Dönüşüm ısı şok yöntemi kullanılarak E. coli içine plazmid DNA moleküler biyolojinin temel bir tekniktir. Bu bakteri yabancı bir plazmid veya ligasyonu ürün ekleme oluşur. Bu video protokolü Genlantis piyasada bulunan kimyasal yetkili bakteri kullanarak dönüşüm geleneksel yöntem açıklanır. Buz kısa bir inkübasyondan sonra, 45 saniye boyunca 42 ° C'de kimyasal yetkili bakteri ve DNA karışımı konur (ısı şok) ve ardından buz geri yerleştirilir. SOC medya eklenir ve dönüştürülmüş hücreleri ile 37 ° C de 30 dakika süreyle ajitasyon inkübe edilir. Dönüşüm verimliliği bağımsız koloniler izole emin olmak için, iki miktarlarda dönüştürülmüş bakteri kaplanmıştır. Bu geleneksel protokol ticari olarak satılan birçok yetkili bakterileri dönüştürmek için başarıyla kullanılabilir. Genlantis turbocells bir roman 3 dakika dönüşüm protokolü, kullanım kılavuzunda açıklanan de kullanılabilir.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Isı Şoku Yöntemiyle E. coli içine Plazmid DNA Dönüşüm
Bu makalede
Özet
Yeniden basım ve izinler
