Biyolüminesans kullanarak fare modelinde idrar yolu enfeksiyonunun görselleştirilmesi

Özet

Kaynak: Luyts, N. ve diğerleri. Biyolüminesans görüntüleme ile farelerde idrar yolu enfeksiyonlarının uzunlamasına takibi ve tedavisi. J. Vis. Exp. (2021).

Bu video, bakteriyel yapışma, invaziya ve hücre içi çoğaltmanın gerçekleştiği mesane içine enjekte edilen biyolüminesan E. coli kullanılarak fare modelinde idrar yolu enfeksiyonunun indüksiyonu ve izini göstermektedir. Biyolüminesans operondan yayılan ışık, enfeksiyon ilerlemesi sırasında bakteri yükünün gerçek zamanlı göstergesi olarak hizmet eder.

Protokol

Hayvan modelleriyle ilgili tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından incelenmiştir.

1. Hayvanların aşılanması

1. Hayvanların hazırlanması
   1. Araştırma sorusuna ve knock-out hatlarının bulunabilirliğine, deneysel detaylara ve İYE hassasiyetindeki farklılıklara bağlı olarak istenen fare suşunu seçin. Transüretral kateterizasyonun dişi farelerde daha kolay olduğunu unutmayın. 8 haftadan küçük hayvanları kullanmayın, çünkü bağışıklık sistemi olgunlaşmamıştır. Burada 12 haftalık dişi C57Bl/6J fareleri kullanıldı.
   2. Hayvanları önceden sipariş edin ve ideal olarak 7 ....

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
Anestezi buharlaştırıcısı	Harvard Apparatus Limited	Yok	https://www.harvardapparatus.com/harvard-apparatus-anesthetic-vaporizers.html
Baytril 100 mg/mL	Bayer	Yok	Enrofloksasin
BD Insyte Autoguard 24 GA	BD	382912	Sarı anjiyokateter, staklama için steril plastik uç kullanın
C57Bl/6J fareleri	Janvier	Yok
Santrifüj 5804R	Eppendorf	EP022628146
Dropsense 16	Unchained Labs	Trinean	OD 600nm ölçüm için
Dulbecco'nun Fosfat Tamponlu Salini, Gibco	ThermoFisher Scientific	REF 14040-083
Etanol %70 denatürasyon olmuş 5L	VWR uluslararası	85825360
Falcon 14ml Yuvarlak Tabanlı Polistiren Tüp, Çıtlık Kapak	Corning	352057
Falcon 50ml hücre başlangıcını	Greiner	227285
Hamilton GASTIGHT şırınga, PTFE luer kilidi, 100 μL	Sigma-Aldrich	26203	50 μL'nin yavaş bakteri aşılanmasını sağlamak için
Aşılama döngüsü	Roth	6174.1	tutucu: Sanat. No. 6189.1
Iso-Vet 1000mg/g	Dechra Veteriner ürünleri	Yok	İzofluran
IVIS Spektrumu In Vivo Görüntüleme Sistemi	PerkinElmer	REFERANS 124262	görüntüleme cihazı