Summary
ويمكن اختبار مقاومة النباتات للمضغ الحشرات العاشبة في عدة طرق. هنا ، ونحن لشرح كيفية انشاء اختيار وتجربة لا للخيار مع نموذج Arabidopsis thaliana مصنع لتحديد المقاومة ضد الأنواع rapae Pieris الآفات.
Abstract
يرقات فراشة الكرنب البيضاء الصغيرة هي آفة في البيئات الزراعية. هذا النوع من كاتربيلر يغذي النباتات في عائلة الملفوف ، والتي تشمل العديد من المحاصيل مثل الكرنب والقرنبيط ، وبراعم بروكسل تربية الخ من الحشرات يحدث على النباتات الملفوف في الاحتباس الحراري. وهناك حاجة إلى اثنين على الأقل من أقفاص لتربية rapae Pieris. واحد لليرقات وأخرى لاحتواء الكبار ، والفراشات. من أجل التحقيق في دور الهرمونات النباتية والمواد الكيميائية السامة في مصنع لمقاومة هذه الآفة الحشرية ونظهر تجربتين. الأول ، تحديد دور حمض jasmonic (JA -- وهو هرمون نباتي وأشار في كثير من الأحيان مقاومة للحشرات) في مقاومة الحشرات rapae Pieris المضغ. ويمكن مقارنة نمو اليرقة على النباتات البرية من نوع ومتحولة ضعف في إنتاج JA. وتعتبر هذه التجربة "لا خيار" ، وذلك لأن يرقات يضطرون إلى العيش على مصنع واحد والذي يجمع أو نقص في JA. ثانيا ، علينا أن نظهر أن تحقق تجربة دور glucosinolates ، والتي تستخدم على النحو oviposition (وضع البيض) الاشارات. هنا ، فإننا نستخدم Arabidopsis WT ومتحولة ضعف في الإنتاج glucosinolate في تجربة "الاختيار" الذي يسمح للإناث الفراشات في اختيار لتضع بيضها على النباتات إما التركيب الوراثي. هذا الفيديو يوضح الإعداد تجريبية لكلا المقايسات فضلا عن نتائج تمثيلية.
Protocol
لا خيار التجربة :
- أرفق بعناية النباتات Arabidopsis الفائدة في كوب من البلاستيك. في هذه الحالة : العقيد - 0 (WT) ، ومتحولة ضعف في إنتاج JA. تأكد من الحد من الأضرار التي لحقت الأوراق. لذلك يمكنني استخدام الجزء الخلفي من هذا الرسام.
- استخدام الفرشاة الجميلة لاتخاذ اليرقات الطازجة من مستعمرة على الملفوف.
- بعناية وضع اليرقة على النباتات Arabidopsis.
- اليرقة الوزن في يوم 4 و 7 و 10. TIP : تنمو النباتات الخاصة بك تحت ظروف النهار القصير (8 ساعة ضوء) لزيادة النمو الخضري (1 يرقة يمكن الوفاء دورة الحياة الكاملة في 1 النبات).
اختيار التجربة :
- ويتم اختيار اثنين من النباتات ، واحدة من كل الوراثي. الأفضل هو أن تنمو النباتات في وعاء نفسه ، للحد من عوامل أخرى ، مثل آثار صينية ، الخ.
- وضع النباتات في قفص فراشة.
- حدد الأنثى الخصبة. أمسكت عادة الأنثى التي يتم وضع البيض بنشاط في مستعمرة تربية.
- الافراج عن الإناث في قفص مع اختيار اثنين من النباتات لمدة 24 ساعة.
نصيحة 1 : القضاء له تأثير التعلم ، لا إعادة استخدام الإناث للاختبارات اختيار لاحقة.
نصيحة 2 : يمكن للمرء أن يقارن فقط النباتات التي تحتوي على النمط الظاهري نمو مماثلة. بدلا من ذلك ، هل يمكن تحميل كل ورقة من النمط الجيني على رأس دورق مخروطي وقارن بين قدرتها على جذب الإناث.
يرجى زيارة المراجعات السنوية للبيولوجيا النبات للحصول على مزيد من المعلومات حول هذه الحصانة ومصنع لبروتوكول الحشرات بالأعشاب.
