Kraniofasial Geliştirme sırasında Ektodermal Epiteli Sinyal Özellikleri değerlendirilmesi

Summary

Bu makale, kraniyofasiyal gelişimi sırasında sinyalizasyon ve yüzey sefalik ektoderm desenlendirme özellikleri test etmek için tasarlanmış bir doku nakli tekniği açıklar.

Abstract

Erişilebilirlik kuş embriyoların deneysel embriyologlar kalkınma ve desenlendirme ve omurgalıların morfolojilerinden (örneğin, ^{1, 2, 3, 4)} düzenleyen doku etkileşimleri rol sırasında hücre kaderi anlamaya yardımcı olmuştur. Burada, yüz gelişimi sırasında ektodermal dokuların sinyalizasyon ve desenlendirme özelliklerini test etmek için bu erişilebilirlik yararlanan bir yöntem göstermektedir. Bu deneylerde, aynı bölgede ya da bir civciv embriyo ektopik bölge üzerine, bıldırcın ya da fare üst çene kapsayan yüzey sefalik ektoderm nakli ^{bıldırcın-chick} 5 veya ^fare civciv 6 kimeralar oluşturmak. Civciv içine nakli için donör doku olarak bıldırcın kullanımı, böylece araştırmacılar host ve donör ^dokuları 7 ayırt etmek için izin, bıldırcın içinde mevcut değil civciv hücreleri nucleolar marker yararlanmak için geliştirilmiştir . Aynı şekilde, bize fare civciv kuruntulardan ⁸ host ve donör dokuları ayırt etmek için izin verir, tekrarlayan bir unsur fare genomunda mevcut ve yayg ifade edilir. Bu bize çeşitli mutant embriyolardan elde edilen ektoderm sinyalizasyon özellikleri test etmek için izin verecek, çünkü donör doku olarak fare ektoderm kullanımı büyük ölçüde, bu doku etkileşimleri anlayışımızı uzatacaktır.

Protocol

1. Donör Doku hazırlanması

1. Kültür ortamı hazırlayın, cam pimleri keskinleştirmek, tungsten iğneler keskinleştirmek.
2. Kabuk embriyonun toplayın, buz gibi soğuk PBS içinde yıkayın.
   1. 10 ml şırınga ve 18 gauge iğne ile yumurta kabuğu sivri ucundan 1.0 mL albumin çıkarın.
   2. Makas noktasını kullanarak kabuğun üstünde küçük bir delik açın ve sonra embriyo maruz dairesel bir açılış kesip
3. DMEM (serum serbest, oda sıcaklığı), baş ve yer çıkarın
4. Embriyo Frontonasal Süreci teşrih (veya maksiller ve mandibular süreci gibi diğer donör sitesi)
5. 20mins için buz üzerinde PBS içinde 2.4U / ml dis....

Discussion

Bu nakli yöntemi kullanarak bize ektoderm dorsoventral polarite ve üst çene proximodistal uzatma düzenleyen sinyal bilgisini içerdiğini belirlemek için izin verdi. Bıldırcın veya fare ektoderm, ve birçok türün ^6,11 arasında bu doku moleküler sinyaller korunması kullanarak sonuçların benzerlik omurgalıların hiçbirinde görülmeyen, son derece korunmuş bir sinyalizasyon merkezi olduğunu gösterir . Ayrıca, diğer araştırmacılar, farklı bölgelerin yüzey sefalik ektoderm sinyalizasyon özelliklerini test etmek için be.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
1x PBS	Tektronix, Inc.
DMEM	Kaliforniya Üniversitesi - San Francisco	CCFDA003
BSA	Sigma-Aldrich	A7906
Dispase	GIBCO, Yaşam Teknolojileri	17105-041
35x10 mm Petri kabı	Falcon BD	1008
No. 5 Dumont forseps	Güzel Bilim Araçları	11252-20
Makas	Güzel Bilim Araçları	14058-11
Bahar Makası	Güzel Bilim Araçları	15010-11
İğne tutucu	Güzel Bilim Araçları	26016-12
Tungsten İğne	Güzel Bilim Araçları	26000
Mikrokılcal tüp	Drummond Scientific	3-000-225-G
Pasteur Pipetleri	Fisher Scientific	13-678-6B
Yaylı makas	Güzel Bilim Araçları	15010-11
Bıçak tutucu	Güzel Bilim Araçları	10052-11
Tıraş bıçağı	Güzel Bilim Araçları	10050-00