Yama kelepçesi

Kas kasılması ve sinir iletimi gibi birçok temel hücre işlevi, pozitif ve negatif yüklü iyonların hücre membranı boyunca hareketiyle üretilen elektrik sinyallerine dayanır. Tüm hücre veya tek iyon kanalı boyunca akan akımı kaydetmenin etkili bir yöntemi yama kelepçe tekniğidir.

Bu yöntemde, elektrolit çözeltisi içeren bir cam mikropipet, hücre membranının küçük bir kısmına sıkıca kapatılır. Sonuç olarak, hücre membranının bir kısmı elektriksel olarak izole edilir ve kanallar boyunca hareket eden iyonların yalnızca mikropipet içine akması sağlanır. Ayrıca hücre membranının bu şekilde sıkı bir şekilde kapatılması, iyonların hücrenin asılı olduğu banyo çözeltisine kaçmasını önler.

Farklı Yama Kelepçe Yöntemleri:

Araştırma ilgisine bağlı olarak hücrenin biyofiziksel özelliklerini ölçmek için yama-kelepçe yönteminin çeşitli varyasyonları kullanılabilir. Örneğin araştırmacılar membran voltajını kelepçeleyebilir veya kontrol edebilir ve içinden geçen akımı ölçebilir. Alternatif olarak akımı kesebilir ve membran voltajındaki herhangi bir değişimi ölçebilirler.

Hücreye bağlı modda, tek veya birkaç iyon kanalı içeren membran yaması sağlam kalır. Sonuç olarak, yalnızca membran yamasından geçen akım ölçülebilir. Buna karşılık, tam hücre yöntemi, kısa süreli güçlü emme uygulanarak membran yamasının parçalanmasını içerir. Sonuç olarak pipetin içi sitoplazma ile süreklilik kazanır. Bu mod, hücrenin tamamındaki elektrik akımının ve voltajının ölçülmesini sağlar.

Başka bir yama kelepçe yöntemi, takılı pipetin yavaşça geri çekilmesini gerektirir. Sonuç olarak, membran yaması sıkı contayı etkilemeden eksize edilir. Bu içten dışa konfigürasyonda, membranın hücre içi kısmı banyo çözeltisine maruz bırakılır ve kanal fonksiyonlarını etkileyen hücre içi faktörlerin incelenmesine olanak tanır.