$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
1. Video İzleme Parametrelerinin Kalibrasyonu
- Davranışsal ölçümlerden önce, video izleme yazılımında gözlem ve kalibrasyon parametrelerini ayarlayın (bkz. Malzeme Tablosu).
- Tek bir kuyucuğa en az 1 larva balığı içeren kayıt odasına bir kuyu plakası yerleştirin. Kalibrasyon parametrelerini ayarlamak için plakayı ve ilgili balığı temsiller olarak kullanın.
- Video parça yazılımında, "Dosya | Protokol Oluştur", bir "protokol oluşturma sihirbazı" iletişim kutusu açacaktır. "Konum Sayısı" alanına, kuyu plakasının bireysel kuyu sayısını girin ve ardından "Tamam" ı tıklayın.
- Ekranın üst kısmında, "Görüntüle | Tam Ekran", sistemden kuyu plakasının üstten kamera görüntüsünü görüntülemesini isteyecektir.
- Üç çok renkli şekil olarak görünen "Alanları Çiz" simgesini tıklayın. Kuyu plakası görüntüleme alanının sağında, "Alanlar" etiketli alandaki daire simgesini seçin.
- Kuyu plakasının sol üst kuyusundaki dairesel video izleme alanını tanımlamak için imleci kullanın. "Sağ Üst İşaret" i seçin ve ardından sağ üst kısımdaki görüntüleme alanını iyi bir şekilde ana hatlarıyla belirtin. Ardından, sağ alt kısmı iyi bir şekilde özetlemek için "Alt İşaret"i seçin.
NOT: Dairesel anahattı çizdikten sonra, muhtemelen konumunun ayarlanması gerekecektir. Anahattın konumunu ayarlamak için "seç"e tıklayın ve ardından anahatlı alanı hareket ettirmek için imleci kullanın. Ayrıca, ana hatlar "Kopyala" ve ardından "Yapıştır" ı tıklanarak çoğaltılabilir.
- Sol üst, sağ üst ve sağ alt kuyu izleme alanları tanımlandıktan sonra, yazılımın kalan kuyuların görüntüleme alanlarını otomatik olarak tanımlamasını istemek için "Oluştur"a tıklayın.
- "Kalibrasyon" etiketli alanda, "Ölçek Çiz" i tıklayın. Plaka boyunca yatay bir çizgi çizmek için imleci kullanın. Çizgi çizildikten sonra, "Kalibrasyon ölçümü" etiketli bir iletişim kutusu görünecektir. Kuyu plakası uzunluğunu girin ve "Tamam" ı tıklayın.
- "Çizim Alanları" simgesine tıklayarak çizim yöneticisinden çıkın.
- "Fayanslar" simgesini tıklayın. İmleci kullanarak, görüntüleme ekranında görünen tüm kutuları, her biri yeşil olacak şekilde vurgulayın.
NOT: Döşemeler simgesi, altı ayrı küçük kareden oluşan bir grup olarak görünür
- "Tıkla Görüntüle| Tam ekran". Plaka görüntüleme alanının sağında, "Algılama Eşiği" etiketli kutudaki "Bkg" düğmesine tıklayın. Piksel algılama eşiğini ayarlamak için eşik ayar çubuğunu kullanın. Uygun piksel algılama eşiği seçildikten sonra, "Gruba Uygula"ya tıklayın.
NOT: Bu protokol, zebra balığı gözlemleri için algılama eşiğini siyah modda 13 ve şişman kafa minnow gözlemleri için şeffaf modda 110 olarak ayarlar.
- "Hareket Eşiği" etiketli kutuya, istediğiniz hareket hızı izleme parametrelerini girin. Hız parametreleri ayarlandıktan sonra "Gruba Uygula"ya tıklayın.
NOT: Bu protokol, küçük/büyük hareketleri 20 mm/sn'de ve etkin/küçük hareketleri 5 mm/sn'de ayarlar. Bu seçimler, yazılımı larva balıklarının hareketini üç farklı hız seviyesinde izleyecek şekilde programlar: etkin olmayan (donma) = <5 mm/sn, küçük (seyir) = 5–20 mm/sn ve büyük (patlama) = >20 mm/sn.
- "Parametreler | Protokol Parametreleri" açılır menüden. İletişim kutusunda "Zaman" sekmesini seçin. Gözlem süresini ve entegrasyon süresini girin. Parametreler girildikten sonra "Tamam" ı tıklayın.
- Her bir fotoperiyot için açık/koyu fotoperiyot sürelerini ve ışık yoğunluğunu ayarlamak için, "Parametreler" açılır menüsünden "Hafif Sürüş"ü seçerek hafif sürücü ayarları iletişim kutusunu açın.
NOT: Birden fazla açık-koyu fotoperiyot ayarlamak için protokol videosuna bakın.
- Video izleme parametreleri ayarlandıktan sonra, gözlem protokolünü kaydedin.
NOT: Bu protokol, 10 dakikalık bir alışma aşaması ve ardından iki adet 10 dakikalık aydınlık dönem ve iki 10 dakikalık karanlık dönemden oluşan 4 değişen açık/karanlık aşamayı içeren 50 dakikalık bir süre boyunca balık davranışını gözlemler. Entegrasyon süresi, 50 dakikalık davranış denemesinin her dakikası için davranışı ölçecek şekilde ayarlanmıştır.
2. Larva Balıklarının Lokomotor ve Fotomotor Davranışının Gözlemlenmesi
- Deney balıklarını içeren kuyu plakasını davranışsal kayıt odasına yerleştirin.
- Video izleme yazılımında, bir sonraki adımda geliştirilen izleme protokolünü açın.
- Video izleme görüntüleyicide, tüm larvaların bilgisayar ekranında görünür olduğundan, her kuyucukta yalnızca bir ayrı larva bulunduğundan ve tek tek kuyucukların adım 1.1.5 ve 1.1.6'da tanımlanan gözlem alanları içinde hizalandığından emin olmak için kontrol edin.
- "Deney | Yürütmek".
NOT: Sistem, gözlem verilerini kaydetmek için kullanıcıdan bir ad ve konum sağlamasını isteyecektir.
- Gözlem verilerinin adı ve kaydetme konumu belirtildikten sonra, önceden tanımlanmış tüm görüntüleme alanlarını vurgulamak için "Birkaç Canlı Görüntü" simgesine tıklayın
NOT: Bu simge bilgisayar ekranının üst kısmında bulunur ve dört küçük kareye bölünmüş bir kutu olarak görünür. Bu simgeye tıklamak, önceden tanımlanmış tüm görüntüleme alanlarını vurgulayacaktır.
- Kayıt odasının panelini kapatın ve "Arka Plan | Başlat" bilgisayar monitöründe.