Zebrafish embriyolarında mikobakteriyel enfeksiyon sırasında makrofaj hücre ölümünün canlı görüntülemesi

Özet

Kaynak: Niu, L. ve diğerleri. Zebrafish embriyolarında mikobakteriyel enfeksiyon sırasında makrofaj litik hücre ölümünün intravital mikroskopi ile görselleştirilmesi. J. Vis. Exp. (2019)

Bu video, Mycobacterium marinum enfeksiyonu sonrası zebrafish embriyolarında makrofaj litik hücre ölümünü görselleştirmek için intravital konfokal mikroskopi kullanımını göstermektedir.

Protokol

1. Enfeksiyonun canlı görüntülenmesi

1. 1. Canlı görüntüleme için balık montajı
   1. Tricaine anestezi edilmiş 10 embriyoyu cam tabanlı 35 mm kabin ortasına transfer edin. Ekstra E3 orta seviyeyi at.
   2. Tabağı %1 düşük erime noktası agarozu ile kaplayın ve zebrafish embriyolarını 10 G'lik bir iğneyle dikkatlice yönlendirin. Agarozun katılaşması için cam taban kabını buz üzerinde 10 saniye inkübe yapın.
      NOT: Orta beyin enjeksiyonu için embriyolar agaroza yerleştirilmeli ve başı yukarıya doğru yönlendirilmelidir (Şekil 1A).
   3. Tamamen katılaştıktan so....

Sonuçlar

Şekil 1: Zebrafish embriyolarının canlı görüntüleme için montajı. (A) Orta beyin enfeksiyonu için, zebrafish embriyoları başları aşağıya doğru yerleştirilirdi. (B) Gövde bölgesi enfeksiyonu için, zebr.......

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
Cam tabanlı 35 mm çanak	In Vitro Scientific	D35-10-0-N
Agarose	Sangon Biyoteknoloji	A60015
Konfokal mikroskop	Leica	TCS SP5 II
Çevre Odası	Pecon	Sıcaklık kontrolü 37-2 dijital
Mycobacterium marinum			ATCC BAA-535
N-feniltiore (PTU)	Sigma	P7629