32.3: Hücre Hatları

Bir hücre hattı, in vitro olarak yetiştirilen ve birkaç nesil boyunca alt kültürlenebilen bir hücre popülasyonudur. Normal hücreler, replikatif yaşlanma olarak bilinen bir süreç olan belirli sayıda hücre bölünmesinden sonra bölünmeyi bırakır. Hayflick limiti olarak adlandırılan bu sayı, 1961’de Leonard Hayflick tarafından kültürde yetiştirilen fetal hücrelerin sadece 40-60 kez bölünebildiğini gözlemlediğinde kavramsallaştırıldı. Bu sınır, hücre bölünmesinin her turunda telomerlerin kısalmasından kaynaklanır ve hücre bölünmesinin yetersiz telomer uzunluğunun ötesinde olmasını önler. Telomeraz enziminin aşırı ekspresyonu telomer kısalmasını önler ve ölümsüz hücre hatları üretme yöntemlerinden biridir.

Hücre Hattı Türleri

Doğrudan hayvan dokusundan elde edilen birincil hücre hatları, köken hücrelerinin yaklaşık genotipik ve fenotipik özelliklerini korur. Örneğin, insan akciğer hücre hattı BEAS2B ve retina hücre hattı RPE1, normal 46 kromozom sayısına yakın bir sayıya sahiptir. Buna karşılık, kanser hücrelerinden elde edilen hücre hatları süresiz olarak çoğalabilir ve dönüştürülmüş hücre hatları olarak adlandırılır. Bu hücre hatları, ankraj bağımsızlığı ve temas inhibisyonu eksikliği gibi ek özellikler gösterir. Dönüştürülmüş hücre hatları da yaygın olarak değiştirilmiş sayıda kromozoma sahiptir. Örneğin, SW480 ve A549 hücre hatları sırasıyla 56 ve 66 kromozoma sahip olabilir.

Hücre Hatlarını Doğrulama

Hücre hatları, laboratuvarda genomik kararsızlığa ve çapraz kontaminasyona eğilimlidir. Bu nedenle, bunları rutin olarak doğrulamak önemlidir. Spektral karyotipleme gibi teknikler, sayısal ve yapısal kromozomal sapmaları tanımlamaya ve çapraz kontaminasyonu tespit etmeye yardımcı olur. Hücre hatları, DNA’daki her hücre hattına özgü kısa tandem tekrarlarının (STR) sayısını analiz etmek için kullanılan bir yöntem olan STR profilleme ile moleküler düzeyde de doğrulanabilir.