Yöntem makalesi

Jinekolojik Onkoloji Sentinel lenf nodu intraoperatif Algılama için Multispektral Gerçek zamanlı Floresans Görüntüleme

DOI:

10.3791/2225

⸱

20 Ekim 2010

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Surgery, Division of Surgical Oncology, University Medical Center Groningen, 2Helmholtz Zentrum, Technical University Munich, 3Department of Obstetrics and Gynaecology, University Medical Center Groningen

Bu makalede

Düzeltme bildirimi

Important: There has been an erratum issued for this article. View Erratum Notice

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Floresans görüntüleme, görüntü kılavuzluğunda cerrahi cerrahi onkoloji için umut verici bir yenilikçi bir yöntemidir. Bu video jinekolojik oncologicy görücüye olarak floresan görüntüleme ile sentinel lenf nodu tespiti için teknik prosedür açıklanmaktadır. Multispektral floresan kamera sistemi, floresan madde ile birlikte yeşil indosiyanin uygulanır.

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Hemen hemen bütün katı tümörlerde prognoz lenf nodu metastazı varlığı ya da yokluğuna bağlıdır. 1-3 Cerrahi tedavi en sık tümör tümör drenaj alanı tam bir lenfadenektomi ile birlikte radikal eksizyon birleştirir . Bununla birlikte, lenf nodlarının çıkarılması, enfeksiyon, yara ayrışması ve lenfödem nedeniyle artmış morbidite ile ilişkilidir. 4,5 alternatif olarak, sentinel lenf nodu (SLN) işlem tümörün ilk drenaj lenf nodu tespit etmek için onlarca yıl önce geliştirilmiştir lymphogenic yayılması durumunda 6, SLN etkilenen ilk lenf nodu (Şekil 1). Bu nedenle, SLN metastaz içermiyorsa, alt lenf düğümleri de tümörün metastaz ücretsiz ve kaldırılması gerekir. SLN prosedürü, meme kanseri ve melanom gibi birçok tümör tipleri için değil, aynı zamanda vulva ve serviks kanseri için tedavinin bir parçasıdır. SLN tespiti için 7 standart bir yöntem cerrahi öncesi radiocolloid bir gün peritümöral enjeksiyon yoluyla, intraoperatif ve renkli bir boya. Servikal ve vulvar kanser prosedürü dezavantajları birden fazla hasta için artan psikolojik sıkıntı önde gelen genital bölgede enjeksiyonlar, radyoaktif kolloid kullanımı.

Multispektral floresan görüntüleme intraoperatif radiocolloid enjeksiyon için gerek kalmadan uygulanabilir gelişmekte olan bir görüntüleme yöntemidir. Intraoperatif floresan görüntüleme için, iki bileşenden ihtiyaç vardır: floresan intraoperatif görüntüleme için ajan ve nicel bir optik sistem. Fluorofor olarak kullanılan indosiyanin yeşili (ICG) var. ICG, on yıllar boyunca, kalp fonksiyonu, serebral perfüzyon ve karaciğer perfüzyon değerlendirmek için kullanılır olmuştur. 8 Bu farmako biyolojik güvenli bir profil ile inert bir ilaçtır. Yaklaşık 750 nm'de heyecanlı zaman, bu, yakın-kızılötesi spektrumunda 800 nm civarında ışık yayar. Ismarlama multispektral floresan görüntüleme kamera sistemi kullanıldı. 9.

Bu video makalenin amacı, servikal ve vulvar kanseri olan hastalarda intraoperatif floresan görüntüleme kullanarak SLN tespiti göstermektir. Floresan görüntüleme radiocolloid ve mavi boya oluşan standart prosedür ile birlikte kullanılır. Gelecekte, intraoperatif floresan görüntüleme geçerli yöntem yerine ve aynı zamanda, meme kanseri ve melanom gibi diğer göstergeler kolayca devredilemez.

