Optokinetik Yanıt Testi: Zebra Balıklarında Görme Keskinliğini Ölçmek İçin Bir Yöntem

Özet

Kaynak: Cameron, D. J., et al. Zebra Balıklarında Görme Keskinliğinin Kantitatif Bir Ölçüsü Olarak Optokinetik Tepki. J. Vis. Uzm.(2013)

Bu videoda zebra balıklarında optokinetik tepki testi açıklanmaktadır. Video, görsel hareketli uyarana dayalı olarak refleksif göz hareketlerini ölçer ve zebra balıklarında görme keskinliğini belirler.

Protokol

1.Optokinetik yanıt (OKR)

1. 14,5 cm çapında döner bir tambur, ayarlanabilir ışık yoğunluğu ayarlarına sahip bir stereo mikroskop (300-8.000 lux) ve bir bilgisayar kullanarak özel OKR kayıt cihazını oluşturun (Şekil 1A).
   1. Mikroskobuğa, bitişik bir monitöre canlı yayın sağlayacak ve görüntü yakalama ve kaydetmeye izin verecek bir kamera takın.
   2. Çeşitli hız ve yön seçimlerini barındıracak bir bilgisayara bağlı bir mikrodenetleyici kullanarak dönen tamburu kontrol edin.
2. Balıkları 2-3 dakika boyunca% 0.016 tricaine içinde uyuşturun ve ardından balığı, gözleri ve solungaçları kenardan asılı olacak şekilde küçük bir platforma yerleştirin.
3. Balığın vücudunun üzerine ince bir sünger/havlu yerleştirin ve balığın hareketsiz kalması için balığın üzerine şekillendirilmiş 2-3 parça köpük iğneleyin. Balığın kuyruğunun hareketinin sınırlandırılmasının, balığa zarar vermeden hareketsizleştirme için çok önemli bir husus olduğu bulundu ve en iyi şekilde düz bir köpük parçası kullanılarak elde edildi. (Şekil 1B)
4. Balıkları, OKR kayıt cihazının dönen tamburunun içine sığan silindirik su dolu bir tankın içine yerleştirin. Balıkları dik olarak konumlandırmak için platformda mıknatıslar kullanın, gözler tamburun kenarından yaklaşık 7,3 cm uzakta olacak şekilde. Balıklar anesteziden birkaç dakika içinde canlanmalıdır - normal solunum devam eder ve rastgele göz hareketleri gözlenmelidir.
5. Dönen tamburun içine derece başına 0,07 devirlik (cpd) bir taban ızgarası yerleştirin ve döndürmeye ve video çekmeye başlamak için bilgisayar kontrollerini devreye sokun (bu kağıt için 12 rpm'lik bir hız kullanıldı, ancak 8-16 rpm'lik hızlar benzer sonuçlar vermelidir).
6. Taban ızgarası tarafından bir ilk OKR ortaya çıktığında, dönüşü kısa bir süre duraklatın ve ızgarayı daha küçük bir ızgara (daha yüksek uzamsal frekans) ile değiştirin.
7. Bir OKR artık ortaya çıkamayana kadar bu işlemi tekrarlayın. Değiştirilmiş bir merdiven yaklaşımını takiben OKR'ye neden olan en küçük ızgara ile tekrar test edin ve ardından OKR kaybını doğrulamak için bir yanıt ortaya çıkaramayan ızgarayı kullanarak tekrarlayın. Bu işlem, son ızgaranın ilk yok olma olayına göre değişmesi durumunda, tespit edilebilir en küçük ızgaraya gerçek bir yanıtı doğrulamak için tekrarlanabilir.
8. Karşı göze bitişik şeritlerin üzerine siyah plastik bir tıkayıcı yerleştirerek monoküler keskinlik ölçümleri elde edin. Yukarıdaki prosedürü tekrarlayın (adım 1.6-1.7).
9. Oklüderi yeniden konumlandırarak ve 1.6-1.7 adımlarını tekrar ederek karşı gözün keskinliğini elde edin.
10. Aşağıdaki adımlarda doğru keskinlik ölçümlerinin hesaplanabilmesi için akvaryumun altındaki referans ölçüm şeridini kullanarak test prosedürü sırasında her bir gözün şeritlerden olan mesafesine dikkat edin.

2. Görme Keskinliğinin Hesaplanması

1. cpd'yi hesaplayarak görme keskinliğini elde edin: burada a, lensin merkezinden ızgaraya olan mesafedir ve h, OKR'nin gözlemlendiği en küçük ızgaranın bir döngüsünün uzunluğudur (Şekil 1C).
2. Kombine görme keskinliği ölçümleri için, hem sol hem de sağ gözden alınan ortalama a değeri kullanılır.

Sonuçlar

Şekil 1. OKR kaydı. A) OKR cihazı, 14,5 cm çapında döner tambur ve ışık şiddeti ayarları ayarlanabilir (300-8.000 lux) mikroskoptan oluşur. Bir kamera, bitişik bir monitörde canlı yayın sağlar. Dönen tambur, hem saat yönünde hem de saat yönünün tersine çeşitli hız ayarlarına sahiptir ve gerektiğinde değiştirilebilir uzamsal frekans ızgaraları takılır ve çıkarılır. B) Balıklar sabitlenir v...

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
Süper Düşük Işık Siyah Beyaz Video Güvenlik Kamerası	Süper Devreler	PC164CEX-2	Düşük ışıkta herhangi bir kamera kullanılabilir
Arduino Duemilanove mikrodenetleyici	Adafruit Endüstrileri		Arduino Uno, hız kontrol yazılımı ile de uyumludur.
Trikain Metansülfonat	VWR (VWR)	101107-950