Kolon Kromatografisi Türleri

Jel filtrasyonu, iyon değişimi ve afinite kromatografisi, bir protein süspansiyonu gibi bir karışımdan saf bileşikleri çıkarmak için kullanılan yaygın kolon kromatografisi türleridir.

Jel filtrasyon kromatografisi, belirli gözenek boyutları oluşturmak için inert bir polimerik jel boncuk matrisi kullanır.

Bir protein süspansiyonu durumunda, gözenek boyutundan daha büyük proteinler önce elüte olurken, daha küçük olanlar jel boncuklarda hapsolur. Bu sıkışmış proteinler daha sonra çoklu çözücü yıkamaları ile ayrıştırılabilir.

Buna karşılık, bir iyon değişim kolonu, belirli bir pH'ta net bir pozitif veya negatif yük veren zayıf asitler veya bazlarla kaplanmış matris boncuklarla doludur.

Bu, zıt yüklü proteinlerle iyonik bağlar oluşturarak proteinleri yüzey yüklerine göre ayırmaya yardımcı olur.

Son olarak, afinite kromatografisi, spesifik bağlanma etkileşimlerine dayalı bir karışımdan bir hedef proteini çıkarmak için antikorlar gibi ligandlarla etiketlenmiş bir matris kullanır.

Afinite ve iyon değişim kromatografisinde, hedef protein son olarak, pH, iyonik kuvvet veya rekabetçi bir molekülün eklenmesi gibi koşullardaki bir değişiklik nedeniyle kolon-protein etkileşimlerini zayıflatan bir elüsyon çözücüsü eklenerek ayrıştırılır.