Fare Ekokardiyografisi: Kardiyak Morfolojiyi Değerlendirmek İçin İnvaziv Olmayan Bir Teknik

Özet

Kaynak: Baudouy, D., et al. Farede Kardiyak Morfolojinin Ekokardiyografik ve Histolojik İncelemesi. J. Vis. Uzm. (2017).

Bu videoda, bir laboratuvar faresinde ekokardiyografi yapmak için kullanılan bir protokol açıklanmaktadır.

Protokol

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. Ekokardiyografi

1. Farenin vücut ağırlığını, doğru konumlandırmayı sağlamak için kuyruğundan hafifçe tutarken standart bir laboratuvar terazisi kullanarak belirleyin.
2. 50 mg / kg pentobarbital intraperitoneal (i.p.) enjeksiyonu ile hayvanı anestezi altına alın.
   not: Çalışma boyunca aynı protokol kullanılırsa başka herhangi bir anestezi türü kullanılabilir. Avantajlar ve dezavantajlar aşağıda tartışılacaktır.
3. Fareyi kendi kafesine geri koyun ve yanıt vermeyene kadar bekleyin, sabit nefes alma gösterir ve arka ayak refleksleri yoktur. Bunu test etmek için bir ayağınızı hafifçe sıkın ve bacağın hala geri çekilip çekilmediğini gözlemleyin.
4. Göğüs kafesinin sol tarafını ve sol koltuk altını ticari bir kemirgen tıraş makinesi kullanarak tıraş edin.
   not: Özel bir kemirgen tıraş makinesinin kullanılması, ekokardiyografik ölçümde paraziti önlemek için ince fare tüylerinin tamamen çıkarılmasına izin verir. Ticari epilasyon kremlerinden veya solüsyonlarından kaçınılmalıdır, çünkü bunlar genellikle parfümlüdür, bu da hayvanı uyandıktan sonra rahatsız edecektir. Isı kaybını artırdığı için aşırı tıraştan kaçının.
5. Uyuyan hayvanı, başı saat 12 ve kuyruğu saat 6 pozisyonunda olacak şekilde sığ bir sol pozisyonda 40-42 °C'ye ayarlanmış ılık bir pedin üzerine koyun. Sol kolu, sol bacağı ve kuyruğu bantla sabitleyin.
6. Önceden ısıtılmış ekokardiyografi jelini traşlı göğsün üzerine ve dönüştürücünün kafasına uygulayın.
7. Papiller kas seviyesinde iki boyutlu (2D) parasternal uzun eksen görünümü elde etmek için dönüştürücüyü parasternal sola yerleştirin ve boynun sağ tarafına yönlendirin. Papiller kas seviyesinde kısa eksenli bir görünüm elde etmek için dönüştürücüyü saat yönünde 90° çevirin. Görüntü kalitesini ve kare hızını en üst düzeye çıkarmak için minimum derinlik ayarı ve yakınlaştırma kullanın. Süpürme hızını maksimuma ayarlayın.
   1. Bu ayarları elde etmek için, makineye ve yazılıma bağlı olarak farklı yakınlaştırma ve derinlik ayarı seçenekleri kullanılabilir. Kısa eksen görünümünde 2D kılavuzlu M modu görüntüleri kaydedin. Şekil 1A ve B. not: Bradikardiye neden olabileceğinden göğsünüze aşırı baskı uygulamaktan kaçınmaya dikkat edin.
8. Her hayvan için en az 3 seri 3 kalp atışı siper döngüsü kaydedin.
   not: Bu çalışmada kullanılan ekokardiyografi yazılımı için "Al/Kaydet" düğmesine sadece bir kez basın. Bu metodoloji, bu özel yazılımla ekokardiyografa özgüdür. Diğer yazılım paketleri farklı makinelerle kullanılabilir.
9. Başarılı kayıtlardan sonra, ekokardiyografi jelini fare göğüs kafesinden, ısıtma yastığından ve dönüştürücüden silin. Bandı uzuvlardan ve kuyruktan çıkarın.
