Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Adenokarsinom Aşılaması: Kanser Hücrelerini Murin Akciğerlerine İmplante Etme Yöntemi

2.9K görüntülenme

⸱

30 Nisan 2023

Bu makalede

Özet

Kaynak: Stevens, L.E. ve diğerleri, Farelerin Hava Yollarının Bleomisin ile Ön Koşullandırılması, Ortotopik Akciğer Kanseri Hücre Aşılamasının Etkinliğini Artırır. J. Vis. Uzm. (2018).

Bu videoda, hava yollarını fibrozise neden olan ajan-bleomisin ile önceden koşullandırarak murin akciğerlerinde akciğer adenokarsinomu hücrelerini aşılamak için bir yöntem açıklanmaktadır. Bu yöntem, akciğer kanseri hücrelerinin murin akciğerlerine ortotopik aşılanmasını önemli ölçüde artırır

Protokol

Hayvanlarla ilgili tüm prosedürler yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. Bleomisin Tedavisi

  1. Tümör hücresi engraftasyonundan 14 gün önce farelere intratrakeal olarak bleomisin enjekte etmeyi planlayın.
  2. Enjeksiyondan 2 saat önce bleomisin stoğunu buz üzerinde çözdürün.
  3. Çözüldükten sonra, bleomisini istenen çalışma konsantrasyonuna (0.02 U / 50 μL veya 0.005 U / 50 μL) seyreltin ve buz üzerinde tutun.
    not: Bleomisin konsantrasyonu, deneyler için kullanılan fare suşuna bağlıdır (Tablo 1). Optimal dozu be....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Tablo 1: Test edilen fare suşları için önerilen bleomisin dozlarının listesi.

Fare Zorlanması>Hücre Satırı>Enjekte edilen hücre sayısı>% aşılamap değeri
a.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Herhangi bir çıkar çatışması beyan edilmedi.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Kemirgen Entübasyon standıBraintree BilimselRIS-100 Serisiİntratrakeal enjeksiyon için önerilen stand
BleomisinSigmaB5507-15BMDİKKAT Sağlık tehlikesi GHS08
Exel Kateter 24G balıkçı1484121İğneyi çıkarın. İntratrakeal enjeksiyon için
Ketamin (Ketaset inl 100 mg / mL, C3N 10 mL)Uşak Schein56344Fareleri uyuşturmak için
KsilazinUşak Schein33198Fareleri uyuşturmak için
Şırınga 1mlBD / Balıkçı 14-823-434İntraperitoneal enjeksiyonlar için
Puralube Veteriner Oftalmik MerhemBUTLER HAYVAN SAĞLIĞI ŞİRKETİ LLC8897Anestezi altındayken göz kuruluğunu önlemek için
MI-150 AYDINLATICI 150W MI-150DOLAN-JENNER ENDÜSTRILERIMI-150 / EEG2823MSoluk borusunu aydınlatmak ve görselleştirmek için
Graefe Forseps, 2.75 (7 cm) uzunluğunda serratRoboz BelediyesiRS-5111İntratrakeal enjeksiyon için
Şişe T/C 75cm sq eğimli boyun, mavi şapkaBalıkçı / Corning353135
Fosfat Tamponlu TuzluYaşam Teknolojileri14190-144
% 0.25 Tripsin-EDTA Yaşam Teknolojileri25200-056
Pipet-Lite Pipet, unv. SL-200XLS+METTLER-TOLEDO ULUSLARARASI17014411
Kontes Otomatik Hücre SayacıYaşam TeknolojileriAMQAX1000
D-Luciferin tozuPerkin Elmer Sağlık Bilimleri A.Ş122799Lüminesan görüntüleme için. 15 mg / mL'lik bir çalışma konsantrasyonu için tozu PBS ile sulandırın. Işıktan Koruyun
IVIS Spektrumu Ksenojen BiyolüminesansPerkin Elmer Sağlık Bilimleri A.Ş124262In vivo biyolüminesans görüntüleme için
B6129SF1/J farelerJackson Laboratuvarları101043
NIH-H2030 hücreleriATCC (Uzay Servisi)CRL-5914
PC9 hücreleriNguyen, DX ve ark. Hücre, 2009; 138:51–62
Canlı görüntü yazılımıPerkin Elmer Sağlık Bilimleri A.Ş128113In vivo biyolüminesans analizi için
Serisi Su . . Serisi .

Daha fazla makale keşfet

Akciğer Kanseri HücreleriBleomisin Ön HazırlığıOrtotopik NakilTrakeal EnjeksiyonBiyolüminesans GörüntülemeTümör Yükü İzlemeKanser Hücre SüspansiyonuLüçiferin Görüntüleme