$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.
Sekiz haftalık yetişkin erkek C57BL / 6N fareler kullanıldı.
1. Ameliyat öncesi kurulum
- Otoklavlanmış, sterilize edilmiş cerrahi aletler, ekipman, analjezik ilaçlar ve anestezik ilaçlardan oluşan uygun bir stok sağlayın.
- Ameliyat masasında yeterli çalışma alanı sağlayın.
- Fare için yatak olarak bebek bezi kaplı özelleştirilmiş bir cerrahi köpük levha kullanarak ameliyat masasını hazırlayın. Steril gazlı bezle kaplı tıbbi bantla köpük levhaya bir ısıtma pedi sabitleyin.
- Vasküler forseps kullanarak bir akupunktur iğnesini bükerek, ikiye katlayarak ve ardından katlanmış akupunktur iğnesinin ucunu bir kancaya bükerek ekartörler oluşturun. Akupunktur iğnesinin ucuna bir lastik şerit sabitleyin ve lastik şeridin ucunu köpük levhaya sabitlemek için bir raptiye kullanın.
- Stereomikroskobu kalibre edin; yeterli odak mesafesine sahip bir stereomikroskop seçin. Cerrahın operasyon sırasında ayarlamasına izin vermek için yakınlaştırma/odaklama düğmelerini sterilize edilmiş alüminyum folyo ile kapatın. Sterilize edilmiş alüminyum folyo, yakınlaştırma/odaklama düğmelerinin üzerine yerleştirilerek cerrahın steril eldivenlerle kullanmasına izin verildi.
2. Fare anestezisi ve hazırlığı
- : Fareyi tartın ve vücut ağırlığına göre uyuşturun (izofluran% 3). Anestezi derinliğini doğrulamak için pençesinin interdigital boşlukları sıkıştığında farenin yanıt vermediğinden emin olun. İşlem boyunca yeterli anestezi derinliği korunmalıdır (% 1 izofluran).
- Ameliyat sırasında korneanın tahriş olmasını veya kurumasını önlemek için gözlere iki taraflı olarak oftalmik merhem sürün.
- Boyun ve göğsteki kürkü otomatik bir kesme makinesi ile tıraş ederek ameliyat bölgesini hazırlayın. Gevşek saçları çıkarın ve temizleyin.
- Fareyi steril gazlı bezle kaplı ısıtma pedinin üzerine sırtüstü pozisyonda yerleştirin. Tüm çalışma boyunca farenin sıcaklığını 37 °C'de tutun. Ön ayakların yatay olarak kaçmasına neden olmak ve arka bacakların ve kuyruğun hareket etmesini önlemek için fareyi tıbbi bantla sabitleyin. Farelerin üzerine uygun açıklığa sahip sterilize edilmiş tek kullanımlık bir cerrahi örtü yerleştirildi.
3. Operatif prosedür
- Preemptif analjezi olarak tramadol enjekte edin (20 mg / kg, intraperitoneal veya ip). Klavikulanın üst kenarındaki enine kesiyi işaretleyin. Cerrahi bölgeyi dezenfekte etmek için üç döngü alternatif iyodofor dezenfeksiyon solüsyonu ve etanol fırçalayın. Ameliyattan önce anestezi derinliğini bir ayak parmağı tutamıyla onaylayın.
- Mikroskop altında çalışarak, steril bir neşter kullanarak işaret boyunca 4 mm'lik enine bir kesi yapın. İşlem sırasında kesiyi gerektiği gibi büyütün.
- Deri altı fasyadan künt bir şekilde diseksiyon yapın ve submandibular bezin alt sınırını tanımlayın. Supraklaviküler fossa ve sternumu ortaya çıkarmak için submandibular bezi yukarı doğru çekin.
NOT: Bu bölgede küçük kalibreli kan damarları olabilir. Kanamayı durdurmak için elektrokoter kullanılabilir. - Sternumu orta hat boyunca baştan kuyruğa doğru keserek kısmi medyan sternotomi insizyonu (~ 4 mm) yapın. Sternotomi sırasında akciğer zarı, kalp ve kan damarlarını koruyun.
- Sternohyoid kasını tanımlayın. Akupunktur iğnelerinden yapılmış iki küçük özelleştirilmiş ekartör ile sternumu nazikçe çekin ve trakea ve yemek borusu üzerindeki sternohoid kası tanımlayın. Karotis arteri, iç juguler veni, frenik siniri, vagus sinirini, trakeayı ve yemek borusunu ortaya çıkarmak için bu kası geri çekin.
NOT: Açık pnömotoraksı önlemek için sternumu nazikçe geri çekin. İnsanlardan farklı olarak, farenin yemek borusu soluk borusunun arkasında değil, sol tarafta soluk borusuna bitişiktir. - Sol brakiyal pleksusu tanımlayın. Sol iç juguler venin lateral kenarında, brakiyal pleksusu ortaya çıkarmak için fasyayı ve yağ dokusunu dışa doğru çekin. Üç dalı olan Servikal veya C5 ve C6 sinirlerinden oluşan üstün gövdeyi arayın. C7 sinirinden oluşan orta gövdeyi ve C8 ve Torasik veya T1 sinirlerinden oluşan alt gövdeyi, üst gövde boyunca farenin kuyruğuna kadar tanımlayın.
