İnce Tabaka Kromatografisi

Kaynak: Lara Al Hariri, Massachusetts Amherst Üniversitesi, MA, ABD

1. Çözümlerin HazırlanmasıExpand

   Burada, çiftler halinde çalışan 10 öğrenci için laboratuvar hazırlığını gösteriyoruz, biraz fazlalık ile. Lütfen miktarları gerektiği gibi ayarlayın.

   • Başlamadan önce laboratuvar önlüğü, koruyucu gözlük ve nitril eldiven giyin. İnce nitril eldivenlere dakikalar içinde nüfuz eden heksan, etanol ve etil asetat ile çalışacaksınız, bu nedenle üzerlerine herhangi bir çözücü bulaşırsa eldivenlerinizi hemen değiştirin.
   • ~ 1 mg / mL bütil fenil eter, fenol, benzoik asit, aspirin, kafein ve asetaminofen çözeltileri hazırlayın. 20 mL'lik bir cam şişeye yaklaşık 10 mg veya 10,7 μL bütil fenil eter ölçmek için analitik bir terazi veya mikropipet kullanın. not: Bütil fenil eter, oda sıcaklığında bir sıvıdır ve çeker ocakta kullanılmalıdır.
   • 10 mL etanolü ölçün, şişeye ekleyin ve 'etanolde 1 mg/mL bütil fenil eter' olarak etiketleyin.
   • Fenol ile başlayarak diğer beş çözeltiyi hazırlayın. 20 mL'lik bir cam şişeyi daralayın ve içine 10 mg fenol ölçün.
   • Ardından, şişeye 10 mL etanol ekleyin ve fenol tamamen eriyene kadar karışımı bir cam çubukla karıştırın.
   • Şişeyi kapatın ve 'etanolde 1 mg / mL fenol' olarak etiketleyin. 1 mg / mL benzoik asit, aspirin, kafein ve asetaminofen çözeltileri hazırlamak için bu işlemi tekrarlayın. Şişeleri eğitmenin başlığında veya ortak bir çalışma alanında saklayın.
   • Etanolde piyasada bulunan analjeziklerin üç bilinmeyen solüsyonunu hazırlayın. Tablet formülasyonları değişebilir, bu nedenle aktif bileşenlerin ağırlık yüzdesini tahmin etmek için tabletleri önceden tartmak isteyebilirsiniz.
   • Bir asetaminofen tableti toz haline getirmek için küçük bir havan ve havan tokmağı kullanın. 10 - 15 mg tozu 20 mL'lik bir cam şişeye ölçün.
   • Ardından, şişeye 10 mL mutlak etanol ekleyin ve karışımı temiz bir cam çubukla 1 – 3 dakika karıştırın. Şişenin dibinde bir miktar katı kalırsa sorun değil.
   • Şişeyi kapatın ve 'Bilinmeyen 1' olarak etiketleyin. Kalan tozu atın ve harcı ve havaneli iyice temizleyin ve kurulayın.
   • Bilinmeyen 2 çözeltisini yapmak için 10 – 15 mg ezilmiş aspirin tableti ve bilinmeyen 3 çözeltiyi aynı şekilde yapmak için asetaminofen, aspirin ve kafein karışımı içeren 30 – 40 mg ezilmiş tablet kullanın. Bilinmeyen çözümleri bilinen çözümlerle birlikte saklayın.
   • Öğrencilerin eluent olarak kullanacakları çözücü karışımlarını yapın. 100 mL% 60 heksan ve% 40 etil asetat karışımı hazırlayın. 60 mL heksan ölçün ve 250 veya 400 mL'lik bir behere dökün. 40 mL etil asetat ekleyin ve karışımı homojen görünene kadar karıştırın.
   • 150 mL'lik bir şişeyi '%60 heksan, %40 etil asetat (v/v)' olarak etiketleyin ve çözeltiyi aktarmak için bir huni kullanın. Şişeyi bir kenara koymadan önce kapağını kapatın.
   • %90 etil asetat ve %10 heksan karışımından 100 mL yapın. 10 mL heksan ölçün ve 250 veya 400 mL'lik bir behere dökün. Daha sonra 90 mL etil asetat ekleyin ve karışımı iyice karıştırın.
   • 150 mL'lik bir şişeyi '%90 etil asetat, %10 hekzan (h/v)' olarak etiketleyin. Karışımı şişeye aktarın ve sıkıca kapatın. Solventleri ve solvent karışımlarını yanıcı bir dolapta saklayın.
2. Laboratuvarın HazırlanmasıExpand
   • Cam, iyot ve halojenlenmemiş organik atıklar için atık kapları hazırlayın veya edinin. Her laboratuvar lavabosunda bir miktar kağıt havlu bulunduğundan emin olun.
   • Prize takın ve paylaşılan bir alanda küçük bir 254 nm UV lambasını test edin.
   • Merkezi bir çeker ocakta bir ocak gözü kurun, 500 mL'lik bir beheri 'iyot odası' olarak etiketleyin ve behere yaklaşık 1 – 2 g iyot yerleştirin. Büyük bir saat camı ile örtün ve ocak gözünün üzerine koyun.
   • Her öğrenci laboratuvar istasyonunda aşağıdaki cam malzemeleri ve ekipmanları belirleyin (öğrencilerin çiftler halinde çalışmasını öneririz):

     3 adet 50 mL vidalı cam kavanoz

     3 adet 10 mL dereceli silindir

     1 Kalem

     1 Etiketleme kalemi

     1 Çift cımbız

     1 Metrik artışlı küçük cetvel

   • 150 mL'lik bir şişeyi '%100 hekzan' olarak etiketleyin, şişeye yaklaşık 100 mL hekzan dökün ve sıkıca kapatın. Heksan stok şişesini bir kenara koyun ve heksan ve etil asetat karışımlarını saf heksan şişesiyle birlikte çözücü davlumbazına yerleştirin.
   • Bilinen altı çözümü ve üç bilinmeyen çözümü paylaşılan bir tezgahta düzenleyin.
   • Tek kullanımlık cam kılcal damarlar, orta boy filtre kağıtları ve TLC plakaları içeren kapları yakına yerleştirin.
   • Laboratuvarın başında, her öğrenci grubuna rastgele bilinmeyen bir bileşik atayın.
   • Bazı öğrenciler ilk gelişimin yaklaşık yarısına geldiğinde, iyotu ocak gözünde 110 °C'ye ısıtın.
   • Laboratuvardan sonra beheri soğumaya bırakın ve iyot atıklarını uygun şekilde atın.