Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.
Tek seviyeli Laminotomi
- : Laminotominin hedefini, iki zigapofizyal eklem arasında ve medial olarak bulunan en merkezi lamina olarak belirleyin.
- Laminayı alt kenarına kadar, kaudal zigapofizyal eklemin bitişik alt eklem sürecine hemen medial bir noktaya kadar izleyin.
- Laminanın kaudalmost kenarı ile merkezi kanal arasındaki geçişi palpe etmek için 5 mm'lik bir Freer asansör veya küret kullanın.
NOT: Palpe aletini dural kese ve omuriliğe temas edeceği için öne doğru zorlamamaya özen gösterilir. Domuzlardaki omuriliğin lomber omurgayı geçtiğine dikkat edin. Palpasyonu kolaylaştırmak için bu alanın üzerindeki ek yumuşak dokuyu çıkarmak için bir intervertebral disk rongeur kullanılabilir. - Kemiği parça parça çıkarmak için 2 mm'lik yukarı ısırıcı, 45 derecelik bir Kerrison rongeur kullanın. Dikenli sürecin tabanı boyunca kemiği, pedikülün kaudal yüzeyine sadece kaudal bir seviyeye kadar üstün bir şekilde ve tam kapsamına kadar yanal olarak çıkarın.
- Kemiğin çıkarılmasına yardımcı olması için açılı kemik rongeurları kullanın. Laminotomi büyük ölçüde tamamlanana kadar laminaya bağlı olan inferior eklem sürecini yerinde bırakın.
- İnferior eklem işleminin serbestçe hareket ettiğini ve sadece zigapofizyal eklem kapsülü ile bağlandığını onaylayın. # 15 veya # 11 bıçak kullanarak kapsülü kesin.
- İnferior eklem sürecini parça parça çıkarın, ancak bitişik üst eklem sürecini olduğu gibi bırakın.
NOT: Laminotomi tamamlandığında bipolar elektrocerrahi ile hemostaz yapılır. Monopolar elektrocerrahi, nöral yapıların yakınlığı nedeniyle kullanılmaz. Kemik mumu, açıkta kalan kemikten kanama bölgeleri boyunca yerleştirilebilir ve yumuşak doku yakınında hemostaz elde etmek için emilebilir jelatin süngerler kullanılabilir. Cottonoid, seröz sıvıyı ve kanı diseksiyondan uzaklaştırmak için yararlı bir araçtır.
Dorsal Kök Ganglionunun Diseksiyonu (DRG)
- Epidural yağı yüzeyselden derine doğru parça bazında boşaltın, medial olarak başlayın ve lateral olarak ilerleyin. Bipolar forseps kullanarak hafif diseksiyon yaparak ve 6 - 10 Fransız Frazier emme ucu ile emerek yağı alın.
NOT: Büyüteç büyütme veya diseksiyon mikroskobunun kullanılması, epidural yağın güvenli bir şekilde boşaltılması ve bipolar elektrocerrahi kullanılarak epidural venöz pleksusun titiz hemostazı elde edilmesi için gereken ayrıntı seviyesinin sağlanmasında yardımcı olur. - Cilt insizyonunun eksenine paralel olarak superoinferior yönde uzanan orta hat boyunca dural keseyi tanımlayın. Dural kesenin dural sinir kökü manşonuna yol açtığı görülene kadar dural kese boyunca epidural yağı çıkarın.
- Epidural yağ tahliyesi ile dural manşonu lateral ve inferior olarak izleyin, DRG (Dorsal Kök Ganglionu) etrafında genişlediği görülene kadar drg.
NOT: DRG'yi oval şekli ve sarı-turuncu rengi için tanımlayın. Orta lomber omurgada, DRG tipik olarak 4-6 mm boyutundadır, medial ila lateral yönde en uzundur ve ilgili pedikülünün doğrudan alt veya 2-3 mm medialinde bulunur. Pedikül için nazikçe palpe etmek için künt, dik açılı bir sinir kancası kullanılabilir. - Epidural yağı, bitişik omurilik siniri görülene kadar DRG'yi geçecek şekilde lateral olarak boşaltın.
NOT: Durotomi meydana gelirse, basit bir koşu dikişinde 6-0 naylon sütür ve pürüzsüz mikro iğne sürücüsü kullanarak su geçirmez bir kapatma ile onarın.
Dorsal Kök Ganglionunun Enjeksiyonu:
- 32 gauge konveksiyonla geliştirilmiş dağıtım (CED) iğnesinin yörüngesini yönlendirmek için 22 gauge omurga iğnesi kullanın. 22 gauge kılavuz iğneyi deriden ve paraspinal kaslardan delin.
NOT: CED iğnesi, basınç gradyanları nedeniyle toplu akış olarak da bilinen dokuda sıvı konveksiyonu elde etmek için tasarlanmıştır. - Kılavuz iğneyi, DRG'nin uzunlamasına eksenine yaklaşan ve iğne ucunun diseksiyon alanının lateral paraspinal duvarından çıkmasına neden olan bir yörünge boyunca hedefleyin.
- İğne lümeni DRG'nin merkeziyle aynı hizaya gelene kadar iğne yolunda ince ayar yapın.
