Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Bakteriyofaj Enfeksiyonu İçin Toprak Bakteriyel Kültürü Hazırlanıyor

477 görüntülenme

31 Mart 2026

Bu makalede

Özet

Kaynak: Cross, T. ve ark., Arthrobacter bakteriofag türlerinin toprak örnek izolatlarından izolasyonu için optimize edilmiş zenginleştirme tekniği. J. Vis. Exp.(2015)

Bu video, bakteriyofaj üretimi için bakteriyel kültürün hazırlanmasını göstermektedir. Bu aşama, bir toprak bakterisinin şaşkın bir şişeye aşılanması, havalandırma ve sallanma yoluyla eşit büyümeyi teşvik etme ve optik yoğunluk ölçümleriyle hücre yoğunluğunu izleme adımlarını kapsar. Kültür optimal büyüme aşamasına ulaştığında, verimli bakteriyofaj üretimine hazır olur.

Protokol

İzolasyonu için Arthrobacter Hücrelerinin Hazırlanması

  • Kültür Arthrobacter sp. KY3901 kolonileri, 30 °C'de 2-3 gün kuluçka içinde bir Luria Bertani (LB) agar levhasında çizgi izledi. Bir koloni seçin ve steril bir halka kullanarak 250 ml LB çorbasına bir çörek ile ekleyin ve 225 rpm'de 30 °C'de sallanma kuluçkasında kuluçka yapın.
  • enfeksiyonu deneyleri için geç üstel/erken durağan faz hücreleri elde etmek amacıyla yaklaşık 24 saatlik büyüme izin verilmelidir. Hücrelerin orta ve geç sabit büyüme durumuna girmesini önlemek için bakteriyel büyüme durumunu yakından izleyin.
    NOT: Hücre büyümesi, faj izolasyonu ve arıtma prosedürleri/adımları için 0.5-0.0.7 arasında optik yoğunluk OD₆₀₀₀ olmalıdır.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
LB Et Suyu tozuFisherBP9722-2 
Granüllü AgarFisherBP1423-2 
Eppendorf TüpleriFisher05-408-129 
5 ml pipet bireyselFisher13-678-11D 
50 ml konik tüplerFisher76002844 
15 ml konik tüplerFisher76002845 
10 ml pipet bireyselFisher13-676-10J 
25 ml pipetler bireyselFisher13-676-10K 

Etiketler

Toprak Bakteriyofaj zolasyonuBakteriyel K lt r Haz rlamaB lmeli Erlen K lt rOptik Yo unluk zlemeEksponansiyel Faz K lt rArthrobacter BakteriyofajLB Besiyeri nk basyonualkalamal nk bat r Tekni iSpektrofotometre l mBakteriyofaj Enfeksiyon Haz rl