Protokol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. İntraoperatif Multispektral Floresan Kamera

  1. SurgOptix (SurgOptix Inc, Redwood Shores, CA, ABD) ile işbirliği içinde yakın Biyolojik ve Tıbbi Görüntüleme Enstitüsü (IBMI, Teknik Üniversitesi / Helmholtz Zentrum, Münih, Almanya) geliştirilen bir ölçüye göre kamera sistemi geliştirilmiştir. Intraoperatif multispektral floresan kamera sistemi kurulumu, Şekil 2'de gösterilmiştir.
  2. Işık optik bir sistem geçer ve görünür ışık emisyonu (floresans) dalga boyu bandındaki ışık ve dalgaboyu bandında ışık ayrılır. Bu demetleri CCD kameralar (CCD) (Şekil 2) ile tespit edilir. Çoklu-spektral Tüm kameralardan gelen sinyalleri eserler için doğru ve gerçek kantitatif florokrom biyo-dağıtım verim için işlenir. Renk ve floresan sinyalleri harici monitör ayrı görüntü olarak görüntülenen veya bir görüntü eklenmiş olabilir.
  3. Kameranın uyarma ve emisyon filtreleri sırasıyla 750 nm ve 800 ± 20 nm toplamak için ölçüm burada ayarlanır.

2. Optik Kontrast Ajan Hazırlık

  1. Floresan kontrast madde yeşil (ICG, Pulsion AG, Münih, Almanya) steril koşullar altında hazırlanan indosiyanin. 0.5 mg / ml konsantrasyon kullanılır. Ikincisi agrega ICG neden olarak, steril distile su ve sodyum klorür (NaCl) kullanmak önemlidir.
  2. Hazırlanmasından sonra, çözüm floresan beyazlatma tarafından hızlı bozulmasını önlemek için, karanlık, serin bir yerde saklanmalıdır. Not: ışıktan korumalı ICG bu noktadan ileriye doğru tutun.

3. İntraoperatif Görüntüleme - Kurulum ve ICG enjeksiyonu

  1. Kamera yerleştirilmiş ve standart cerrahi prosedür ile etkileşimi en aza indirmek için cerrahi öncesi ameliyathanede yılında başlatılan, ve yüksek çözünürlüklü ekranlar (Şekil 2B) bağlı.
  2. Kamera (Carl Zeiss Vision BV, Sliedrecht, Hollanda, OPMI Örtüsü REF 306.071) steril VEYA giyim araştırmacı tarafından standart, steril örtüler kaplıdır.
  3. Not: renkli dezenfekte maddeleri genellikle autofluorescent ve görüntüleme prosedürü ile etkileşebilir, sadece açık dezenfekte maddeleri kullanmaya özen. Ayrıca, steril örtüler ve cerrahi belirteçlerinin autofluorescent olabilir. Bu cerrahi öncesi otofloresans OR ve işletme alanında kullanılan tüm malzemeleri test etmek için tavsiye edilir.
  4. Floresan kontrast madde green (ICG), steril koşullar altında hazırlanan indosiyanin. 0.5 mg / ml konsantrasyon kullanılır. Ikincisi agrega ICG neden olacak gibi steril distile su ve NaCl, kullanmak önemlidir. Hazırlanmasından sonra, çözüm floresan hızlı bozulmasını önlemek için bir karanlık, serin bir yerde saklanmalıdır. Not: ICG hazırladıktan sonra, eldiven değiştirmek için tavsiye edilir ICG, dökmek, hatta küçük bir miktar olarak görüntü kalitesini etkileyebilir.
  5. Görüntüleme prosedürü karın açıldıktan sonra başlar. Ilgi alanı maruz kaldığında, kamera işletim alana manevra. Zoom ve odaklama steril koşullar altında ayarlanır. Ameliyathanede Işıklar floresan sinyal daha iyi algılanması için kapatılır.
  6. 0.5 mg / ml ICG 1.0 mL 1,0 mL standart mavi boya (Patent mavi / bleu patente, Guerbet, Fransa) bir şırınga ile karıştırılır. Cerrah ajan dökülen engelleyen primer tümörün etrafında dört kadran kontrast madde enjekte eder. Not: cerrahi eldiven ICG dökülme durumunda, eldiven değiştirmek için gerekli. Hareketsiz görüntüler veya gerçek-zamanlı video lenf akışını ve floresan sentinel lenf nodu (Şekil 3) görünümünü elde edilir. Tüm resimler ve videolar direkt olarak bilgisayara kaydedilir.
  7. Apart floresan SLN de ya bir gözle gama prob veya mavi renk, ya da her ikisi kullanılarak, standart protokole göre algılanır. Radyoaktif tracer genellikle sonra lymphoscintigram radyoaktif SLN tespiti için yapılır, ameliyattan bir gün önce uygulanır. Bu standart prosedür parçasıdır ve floresan görüntüleme protokolünde yeri yoktur.
  8. SLN Gerçek-zamanlı eksizyonu, lenf düğümleri floresan ve mavi renk tarafından yönlendirilir. Kameranın gerçek zamanlı özelliği, herhangi bir kalıntı floresan veya floresan düğümleri beklenmedik lokalizasyonu için tespit etmek için yardımcı olur.
  9. SLN eksizyonu sonra, ex vivo görüntüleri floresan sinyal varlığı için eksize tüm lenf düğümleri elde edilir. (Şekil 4), fotoğraf çekerken yüksek çözünürlük için maruz kalma süresi uzatılabilir.
  10. Lenf nodlarının histopatolojik inceleme sentinel lenf nodu, tümör hücrelerinin varlığı ya da yokluğu ortaya koymaktadır.