NOT: Kılavuz iğnenin DRG ile temas etmesine asla izin verilmemelidir. - Steril bir şırıngaya steril enjekte edin ve şırıngayı steril infüzyon tüpüne bağlayın.
- Hortumu CED iğnesine sabitleyin ve şırıngayı steril alandan çıkarın. Şırıngayı programlanabilir bir şırınga pompasına bağlayın.
NOT: Boru, sterilite ve hareketliliğin korunmasını sağlamak için 5 fit uzunluğunda hazırlanmıştır. Ayrıca, çözeltiye hava kabarcığı girmemesi de büyük önem taşır. - CED iğne ucundan ifade görülene kadar enjeksiyonu ilerletin.
- CED iğnesini kılavuz iğne lümeninin içine yerleştirin ve CED iğnesini kılavuz iğne ucundan çıkana kadar yavaşça ilerletin. İğne hizalaması sırasında DRG'nin delinmediğinden emin olun.
- CED ucunun son konumunu belirlemek için yörüngesinin uzun ekseni boyunca kılavuz iğne konumuna ince ayar yapın.
- Kılavuz ve CED iğnelerinin derinliği ve hizası sağlandıktan sonra, kılavuz iğneyi ve CED iğnesini birbirine kenetlenen iğne göbeklerini kullanarak sabitleyin.
- Kılavuz iğne, CED iğnesi ve enjekte ile yüklenmiş bağlı borular dahil olmak üzere tüm enjeksiyon aparatı bağlantılarının tamamen sabitlendiğini onaylayın.
- CED iğne ucunu ve DRG'yi yaklaşık olarak tahmin etmek için kılavuz iğneyi uzun ekseni boyunca ilerletin.
- DRG'yi CED iğne ucuyla delin.
- CED iğne ucunu DRG'nin üç boyutlu merkezine daldırın.
NOT: DRG, değişken boyut ve şekle sahip üç boyutlu bir yapı olduğundan, CED iğne ucunu DRG'nin gerçek merkezine doğru bir şekilde yerleştirmek için DRG maruziyetinin tamamlanması gerekir. Gerçek DRG merkezi, üç anatomik ekseninin kesişme noktasında bulunur, yani önden arkaya, medialden yana ve alt eksenlerden üstündür. - Kademeli bir hız ve 3 adımlı hacim kullanarak CED ile 100 μL enjekte edin.
- İlk adım için 2 μL/dk'da 4 μL verin. İkinci adım için 4 μL/dk'da 8 μL verin. Üçüncü ve son adım için 8 μL/dk'da 88 μL verin.
NOT: Basınç dengelemesine izin vermek için adımlar arasında ve son adımdan sonra 3 dakikalık bir duraklamaya izin verin. - Son enjeksiyon adımından sonra enjeksiyon aparatını geri çekin ve uzun ekseni boyunca pürüzsüz, yumuşak bir hareketle 3 dakikalık bir duraklama yapın.
NOT: Renksiz enjekte edilen çözeltiler için, enjekte dağılımının görsel değerlendirmesine yardımcı olmak için çözeltiye %0.1 ağırlık/hacim konsantrasyonda renkli boya dahil edilir. Ayrıca, hayati boya 4 ', 6-diamidino-2-fenilindol (DAPI), çalışma tasarımı enjekte dağılımının histolojik değerlendirmesini gerektirdiğinde 0.25 μg / μL'lik bir konsantrasyonda çözeltiye dahil edilir.
Kapatma
:
- Enkaz alanını, yani kemik parçalarını harekete geçirmek ve temizlemek için kapatmadan önce cerrahi bölgeye 3 tur ılık tuzlu su irrigasyonu uygulayın. Tuzlu su ve kalıntıları geri kazanmak için emme kullanın.
NOT: Sulama temiz kaldığında titiz hemostaz sağlanır. Bu sırada hemostatik ajanlar (jelatin sünger) ve cottonoid çıkarılır. Kapatmadan önce tüm malzeme ve aletlerin kesi bölgesinden temizlendiğinden emin olun. - Kapatmak için 3 katmanlı bir teknik kullanın.
- Torakolomber fasyayı 0 sütür kullanarak basit, kesintili, ters çevrilmemiş bir şekilde dikin. Su geçirmez bir kapatma elde etmek için her 5-8 mm'de bir dikiş yerleştirin.
- Yeterli gücü elde etmek için her 5 ila 8 mm'de bir yerleştirilen bir dikişle basit, kesintili, ters çevrilmiş bir şekilde 2-0 sütür kullanarak deri altı dokusunu dikin.
- Cildi 0 sütür kullanarak basit, çalışan veya kesintili bir şekilde kapatın.
- Hiçbir keskin nişancının hesaba katılmadığından emin olmak için bir iğne sayacı kullanın.
- Cildi tuzlu suyla yıkayın, kurulayın ve kesiye dik olarak yapışkan bandaj şeritleri yerleştirin.
- Sargı bantlarının üzerine gazlı bez yerleştirin ve son bir yapışkan antimikrobiyal kesi örtüsü takın.