Çiftleşme ve yumurta evreleme: embriyo oluşturmak ve bunları gelişim aşamasına göre sıralamak için bir yöntem

Özet

Kaynak: Hostelley T.L., et al. Zebra Balığından RNASeq Tabanlı Gen İfade Verilerinin Numune Hazırlama ve Analizi. J. Vis. Uzm. (2017)

Makale, doğal çiftleşme ve gelişim aşamalarını sıralama yoluyla zebra balığı embriyoları oluşturmak için bir protokolü açıklamaktadır. Protokol, transgenik balıklar kullanılarak pankreas β hücrelerinin analizi için daha fazla kullanılır.

Protokol

1. Doğal çiftleşme yoluyla embriyo oluşturma

1. Kültür embriyoları 3 aylık, üreme olgunluğu.
2. Embriyo toplamadan önceki akşam yetişkin erkek ve dişi balıkları istenen suştan bölünmüş çiftleşme tanklarına ayırın ve her tanka 2 erkek ve 3 dişi ekleyin.
   NOT: Transgenik insülin2a:mCherry floresan raportör suşunun kullanılması, pankreas β hücrelerinin analizine izin verdi.
3. Balıkları taze sistem su ile çiftleşme tankına aktarın ve ertesi sabah ışıklar yandıktan hemen sonra bölücüyü çıkarın.
4. Alt tankta embriyolar gözlenene kadar balığın doğal olarak çiftleşmesine izin verin.....

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
ins2a:mKiraz	ZIRC (Türkçe)	ZL1483
Çiftleşme tankları 1.0L Geçiş Tankı Seti	Su ürünleri yetiştiriciliği	ZHCT100
Diseksiyon Mikroskobu	Zeiss

Serisi