4. Representative Sonuçlar

Floresan lenf düğümleri yüksek bir sinyal-zemin oranı tespit edilebilir. Ayrıca, Lenf damarları yoluyla ICG akışı, gerçek zamanlı lenf nodu eşleşmesine olanak olarak izlenebilir. Sonuçlar muhtemelen algılama ulaşmak için farklı aydınlatma işlemleri gerektiren, düğümün derinliği artan etkilenebilir. Spesifik tümör hedefli floresan ajanlar Geleceği uygulama, bu teknoloji kullanarak kanser hücrelerinin ile pozitif SLN intraoperatif algılama sağlayabilir.

figure-protocol-1
Şekil 1. Sentinel lenf nodu (SLN) teorisi. SLN tümör ilk drenaj lenf nodu (ler).

figure-protocol-2
Şekil 2. Multispektral floresan kamera sistemi şematik resim (A). Ameliyathane kamera sistemi temel kurulum (B).

figure-protocol-3
Şekil 3. Vulva kanserinde lenf nodu Çokspektrumlu floresan görüntüleme in vivo bir lenf nodu (A) Renkli görüntü. Floresan in vivo aynı lenf nodu, (B) görüntüsü. Pseudocolor floresan görüntü, renkli görüntü (C) üzerine bindirilmiş.

figure-protocol-4
Şekil 4. Çokspektrumlu floresan görüntüleme serviks kanseri lenf nodu ex vivo bir lenf nodu ex vivo (A) Renkli görüntü. Aynı lenf nodu, ex vivo (B) Floresans görüntüsü. Pseudocolor floresan görüntü, renkli görüntü (C) üzerine bindirilmiş.

Tartışma

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu video jinekolojik onkoloji sentinel lenf nodu (SLN) intraoperatif tespiti için multispektral intraoperatif floresan görüntüleme teknolojisi uygulama göstermektedir. Metodoloji geleneksel SLN prosedürü üzerinde bazı avantajları vardır. Enjeksiyonu özellikle jinekolojik kanserlerde, cerrahi prosedürü yerine, daha fazla hasta dostu cerrahi öncesi bir gün, çok hasta anestezi ile kendini sırasında yer alıyor. Ayrıca, intraoperatif görüntüleme Geiger-vezne aracılığı ile dolaylı olarak lenf akışını ve drenaj desen SLN yerine, doğrudan görsel geribildirim ile cerrah sağlar. Serviks kanseri, lenf düğümleri pelvis derin nerede, bu algılama geliştirmek yardımcı olabilir.

Bununla birlikte, en büyük önemi hedef görüntüleme doğru adım yaklaşımı yatıyor. Hedeflenen floresan kontrast ajanlar, özellikle tümör hücrelerinin yönelik tümör-spesifik antikorların veya substratları ile erimiş olabilir. Bu şekilde, intraoperatif floresan görüntüleme radikal onkolojik cerrahi mevcut uygulamayı değiştirmek için büyük bir potansiyele sahiptir.

