İndüksiyon ve Kronik Relaps Deneysel Otoimmün Encephalomyelitis Klinik Puanlama

Özet

DA sıçanlarda kronik relapsing deneysel otoimmün ensefalomyelit: Bu video, multipl skleroz bir hayvan modeli indüksiyonu ve klinik skorlama göstermektedir. Tüm sıçan omurilik ve tam Freund adjuvan içeren bir emülsiyon immunizing fareler tarafından uyarılan hastalık, insan hastalığına benzer klinik belirtiler sunar.

Özet

Multipl skleroz (MS), genç erişkinlerde sık etkileyen santral sinir sistemi (MSS) kronik inflamatuvar bir hastalıktır. Bu, beyin ve omurilikte yaygın alanlarda demiyelinizasyon ve glial korkutuyorsun tarafından karakterize edilir. Bu lezyonlar, sinir iletim değiştirebilir ve CNS (örneğin paraparezi, felç, körlük, inkontinans) demyelinated plakların yerini değişir devre dışı bırakma nörolojik defisit neden.

Deneysel otoimmun ensefalomiyelit (EAE), MS için bir model. EAE ilk tavşan omurilik yetişen virüsler kullanarak, insanlarda kuduz aşılama sırasında yanlışlıkla indüklenen oldu. Inaktive virüs omurilik enjekte edilen artıklar, merkezi sinir sistemi hastalığı kaynaklı. Bu gözlemlerin ardından, EAE ilk modeli nehirleri Homojenat ve 1935 yılında Schwenther MSS ile aşılanan insan olmayan primatlar olarak tarif edilmişti. EAE bu yana türlerin çeşitli oluşturulan ve türlerin / zorlanma ve antijen kullanılan immunizing bağlı olarak farklı ders takip edebilirsiniz. Aynı antijen kobay kronik bir hastalıktır neden olur Örneğin, adjuvan ile emülsiyon miyelin temel protein Lewis sıçanlarda immunizing, EAE akut modeli neden olur.

Burada açıklanan EAE modeli tam Freund adjuvan emülsiyon DA DA sıçan omurilik karşı sıçan immunizing tarafından indüklenir. Sıçanlar-bağışıklama sonrası 7-14 gün içinde artan bir flask paralizi gelişir. Klinik belirtiler birkaç hafta içinde bir relapsing-remitting seyir takip etmektedir. Patoloji, CNS ve demiyelinizasyon plaklar büyük immün infiltratlar gösterir. Videonun sonunda EAE ile hayvanların bakımı için özel dikkat edilmesi gereken noktalar açıklanmıştır.

Protokol

Kronik-relapsing EAE indüksiyonu ve izleme

Emülsiyon takviye tam Freund adjuvan eklendi sulu çözelti antijeni 1:1 karışımıdır. Bu antijen adjuvan ve başka bir yol boyunca eklemek için çok önemlidir!

Yapma ve bir emülsiyon enjekte atık bir sürü. 1.5 veya 2 kez her zaman için ihtiyaç duyduğunuz herşeyi daha fazla hazırlamak.

Otoklavlanmış harç, havaneli, cam şırınga, ve köprüler kullanın. Tüm plastik steril olmalıdır. Düzenli bir laboratuvar tezgahı üzerinde hazırlık yapılabilir.

1. Takviye adjuvan hazırlanması

Tartışma

Bu protokol için birkaç önemli hususlar vardır.

DA sıçanlarda Genetiği satın hangi damızlık bağlı olarak biraz farklı olacaktır. Bu farklılıklar, indüksiyon EAE sıçan yatkınlık artabilir veya azalabilir. Sıçanlarda EAE daha duyarlı iseniz olmayan takviye tam Freund adjuvan hatta eksik Freund adjuvan kullanarak bağışıklama gücü azaltmak istiyorsanız. Ayrıca emülsiyon hazırlarken önce enjekte emülsiyon miktarını azaltarak ya da, tuzlu su ile omurilik Homojenat seyreltilmesi düşünebilirsiniz. Sıçan, emülsiyon, konut tesisin temizliği k.......

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
Komple Freund’s Adjuvanı	Reaktif	Fisher Scientific	DF 311-360-5	Difco tarafından üretilmiştir
Mycobacterium tuberculosis H37Ra	Reaktif	Fisher Scientific	DF3114-33-8	Difco tarafından üretilmiştir
DA sıçan	Hayvan	Harlan Laboratories		Dişiler, 7-9 haftalık.
Cam şırıngalar - 5 ml	Araç	Fisher Scientific	14-823-10 B
Metal iğne ucu - 18G	Araç	Fisher Scientific	14-825-17L
Luer Lok plastik şırıngalar - 3 ml	Araç	BD Biosciences	309585
İğneler - 20G 1 1/2	Araç	Fisher Scientific	14-826-5C