Bu video, farelerde biyolüminesans, ilaca dirençli bakterilerin neden olduğu yanık yarası enfeksiyonlarının mavi ışık tedavisiyle tedavi prosedürünü ve ardından tedavi etkinliğini izlemek için biyolüminesans görüntüleme yöntemini göstermektedir.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Fare modelinde yanık yaralarında ilaca dirençli bakteriyel enfeksiyonlar için mavi ışık terapisi
195 görüntülenme
⸱
31 Mart 2026
Bu makalede
Özet
Protokol
Hayvan modelleriyle ilgili tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından incelenmiştir.
1. Farelerde A. baumannii enfeksiyonu için antimikrobiyal mavi ışık terapisi
- Fareleri, ketamin-ksilazin kokteyli (100 mg/kg - 20 mg/kg) intraperitoneal enjeksiyonla anestezi edin. Palpebral refleksin olmaması, uygun bir anestezik derinliğini gösterir.
- Fareleri rastgele olarak aBL ile tedavi edilmiş bir grup (n = 10) ve tedavi edilmemiş bir kontrol grubu (n = 10) olarak böl.
- Antimikrobiyal mavi ışık (aBL) ile işlenmiş grup için, farelerin gözlerini aşırı ışığa maruz kalmamak için alüminyum folyo ile kaplamaktır. Fare yanıklarını doğrudan ışık yayan diyotun (LED) altına yerleştirin; 35 mm bir petri kabının kapağı fare karnının altına yerleştirilerek sırtlarını yatay tutun.
- 3.5. adımda bahsedilen güç/enerji ölçerini kare bir petri kabının üzerindeki fareyle değiştirin. Fare yüksekliğini, LED diyafram ile fare yanığı yüzeyi arasındaki mesafenin LED diyafram ile güç/enerji ölçerinin ışık sensörünün seviyesi arasındaki mesafeye eşit olduğu bir konuma geri ayarlayın.
- Enfekte yanıkları 100 mW/cm 2 ışıklandırma ile ışınlayın. ABL'yi 72 J/cm2 dozlarda verin ve toplam doz 360 J/cm2 (örneğin, 0, 72, 144, 216, 288 ve 360 J/cm2) ulaşılana kadar verilsin. Her ışık dozundan sonra fareler için biyolüminesans görüntüleme yapılmaktadır.
- Tedavi edilmemiş kontrol grubu için, fare yanıklarının biyolüminesans görüntülemesi yapılabilir ve aBL ile tedavi edilen grupta kullanılan aynı zaman aralıkları kullanılır.
- Fareler iyileşmeden önce, fareleri su ısıtılan cerrahi yatağa yerleştirerek ısı kaybı ve hipotermiyi önleyin. İyileşmeye kadar farelerin aktivitesini ve palpebral refleksini gözlemleyin. Fareler toparlandıktan sonra, kafeste 2-3 tane kalın.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| IVIS | PerkinElmer Inc, Waltham, MA | IVIS Lumina Serisi III | Preklinik in vivo görüntüleme |
| Işık yayan diyot LED | VieLight Inc, Toronto, Kanada | 415 nm | Aydınlatma için ışık kaynağı |
| Güç/enerji ölçer | Thorlabs, Inc., Newton, NJ | PM100D | Işık ışınlanması dedektörü |
| Fare | Charles River Laboratuvarları, Wilmington, MA | BALB/c | 7-8 haftalık, 17-19 g ağırlık |
| Acinetobacter baumannii | Brooke Ordu Tıp Merkezi, Fort Sam Houston, TX | Klinik izolat | Mühendislik edilmiş parıltı gerilim |
| Fosfat tamponlu tuzlu suynu, 1x çözelti | Fisher Scientific | BP24384 | Birçok biyomoleküler işlemde kullanılan standart bir fosfat tamponu |
| Fisher Scientific Redi-Tip Pipet Uçları, 1-200 μL | Fisher Scientific | 02-707-502 | Pipet Uçları |
| Pirinç Blok | Small Parts, Inc., Miami, FL | 10 mm x 10 mm | Farelerde yanık oluşumu için |
| Extreme Dragon PBI/Kevlar Yüksek Isı Eldivenleri | Superior Glove Works Ltd, Cheektowaga, NY | PBI83514 | Isıya Dayanıklı Eldivenler |
| Greiner yemekleri | Sigma-Aldrich Co. LLC | P5112-740EA | 35 mm ×10 mm |
| Corning Dijital Sıcak Plaka | Cole-Parmer Enstrüman Şirketi, LLC | UX-84301-65 | 10" x 10", 220 VAC, kaynar su için |
| Fare/Fare İnce Çizgili Su Isıtılan Cerrahi Yatak | E-Z Sistemleri | EZ-211 | Ameliyat sırasında ısı kaybı ve hipotermiyi önler |
| Veteriner merhemi | S&K Pharma, GmbH | Kerato Biciron %5, Augensalbe | Göz kuruluğunu önlemek için göz merhemi |
