Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
3.5K görüntülenme
⸱
30 Nisan 2023
Kaynak: Hyde D.R., et al. Morpholinos'un Yenileyici Yetişkin Zebra Balığı Kuyruk Yüzgecine İn vivo Elektroporasyonu. J. Vis. Uzm. (2012)
Protokol, zebra balığında gen ekspresyonunun kuyrukta morfolino enjeksiyonu ile hedefli olarak yok edilmesini açıklar.
1. Morfolino Enjeksiyonu
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Şekil 1. A. Agarozdan yapılmış ve morfolino mikroenjeksiyonu sırasında balığı tutmak için küçük bir kuyu içeren enjeksiyon plakasının şeması.
Şekil 2. Morfolino mikroenjeksiyonunun şeması. A. Balığı, balığın başı kuyudan kesilen çentiğe gelecek şekilde tabağa yerleştirin, bu da.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Morfolino Çiçeği | Gen Araçları, LLC | Morpholino, ilgilendiğiniz proteine göre özel olarak tasarlanmalıdır | |
| Mikro enjeksiyon pompası | Dünya Hassas Aletler A.Ş. | PV830 | Pnömatik PicoPump Birçok farklı mikroenjeksiyon sistemi kullanılabilir |
| Mikro manipülatör | Dünya Hassas Aletler A.Ş. | MMJR (İngilizce) | Sağ elini kullanan (sol elini kullananlar için MMJL) |
| Mikro enjeksiyon iğneleri, 1,0 mm dış çap | Dünya Hassas Aletler A.Ş. | 1B100F-4 | Bunlar bir iğneye çekilmiş borosilikat cam kılcal damarlardır |
| İğne tutucu | Dünya Hassas Aletler A.Ş. | 5430-TÜMÜ | Pico Nozul Kiti; 1.0 mm pipet contasını taktığınızdan emin olun |
| İğne çektirme | Sutter Enstrüman A.Ş. | P-97 | Diğer mikropipet/iğne çektirmeleri de çalışmalıdır |
| mikroskop | Leica, Nikon, Zeiss | Sayı üreticiye göre değişir | 20X optikli herhangi bir stereomikroskop ve mikromanipülatörlerle çalışma yeteneği |
| 2-Fenoksietanol | Sigma-Aldrich | 77861-1L | Anestezi; işlem için balık sistemi suyunda 1:1000, ötenazi için 1:500 oranında seyreltin |