Açıklamalar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
VN ve GMvD prosedürü önce SurgOptix Inc bilimsel kurulu üyesi, araştırma protokolü, yerel Araştırma İnceleme Kurulu (KİK) ve hasta elde edilir bilgilendirilmiş onam tarafından onaylanmıştır.

Teşekkürler

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

OR personelin eğitim ve planlama için Bayan Ina Wesselman'ın borçlu.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
İndosiyanin Yeşili (ICG)Pulsion Medical Systems AG, Münih, AlmanyaD-81829Damıtılmış suda bir ICG çözeltisi kullanılır ve NaCl %0.9'da kullanılmaz.
Patent mavisi / Bleu patentiéGuerbet12322784
Enjeksiyon için steril suB. Braun Medical
Multispektral floresan kamera sistemi Biyolojik ve Tıbbi Görüntüleme Enstitüsü (IBMI), Teknik Üniversitesi, Münih, Almanya ve SurgOptix Inc, ABDprototipi

Kaynaklar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Tinga, D. J., Bouma, J., Aalders, J. G. Patients with squamous cell versus adeno(squamous) carcinoma of the cervix, what factors determine the prognosis. Int J Gynecol Cancer. 2 (2), 83-91 (1992).
  2. McMahon, C. J., Rofsky, N. M., Pedrosa, I. Lymphatic metastases from pelvic tumors: anatomic classification, characterization, and staging. Radiology. 254 (1), 31-46 (2010).
  3. Zivanovic, O., Khoury-Collado, F., Abu-Rustum, N. R., Gemignani, M. L. Sentinel lymph node biopsy in the management of vulvar carcinoma, cervical cancer, and endometrial cancer. Oncologist. 14 (7), 695-705 (2009).
  4. Fuller, J., Guderian, D., Kohler, C., Schneider, A., Wendt, T. G. Lymph edema of the lower extremities after lymphadenectomy and radiotherapy for cervical cancer. Strahlenther Onkol. 184 (4), 206-211 (2008).
  5. Ayhan, A., Celik, H., Dursun, P. Lymphatic mapping and sentinel node biopsy in gynecological cancers: a critical review of the literature. World J Surg Oncol. 6, 53-53 (2008).
  6. Tanis, P. J., Nieweg, O. E., Valdes Olmos, R. A., Rutgers, E. J., Kroon, B. B. History of sentinel node and validation of the technique. Breast Cancer Res. 3 (2), 109-112 (2001).
  7. Ghobashy, A. E. E. l, Saidi, S. A. Sentinel lymph node sampling in gynaecological cancers: techniques and clinical applications. Eur J Surg Oncol. 35 (7), 675-685 (2009).
  8. Alford, R., Simpson, H. M., Duberman, J., Hill, G. C., Ogawa, M., Regino, C. Toxicity of organic fluorophores used in molecular imaging: literature review. Mol Imaging. 8 (6), 341-354 (2009).
  9. Themelis, G., Yoo, J. S., Soh, K. S., Schulz, R., Ntziachristos, V. Real-time intraoperative fluorescence imaging system using light-absorption correction. J Biomed Opt. 14 (6), 064012-064012 (2009).

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Düzeltme

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Formal Correction: Erratum: Multispectral Real-time Fluorescence Imaging for Intraoperative Detection of the Sentinel Lymph Node in Gynecologic Oncology
Posted by JoVE Editors on 12/20/2010. Citeable Link.

A correction was made to Live Imaging of Dense-core Vesicles in Primary Cultured Hippocampal Neurons. There was an error with an author's name. The author name was corrected to include a first initial as follows:

K. Tim Buddingh

instead of:

Tim Buddingh

Etiketler

Multispektral Floresan G r nt lemendosiyanin Ye iliFloresan G r nt leme KamerasGer ek Zamanl Floresan zlemeLenf Nodu EksizyonuFloresan Ajan EnjeksiyonuYak n K z l tesi Floresan

İlgili makaleler