Nöral Hücre Süspansiyonunun Travmatik Beyin Hasarı Olan Bir Fareye Stereotaksik Nakli

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kaynak: Furmanski, O., et al. İnsan Kaynaklı Pluripotent Kök Hücre Kaynaklı Nöral Hücrelerin Terapötik Nakli ile Fare Beyin Hasarının Kontrollü Kortikal Etki Modeli. J. Vis. Uzm. (2019)

Bu videoda, insan kaynaklı pluripotent kök hücre türevi sinir hücreleri, travmatik beyin hasarının bir fare modelinde derin korteksin gri madde-beyaz madde sınırına stereotaksik olarak enjekte edilmektedir. Nakledilen hücreler dokuya entegre olur ve yaralı beyinde fonksiyonel iyileşmeyi ve devre onarımını destekler.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. Hücre süspansiyonunun stereotaksik transplantasyonu

: Kraniektomiden yaklaşık 24 saat sonra hücre nakli işlemine başlayın.
Hücre nakli ekipmanını ve cerrahi malzemeleri hazırlayın
1. Yara irrigasyonu için 1 mL kayar uçlu şırıngayı steril tuzlu su ile doldurun. Sulamayı kontrol etmek için şırıngaya 25 G'lik bir iğne takın.
2. İmmünosupresyon için 1 mL kayar uçlu şırıngayı CsA (Siklosporin A) çözeltisi ile doldurun. CsA şırıngasına 25 G veya daha büyük bir iğne takın. CsA şırın....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
Name	Company	Catalog Number	Comments
1 ml şırınga	Becton Dickinson (BD)	309659
1.7 ml flip top test tüpleri	Denville	C2170
10 mikrolitre şırınga	Hamilton	7635-01
25G Hassas Kayma şırınga iğneleri	Becton Dickinson (BD)	305122
%70 Etanol			Tercih edilen ürün; bölgeye göre değişir
Asetaminofen oral süspansiyon	Tylenol (Çocuk)		Suda 1 mg / ml'ye seyreltin
Anestezik buharlaştırıcı	Vetland	0521-11-22
Hayvan taşıma bezi
Betadine	Purdue mağazasından	NDC-67618-151-32
Basınçlı oksijen			Tercih edilen ürün; bölgeye göre değişir
Siklosporin A	Sigma-Aldrich	30024-100mg
Dimetil sülfoksit (DMSO),	Sigma-Aldrich	D8418-500ml
DMEM	Invitrogen (ThermoFisher)	A14430-01
Elektrik bandı	3M Corporation		Mağazadan satın alın
İnce cımbız	Güzel Bilim Araçları	11254-20
Forseps	Güzel Bilim Araçları	91106-12
Cam kılcal pipetler, 1 mm Dış Çap, 0,58 mm İç Çap	Dünya Hassas Aletler	1B100F-3
Yüksek Hızlı Döner Mikromotor Kiti	Foredom Electric Co.	K.1070 - K.107018
5 Hücre Noktalı İdeal Mikro Matkap Çapak Seti	Scientific	60-1000
Leica Biosystems	için Darbe Bir Stereotaksik Çarpma Tertibatı	39463920
İzofluran	Baxter	NDC-10019-360-60
Lab tezgah zamanlayıcıları	Fisher Scientific	14-649-17
Mikropipet çektirme	MicroData Instruments, Inc.	PMP-102	Herhangi bir çektirme yeterli olacaktır
Mikroskop kapak kızakları	Fisherbrand	12-545-E
Mikroskop slayt montaj ortamı			Tercih edilen ürün
Ayna			Mağazadan satın alın
İğne tutucu kanama durdurucu	Güzel Bilim Araçları	12002-12
Oftalmik merhem	Falcon İlaç	NDC-61314-631-36
Oftalmik yaylı makas	Güzel Bilim Araçları	15018-10
Plastik kutu			Mağazadan satın alın
Plastik silindir			Mağazadan satın alın
QSI motorlu şırınga pompası	Stoelting	53311
Çıkarılabilir iğne sıkıştırma bağlantısı	Hamilton	55750-01
Küçük kemirgen stereotaksik çerçeve	Çalmak	51925
Küçük makas	Güzel Bilim Araçları	14060-09
StemPro Accutase	Invitrogen (ThermoFisher)	A1110501
Steril alkol hazırlama pedleri	Fisherbrand	06-669-62
Steril pamuklu çubuklar/Kendall Q-ipuçları	Tyco Healthcare	540500
Steril tuzlu su	Hospira	NDC-0409-1966-07
Kronometreler (2)	Fisher Scientific	06-662-56
Superfrost Plus Gold mikroskop slaytları	Fisherbrand	15-188-48
Sütürler - 5.0 kavisli iğne ile ipek	Vaha	MV-682

satın alın Ürünler , CCI

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission