Işık kaynaklı işitsel stimülasyon için fare dorsal koklear çekirdeğine virüs aracılı gen transferi

Özet

Kaynak: Kozin, E. D., et.al. İşitsel yolun optogenetik stimülasyonu için murin dorsal koklear çekirdeğinin doğrudan görselleştirilmesi. J. Vis. Uzm. (2015)

Bu video, ışığa bağlı işitsel stimülasyonu mümkün kılmak için fare dorsal koklear çekirdeğine (DCN) virüs aracılı gen transferini göstermektedir. Işığa duyarlı bir iyon kanalı olan opsin kodlayan bir viral vektör, doğrudan erişim için bir kraniotomi ve serebellar aspirasyonu takiben DCN'ye enjekte edilir. İfade edilen opsinler, nöronların ışıkla aktive edilmesine izin vererek, optogenetik kullanarak işitsel yol tepkilerini incelemek için bir model sağlar.

Protokol

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. Serebellar Aspirasyon

1. 5 Fransız aspirasyonu kullanarak, DCN görsel olana kadar DCN'nin üzerindeki sol serebellumun en lateral kısmını aspire edin (Şekil 1, Sağ Panel). Sol beyinciğin yaklaşık 1/4 ila 1/3'ünü çıkarın. DCN'nin bitişiğindeki ana dönüm noktası, üstün yarım daire biçimli kanalın ampullasıdır.
   NOT: Beyincik aspirasyonu, protokolün en önemli adımıdır. Beyinciğin yönlendirilmiş aspirasyonu, kanamaya neden olacağ....

Sonuçlar

Şekil 1: Kısmi serebellar aspirasyon, dorsal koklear çekirdeğe erişimi gösterir. Sol Panel: Fare tutucuya yerleştirildikten sonra, kafatasının arka yüzü boyunca cilt ve yumuşak dokudan boynun yumuşak dokusuna dikey olarak bir kesi yapılır. Deri .......

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
Stereotaksik tutucu	Stoelting	51500
5 Fransız emme	Simetri Cerrahi	2777914
Diş Noktaları	Henry Schein	100-8170
Bone rongeur	İnce Cerrahi Aletler	16020-14
10 μl Hamilton şırınga	Hamilton	7633-01
34 ölçer, iğne	Hamilton	207434
Rongeurs	İnce Cerrahi Aletler	16021-14