NOT: Brakiyal pleksusun yüzeyinde uzunlamasına kan damarları vardır. Kanamayı önlemek için elektrokoter kullanın. Sol brakiyal pleksusu ayırırken, şilöz bir fistülden kaçınmak için şilöz kanalı koruyun. - Sol C7 sinirini hasat edin. Orta gövdenin (C7 siniri) ön bölümünü ve arka bölümünü, klavikula altındaki bölünme-kord seviyesine distal olarak inceleyin ve sinir gövdesine lokal infüzyonla C7 sinirini 0.1 mL% 2 lidokain ile bloke edin. C7 sinirini Vannas yaylı makas ile lateral kord ve arka kord ile birleşme noktalarında rezeke edin. C7 sinirini, her bölümün uzunluğu benzer olacak şekilde kesin.
NOT: C7 sinirinin ön ve arka bölümleri ile üst ve alt gövdelerin ön ve arka bölümleri, birleşmeden önce uzun bir mesafe boyunca uzanır, bu nedenle C7 siniri rezeksiyondan önce yeterince serbest bırakılmalıdır. Aslında, C7 siniri her zaman iki bölüme ayrılmaz; Bazen, nadir durumlarda üç bölüme hatta dörde ayrılır. - Sol C6 lamina ventralis'i çıkarın. Frenik siniri dikkatlice koruyun ve C7 sinir kökünü ortaya çıkarmak için ön skalen kasını C6 segmenti seviyesinde kesin. Paraspinal kasını mikroforceps ile innerve eden C7 sinirinin küçük dallarını kesin. C7 sinirini nazikçe dışarı çekin ve C6 lamina ventralisi dikkatlice çıkarın.
NOT: Sol karotis arterin medial tarafı ile yemek borusunun lateral tarafı arasında kemikli bir çıkıntı vardır. Bu kemiksi çıkıntı, 6. servikal vertebranın lamina ventralis'idir. C6 lamina ventralis'in lateral kenarının uzunlamasına kası anterior skalen kasıdır ve frenik sinir, anterior skalen kasının yüzeyinde çalışır. - Doğru C7 sinirini hasat edin. Sol tarafa benzer şekilde sağ taraftaki ön skalen kasını kesin ve sağ C7 sinir kökünü intervertebral foramenlere yakın bir yerden kesin. Sağ C7 sinirini bölünme seviyesinden diseksiyon.
NOT: Sinirin altındaki kan damarlarının zarar görmesini önlemek için sağ C7 sinirini dikkatlice kesin. - Sol C7 sinirini aktarın.
Her - iki taraftaki vertebral cisimlerin yanındaki kaslı longus kollisini çıkarın. Trakea-özofagus ve vertebral gövde arasındaki boşluğu künt bir şekilde ayırın ve genişletin.
- Yarım katlı 5-0 naylon sütürü omur gövdesinin sağ tarafından sol tarafa prespinal yoldan gönderin.
- Sol C7 sinirini bir infüzyon tüpü ile bağlayın ve siniri prespinal yoldan sağ tarafa yönlendirin.
- Soluk borusu ve yemek borusunu nazikçe geri çekin ve sol C7 sinirinin ön ve arka bölümlerini 12-0 Naylon dikişler kullanarak gerginlik olmadan sağ C7 sinir köküne yerleştirin. Sinirleri güçlü bir şekilde kaplamak için sinirlerin etrafındaki epinöryumu 4-5 dikişle dikin.
NOT: Uygun kalınlıkta bir plastik infüzyon tüpü seçmek çok önemlidir. Çok ince bir tüp sinire zarar verebilir ve çok kalın bir tüp trakea ve yemek borusuna zarar verebilir. Ek olarak, trakea-özofagus ile vertebral gövde arasındaki boşluk "V" şeklinde bir boşluktur ve kas longus kolinin bir kısmının kesilmesi transfer yolunu kısaltabilir.
4. Yara kapatma
:
- Yarayı steril normal tuzlu su ile yıkayın ve steril gazlı bezle kurulayın.
- Sternumu dikin ve 5-0 monofilament dikişler kullanarak cildi kapatın.
5. Ameliyat sonrası bakım
- : Farenin anesteziden uyanmasını bekleyin. Fareyi yatak malzemesi olmadan temiz bir kafese aktarın, ancak bir ısınma battaniyesi ile ısıtın. Fareyi yürüyene kadar gözlemleyin. Postoperatif analjezi olarak tramadol (20 mg / kg, ip) kullanın.
- Fareleri bir kurtarma kafesine yerleştirin ve iyileşene kadar izleyin. Operasyondan sonra farelerin suyunu ve diyetini eski haline getirin. Fareleri ameliyat sonrası yetersiz beslenme, kambur duruş ve fırfırlı kürk dahil olmak üzere her gün bozulma veya enfeksiyon belirtileri açısından izleyin. Ameliyattan iki hafta sonra dikiş atılmalıdır.
NOT: Art arda üç gün boyunca her gün yara yüzeyine eritromisin merhem sürün. Yara ödemi - gibi herhangi bir komplikasyon görülürse hemen çözülmelidir.