الأعضاء اللمفاوية الثالثية (TLOs) ، والتي تظهر أيضا في الطعم الخيفي للرئة البشرية. تتكون TLOs من مجموعات الخلايا التائية والبائية وتتميز بوجود الأوردة البطانية العالية التي توجه تجنيد الخلايا المناعية. لذلك ، من المحتمل أن يلعبوا دورا حاسما في قبول الكسب غير المشروع ورفضه. نستنتج أن نموذج IPTT هو أداة مفيدة لدراسة المسارات المناعية داخل الرئة والبروليفية المشاركة في تطوير طمس مجرى الهواء في الطعم الخيفي لزراعة الرئة.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم تأسيس زراعة الرئة كعلاج فعال للمرضى الذين يعانون من أمراض الجهاز التنفسي في المرحلة النهائية. ومع ذلك ، فإن متوسط معدل البقاء على قيد الحياة لمتلقي زراعة الرئة البشرية هو حوالي 6 سنوات فقط ، مع تطور التهاب القصيبات المسد (OB) ، وهو نوع من مرض انسداد مجرى الهواء (OAD) ، كونه سببا رئيسيا للوفاة بعد السنة الأولى بعد الزرع1.

تم استخدام العديد من النماذج الحيوانية للتحقيق في الآلية الكامنة وراء OAD. أحد هذه النماذج هو نموذج زرع القصبة الهوائية غير المتجانسة (HTT)2. في هذا النموذج ، يتم زرع ترقيع القصبة الهوائية في الأنسجة تحت الجلد أو الثرب للمتلقي. يحدث فقدان الخلايا الظهارية الطعم الرغامي النا....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم التعامل مع جميع وفقا للمبادئ التوجيهية التي وضعها المجلس الكندي لرعاية في دليل رعاية واستخدام التجارب. تمت الموافقة على البروتوكول التجريبي من قبل لجنة رعاية التابعة لمعهد أبحاث مستشفى تورنتو العام ، شبكة الصحة الجامعية.

1. جراحة المتبرع

ملاحظة: تستخدم الفئران BALB / c كمثال على المتبرعين للتجربة. يجب تنفيذ جميع الإجراءات باستخدام تقنية معقمة.

  1. قبل الإجراء ، سجل وزن كل ماوس.
  2. القتل الرحيم للماوس باستخدام غرفة CO2 .
  3. بمجرد تأكيد الوفاة ، ضع الماوس في وضع ضعيف وقم بتأمين الأطراف بشريط.
  4. تحضير المنطقة الجراحية عن طريق تعقيمها بكحول الأيزوبروبيل بنسبة....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

بناء على خبرتنا ، تتطلب الكفاءة في هذا النموذج عادة ما يقرب من 2 أشهر من التدريب. بمجرد تحقيق الكفاءة ، تتطلب إجراءات المتبرع عادة 15 دقيقة ، بينما تتطلب إجراءات المتلقي حوالي 30 دقيقة. معدل الوفيات المتوقع للمشغل المدرب هو 0٪.

في الشكل 4 أ، يظهر الطعم الخيفي الرغامي انسدادا كاملا بالأنسجة الأرومية الليفية، وتتلف الخلايا الطلائية بشكل واضح. على العكس من ذلك ، في الشكل 4B ، يظل طعم القصبة الهوائية براءة اختراع ، ويتم الحفاظ على الخلايا.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يتضمن إجراء IPTT للفأر خطوات حاسمة. فيما يتعلق بالتخدير ، فإن الخطوة الأولى الحاسمة هي التنبيب الرغامي. من الضروري حمل الماوس على ارتفاع مناسب مع وضع أرجله على الطاولة لتصور الحبال الصوتية وتسهيل التنبيب الفوري. بالإضافة إلى ذلك ، من الضروري تعديل حجم الجهاز التنفسي الدقيق وضغط الزفير النهائي الإيجابي (PEEP). عادة ، حجم الجهاز التنفسي من 500 ميكرولتر و PEEP من 2 سمH 2O كافية للفئران التي تزن 25-30 جم. ومع ذلك ، قد تواجه الفئران المتلقية الأكبر نوبات "الفواق" ، مما يشير إلى نقص الأكسجين. في مثل هذه الحالات ، قد.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ليس لدى مؤلفي هذه المخطوطة أي تضارب في المصالح للكشف عنه.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يود المؤلفون أن يشكروا جيروم فاليرو على تحرير هذه المخطوطة. تم إنشاء الشكل 1 والشكل 3I و J و L باستخدام BioRender.com.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
BALB / cJمختبر جاكسون8-10 أسابيع 25-30 جمذكر ، متبرع
1 مل حقنةبيكتون ديكنسون309659
BD PrecisionGlide Needle Aiguile BD
PrecisionGlide		Becton Dickinson305122
Bovie Change-A-Tip Deluxe عاليBovieDEL1
C57BL / 6Jمختبر جاكسون8-10 أسابيع 25-30 جمذكر ، المتلقي
دومون # 5/45 ملقطF & middot ؛ S & middot; T11251-35
Ethicon Ligaclip متعدد المقاطع التطبيقات-EthiconLX107
ملقط Graefe Extra FineF & middot ؛ S & middot; T11150-10
Glover Bulldog ClampIntegra320-127
Halsted-Mosquito HemostatsF & middot ؛ S & middot; T13009-12
Horizon Titanium Ligating ClipsTeleflex001201
Leica M651 مجهر جراحي يدوي لإجراءات الجراحة المجهريةLeica
Magnetix Fixator مع قفل زنبركيCD + LABSACD-001
مقص الجراحة المجهريةJarit277-051
جهاز التنفس الصناعي للفأر والفئران في الفترة المحيطة بالولادة موديل 687هارفارد55-0001
Perfadex PlusXVIVO19850
طرف ضام بلانت - 2.5 ممCD + LABSACD-011
طاولة صغيرةCD + LABSACD-003
Surgipro Blue 24 "CV-1 تفتق ، مرهمCovidienVP702X
Systaneمزدوج السلاح Alconn1444062
نظام المطاطCD + LABSACD-007
Terumo Surflo IV قسطرة ، 20 جم × 1 فيTerumo Medical CorporationSR-OX2025CA
VMT طاولة أعلىبنسون91803300
الحرارة الصناعي

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Chambers, D. C., et al. The International Thoracic Organ Transplant Registry of the International Society for Heart and Lung Transplantation: Thirty-fifth adult lung and heart-lung transplant report-2018; Focus theme: Multiorgan Transplantation. J Heart Lung Transplant. 37 (10), 1169-1183 (2018).<....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Intrapulmonary Tracheal TransplantationObliterative Airway DiseaseLung TransplantationTracheal AllograftAirway ObliterationChronic Lung AllograftTertiary Lymphoid OrgansImmunological BehaviorsFibrous ObliterationMurine Transplant Model

Related Articles