Fare dentat gyrusunda nöronal aktivasyonu ve nörojenezi geliştirmek için yüksek frekanslı stimülasyon

Özet

Kaynak: Zhao, Z. et al. Fare dentat gyrus'un yüksek frekanslı stimülasyon ile aktivasyonu için invaziv bir yöntem. J. Vis. Uzm. (2018)

Bu video, bir fare hipokampal dentat girusuna yüksek frekanslı derin beyin stimülasyonu sağlama protokolünü göstermekte ve nöronal aktivasyon, sinaptik plastisite ve nörojenez üzerindeki etkilerini detaylandırmaktadır.

Protokol

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. Yüksek Frekanslı Stimülasyon Dağıtımı
   1. Fare beynine implante edilen elektrotu kablolar aracılığıyla programlanabilir bir stimülatöre bağlayın. Yazılım arayüzünü Şekil 1'de gösterildiği gibi kurun. Yüksek frekanslı stimülasyon (HFS) parametrelerini 400 Hz'de 6 darbeli 6 diziden oluşan 6 seri olarak ayarlayın (Şekil 2B, trenler arasında 100 ms, seriler arasında 20 s). Stimülasyon yoğunluğunu 200 μA olarak ayarlayın.
   2. Ayarlandığı gibi istenen süre boyunca bir HFS teslim edin. Stimülasyonu günde 2 kez sabah 8:00 ve akşam 8:00'de verin.
   3. Kontrol grubu için, farelere elektrotlar implante edin ve stimülasyon yapmayın.
   4. C-fos boyama için, deney farelerini akut olarak uyarın (günde 2 kez). Bromodeoksiüridin (BrdU) etiketlemesi için, deney farelerini bir akut stimülasyon grubuna (günde 2 kez uygulanır) ve bir kronik stimülasyon grubuna (5 günde 10 kez, günde 2 kez uygulanır) bölün. Stimülasyon sırasında farenin uyanık olduğundan emin olun. Kabloların bükülmediğinden emin olmayı unutmayın.
      NOT: İşlemin son gününde, akut stimülasyon grubundaki fareler aynı anda uyarıldı.
   5. Stimülasyon tamamlandığında, elektrot pimini elektrot tutucusundan ve kayıt sisteminin konektöründen dikkatlice ayırın.

Sonuçlar

Figure1. Multistimülatörün arayüzü ve parametreleri. Stimülatör bir dijital-analog dönüştürücüye bağlandı ve özel yazılım tarafından etkinleştirildi. Yüksek frekanslı stimülasyonun (HFS) uyaran tipi monofazikti.

Malzemeler