Sigara kirlenme PEG silan tek tabaka, indirgeyici bir potansiyel uygulama cam üzerine ayrı ayrı adreslenebilir İTO elektrotlar desorbed oldu. Elektrokimyasal elektrot desen yakından karşılık gelen cep telefonu modelleri ile, hücre adezyon, mekansal olarak tanımlanan bir moda yer alması için izin İTO Mikroelektronlar PEG-silan tabaka sıyırma.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Optik Şeffaf indiyum kalay oksit Elektrotlar Desenlendirme Hücreler
Bu makalede
Özet
Özet
Hücre-yüzey etkileşimleri üzerinde tam mekansal ve zamansal kontrol egzersiz yeteneği çok hücreli yapıları, doğal dokuları in vitro taklit olarak görev montaj için önemli bir ön koşuldur. Bu çalışmada, fotolitografi ve cam yüzeylerde ıslak aşındırma teknikleri ayrı ayrı adreslenebilir indiyum kalay oksit (ITO) elektrotlar imal etmek için kullanılmıştır. İTO Mikroelektronlar içeren cam tabanlar poli (etilen glikol) (PEG), protein ve hücre rezistif silan ile modifiye edilmiştir. Redoks bir raportör molekül olarak potasyum ferrisiyanürle istihdam siklik voltametri PEG moleküllerinin elektrot yüzey yalıtım varlığı doğrulandı. Önemlisi, indirgeyici potansiyel uygulama tipik ferrisiyanür redoks zirvelerinden iletken elektrot yüzey görünümü ve rejenerasyon sonucunda desorpsiyon PEG tabakasının neden. Indirgeyici potansiyel uygulama da İTO elektrot özellikleri geçiş denk hücre hücre yapışkan olmayan yapıştırıcı. Elektrokimyasal elektrot desen yakından karşılık gelen cep telefonu modelleri ile, hücre adezyon, mekansal olarak tanımlanan bir moda yer alması için izin İTO Mikroelektronlar PEG-silan tabaka sıyırma. Çeşitli hücre tipleri Micropatterning bu yüzeylerde gösterildi. Gelecekte, bu yöntemle sağladığı biointerfacial özellikleri kontrol optik şeffaf bir substrat üzerinde kesin bir geometrik konfigürasyon, üç ya da daha fazla hücre tiplerinin montaj yoluyla hücresel mikroçevrelerde mühendisi sağlayacaktır.
Protokol
Bölüm I: elektrotlar Desenlendirme
- Temizlik ve kurutulmuş ITO kaplı cam slaytlar olumlu fotorezist ile kaplandı
- Yüzey, 100 ° C karşı solvent kaldırmak için fırında
- Pişirme sonra, yüzey Canon Maske Aligner kullanarak photomask üzerinden ultraviyole ışığa maruz
- Maruz kalan bölgelerde bir geliştirici çözümü çıkarıldı
- Yüzey sabit kalan herhangi bir geliştirici çözüm kaldırmak için pişmiş
- Fotorezist desenlendirme tarafından korunmaktadır İTO bölgelerde uzak bir asit asitlenmesi dağlanmıştır
- Kalan fotorezist İTO elektrotlar formu aseton sonicating tarafından kaldırıldı
Bölüm II: Yüzey modifikasyonu
- Modifiye elektrotlar, bir plazma odasında temizlenmeli ve toluende silan% 2 PEG ile değiştirilir. Kuluçka pişirme 2 saat, 2 saat süreyle yapılmaktadır.
Not: silan PEG doğru reaktif adezivdir önlemek için nitrojen ile dolu bir eldiven çanta Bu işlem gerçekleştirilir gibi.
Bölüm III: Elektrokimya
- Çelik tel elektrot pedleri bağlıdırlar.
- PEG silan modifiye elektrotlar elektrokimyasal deneyler gerçekleştirmek için bir elektrokimyasal hücreye yerleştirilir.
- Birbirine bağlı bölgelerden silan PEG PBS içinde üç elektrot sistemi kullanılarak ayrılır.
Bölüm IV: Hücre desenlendirme
- Fibroblastlar son zamanlarda elimden substratları ile inkübe edilir. Inkübasyon üzerine, bu hücrelerin PEG silan elimden bölgelerde eklemek; Bununla birlikte, hücrelerin yüzeyinde başka bir yerde bağlamak olmaz.
- Desenli hücreleri taze medya inkübe ve bir mikroskop kullanılarak görüntülendi.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Bu video, indiyum kalay oksit elektrot optik şeffaf hücreli desenlendirme göstermiştir. İTO elektrotları kullanarak fotolitografi imalatı sonra, silan PEG-dirençli bir hücre tek tabaka ile modifiye edilmiştir. Bu tek tabaka, hücre-yapıştırıcı hücre-dirençli yüzey geçiş elektrokimya desorbed oldu. 3T3 fare fibroblastlar Desenlendirme kendi video görülmüştür. Ayrıca desenlendirme hepatositler, birincil hücreler ve aynı tekniği kullanarak stellat hücreler var. Buna ek olarak, birden fazla bireysel elektrotlar yaparak, birden fazla hücre tipler...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar | |
|---|---|---|---|---|
| İndiyum Kalay Oksit | Diğer | Delta Technologies | CB 40IN | |
| PEG silan | Reaktif | Gelest Inc. | SIM6492.66 | |
| Hidroklorik Asit | Reaktif | Sigma-Aldrich | 320331 | |
| Nitrik Asit | Reaktif | Sigma-Aldrich | 258121 | |
| Etanol | Reaktif | Sigma-Aldrich | 459836 | |
| Aseton | Reaktif | Sigma-Aldrich | 650501 | |
| Toluen | Reaktif | Sigma-Aldrich | 34866 | |
| Besiyeri | Reaktif | Invitrogen | ||
| Kolajen | Reaktif | Sigma-Aldrich | C3867 | |
| 3T3 fare Fibroblastları | Hücre Hattı | ATCC |
Kaynaklar
- Lee, J. Y., Jones, C., Zern, M. A., Revzin, A. Analysis of Local Tissue-Specific Gene Expression in Cellular Micropatterns. Analytical Chemistry. 78, 8305-8312 (2006).
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
