Elastaz ile murin Deneysel Abdominal Aort Anevrizmalarının Yaratılış

Summary

Bu video infrarenal abdominal aort segmentine domuz pankreatik elastaz geçici intraluminal infüzyonu ile farelerde abdominal aort anevrizması (AAA) ikna etmek için nasıl gösterir. Modeli birçok transgenik ve gen knockout farelerde ortaya çıkması nedeniyle AAA patobiyolojisi geniş bir fikir eklemek için yeteneğine sahiptir.

Abstract

Infrarenal abdominal aort segmentine domuz pankreatik elastaz Geçici intraluminal infüzyon ilk Anidjar sıçan ve meslektaşları tarafından açıklanan bu yana abdominal aort anevrizması (AAA) en yaygın olarak kullanılan hayvan modelinde kendi gelişimi için ¹ mantık tabanlı elastin bozulmuş doğa AAA'ların gözlenen. Bu sıçan modelinde infrarenal aort bölgede farelerin AAA'ların üretmek için modifiye edilmiştir. ² modeli birçok transgenik ve gen knockout farelerde ortaya çıkması nedeniyle, AAA patobiyolojisi geniş bir fikir eklemek için yeteneğine sahiptir. Ayrıca, AAA için potansiyel terapötik ajanların test etmek için geçerli bir platform. Bu video, laboratuarda kullanılan elastaz infüzyonu AAA prosedürü göstermektedir.

Fare izofluran 2.5% anestezi ve laparotomi steril koşullar altında yapılır. Karın aortais bir işletim stereomikroskopta (Leica) yardımı ile izole edilmiştir. Proksimal ve distal aorta çevresinde geçici ligatür yerleştirdikten sonra, 30-gauge bir iğne ucu ile bifurkasyon aortotomy oluşturulur. PE-10 polietilen boru ısı konik bir segment aortotomy ile tanıştırdı ve güvence altına alınmıştır. Aort lümeni daha sonra 5-15 dakika tuzlu su içeren tip I domuz pankreatik elastaz (Sigma Chemical Co 4.5 U / ml) ile 100 mm Hg perfüze. Perfüzyon kateteri çıkardıktan sonra, aortotomy lümeninde daralma olmadan onarılır.

Protocol

1. Fare ile anestezi inhalasyon izofluran 2.0-3.0ml / L.
2. Karın traş ve alkol ve betadin ile temizlendi.
3. Fare operasyon alanında sırtüstü yerleştirilir.
4. Cerrah tarafından steril eldiven giyilir, kullanılan aletler ve sıcak boncuk sterilizatör ile sterilize edilmiştir.
5. Uzun bir orta hat abdominal kesi yapılır. Karın içeriği abdominal aorta maruz steril gazlı bez ile karın dışında geri çekilir.
6. Abdominal aorta, sol renal ven seviyesinden çatallanma izole edilir.
7. Abdominal aorta dalları maruz kalan ve 10-0 sütür ile bağlandı. Bifurkasyonunun 1.0cm içinde tüm aort dalları bağlandı.
8. Geçici ipek 6.0 ligatür aort proksimal v....

Discussion

Önceki çalışmalar, farklı ticari elastaz ^{hazırlıkları} 3 AAA gelişiminde önemli bir parti için çok varyasyon kaydetti var. Böylece, üretim çok izlemek için AAA'ların ikna etmek için hazırlık yeteneği belgelemek için uygun kontrol gruplarının yanı sıra kritik öneme sahiptir.

İlginçtir ki, bu modelde AAA geliştirme yatkınlığı ³ kullanılan fare suşu bağlıdır. Geçerli video kullanılan fare hatlarıyla protokolünü kullanarak AAA tutarlı kalkınma C57BL / 6 suşu. Elastaz kon.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Tip I domuz pankreas elastazı	Reaktif	Sigma-Aldrich	E1250
polietilen boru (PE-10)		BD Biosciences	427400
DEĞİŞTİR-A-İPUCU		Bovie Medical Corporation	18010-00 (FST)	koter bıçağı
LEICA MZ6		Leica Microsystems		stereomikroskop
LEICA		Leica Microsystems		USB kamera
Image Pro Express sürüm 6.0		Medya Sibernetik A.Ş.		yazılım