Method Article

HIV-1 V3 döngü Taç R2 Sıra immünolojik İlgili Dinamik Tersiyer Yapısal Özellikler Değerlendirilmesi Ab initio Katlanır

DOI:

10.3791/2118

September 15th, 2010

In This Article

Summary

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Taç bölgesi yüzeyinde HIV-1 zarf glikoprotein (gp120) farklı V3 döngü dizilerinin yapısal pozisyonları siliko katlama birçok durumda karakterize edilebilir bir state-of-the-art kullanarak döngü 10 ila 22 Ab initio Katlanır algoritması. Burada, HIV-1 R2 gerilme, şaşırtıcı fonksiyonel özellikleri ile benzersiz bir nötralizasyon hassas gerginlik V3 döngü bu bölgenin katlama ve değerlendirme göstermektedir.

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

HIV-1 antijenik çeşitliliğinin uzun aşı tasarımı için bir engel olmuştur ve bu değişkenliği, özellikle virüs yüzey zarf glikoprotein V3 döngü içinde telaffuz edilir. Biz daha önce V3 döngü taç rağmen, dinamik ve sıra değişken, HIV-1 virüs immünolojik ilgili bir β-saç tokası üçüncül yapısı nüfus boyunca kısıtlı olduğunu önerdi. Önemlisi, farklı V3 döngü taç dizileri binlerce kristalografisi veya NMR ile zor veya imkansız virüslerin çeşitlilik trendleri 3D yapısal karakterizasyonu, HIV-1 virüsleri vardır. Bizim daha önceki başarılı çalışmaları V3 taç 1, 2, katlama, ICM-Pro moleküler modelleme yazılım paketi (Molsoft LLC, La Jolla, CA) erişilebilir ab initio algoritması 3 kullanılan ve önerilen V3 döngü taç , özellikle 10 ila 22 pozisyonları, esneklik ve serbestçe çözüm katlanır kısıtsız bir peptid sanki büyük ölçüde davranmaya, yan gövde uzunluğu yeterince yararlanıyor. + 60,000 herhangi bir bireysel suşu V3 döngü sadece bu bölümü, hızlı ab initio katlama gibi dolaşan HIV-1 suşlarının bilgilendirici olabilir. Burada, R2 suşu V3 döngü eşsiz özellikleri yapısal olarak içgörü kazanmak için katlanmış. R2, hasta serumu ve monoklonal antikorlar, 4, 5 bu zorlanma nötralizasyon için bu hassasiyeti sorumlu olduğu düşünülen nadir bir V3 döngü sırası taşımaktadır. Zorlanma, CD4-bağımsız enfeksiyon aracılık ve nötralize edici antikorlar ortaya çıkarmak için geniş görünür. Biz katlama sonuçlarının değerlendirilmesi katlama gözlenen yapılar R2 gözlenen immünolojik faaliyetleri ile ilişkilendirmek için ne kadar bilgilendirici olabilir göstermektedir.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Metodoloji

  1. Protokol siliko kat isteyen V3 taç sırasını seçmek için ilk adım. R2 gerginlik için, bu parça için sıra KSIPMGPGRAFYT.
  2. Bilgisayarın sanal uzayda bu sıra ilgili peptid 3D atomik yapı inşa edilmelidir. Bunun için ICM komut:
    buildpep "KSIPMGPGRAFYT"
    ya da Dosya: Yeni: Peptid aşağı çekme menüsü altında seçilebilir
  3. Sonra arama adımları sayısı (arama süresi), simülasyon sıcaklığı, önyargı makul alanları, enerji açısından, farklı enerji hesaplama yöntemleri seçimi doğru arama değişken koltuk da dahil olmak üzere arama stratejisi parametreleri de dahil olmak üzere, prosedürün bazı parametreleri ayarlanır ve arama gibi bi....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ab initio katlama üçüncül yapısal özellikleri, bireysel amino asitler sırayla okuyan belirgin olmayabilir olan etkilerini ortaya koymaktadır. R2 V3 döngü taç önceden tanınmayan birçok yapısal özellikleri, katlama simülasyonu ile ortaya çıkar. Bu gözlenen yapısal tercihleri, yani R2 zorlanma, nötralizasyon ve hyperinfectivity 5 duyarlılık gözlenen fonksiyonel özellikleri ile ilişkili olabilir .

İlk olarak, pozisyonları 12-14 R2 V3 taç N-terminal yarı açık bir β iplikli eği.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Çıkar çatışması ilan etti.

Acknowledgements

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

DP2 OD004631 ve R01 AI084119 dahil olmak üzere, Bill ve Melinda Gates Vakfı (38.631) ve NIH hibe tarafından desteklenmiştir.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
ICM-ProMolsoft LLC

References

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Almond, D., Kimura, T., Kong, X., Zolla-Pazner, S. &, Cardozo, T. Dynamic characterization of the V3 loop crown. Antiviral Therapy. 12, 13-31 (2007).
  2. Almond, D., Kimura, T., Kong, X., Swetnam, J., Zolla-Pazner, S., Cardozo, T. Structural conservation....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

HIV 1 V3 LoopAb Initio FoldingICM Pro SoftwareBeta Hairpin StructureNeutralization SensitivityMolecular DynamicsPeptide FoldingStructural AnalysisR2 StrainImmunological Relevance

Related Articles