10. Gereksiz ışığa maruz kalmayı ve ısı kaybını önlemek için fareyi uyanana kadar dokuyla kaplı ısıtma yastığı üzerinde gözlem altında bırakın.
11. Hayvanı kafesine geri koyun.
12. Sol ventrikül (LV) boyutlarını ve işlevini belirlemek için parasternal kısa eksen görünümünden kaydedilen M modu görüntülerini analiz edin. Sistol ve diyastolde (LVAW'ler ve LVAWd) LV ön duvarının kalınlığını, LV iç uç sistolik ve diyastol sonu çaplarını (LVID'ler ve LVIDd) ve sistol ve diyastolde (LVPW'ler ve LVPWd) LV arka duvar kalınlığını (LVPW) ölçülen görüntülerdeki doku-kan arayüzünün tanımlamasını kullanarak.
13. Görünür maksimal LV diyastolik boyutları sırasındaki diyastolik boyutları ve LV arka duvarın en ön sistolik gezisi sırasında LV son sistolik boyutları ölçün. "Analiz Et" simgesine ve ardından "LVAWd" simgesine dokunmatik ekrana dokunun. Elektronik kumpası, diyastoldeki sağ ventrikül boşluğu ile LV ön duvarı arasındaki arayüze yerleştirin.
14. LV diyastolik ön duvar kalınlığını elde etmek için elektronik kumpası LV ön duvarı ile LV boşluğu arasındaki arayüze yerleştirin; yazılım doğrudan LV dahili diyastol sonu ölçümüne geçecektir.
15. LV iç diyastol sonu çapını elde etmek için kaliperi LV boşluğu ile LV arka duvarı arasındaki arayüze yerleştirin; yazılım LV arka duvar kalınlığı ölçümüne geçecektir.
16. LV diyastolik arka duvar kalınlığını elde etmek için kaliperi LV arka duvar ile perikard arasındaki arayüze yerleştirin. LV sistolik boyutları için, "LVAW'lar" simgesindeki dokunmatik ekrana dokunun ve elektronik kumpası, sistoldeki sağ ventrikül boşluğu ile LV ön duvarı arasındaki arayüze yerleştirin.
17. LV sistolik ön duvar kalınlığını elde etmek için elektronik kumpası LV ön duvarı ile LV boşluğu arasındaki arayüze yerleştirin. LV iç uç sistolik çapı ve LV sistolik arka duvar kalınlığı için yukarıda tarif edildiği gibi işlemi tekrarlayın. Endokardiyal ve epikardiyal sınırları izlemek için Amerikan Ekokardiyografi Derneği tarafından kabul edilen öncü konvansiyonu kullanın.
    not: AG kontraktil fonksiyon parametreleri, önceki ölçümler kullanılarak otomatik olarak hesaplanacaktır. LV fraksiyonel kısalma (FS), FS (%) = [(LVIDd - LVIDs)/LVIDd] x 100 olarak tanımlanır. LV ejeksiyon fraksiyonu (EF), EF (%) = [(LVIDd³ - LVIDd³)/LVIDd³] x 100¹² olan modifiye Teicholz formülü ile hesaplanır. Şekil 1A, B'ye bakın.
18. Verileri kompakt disklerde veya USB bellek çubuklarında saklayın ve yedek kopyalar oluşturun.
19. Uygun yazılımı kullanarak verileri içe aktarın, analiz edin ve dışa aktarın.

Sonuçlar

Şekil 1: Kontrol hayvanlarına karşı miyokard enfarktüsü sonrası dilate kardiyak hipertrofisi olan farelerde LV sistolik ve diyastolik boyutları ve kardiyak fonksiyonu ölçmek için standart çözünürlüklü ekokardiyografi (>10 MHz). Normal, sağlıklı farelerden (A) ve miyokard enfarktüsünden sonra LV dilatasyonu ve azalmış LV fonksiyonu olan hayvanlardan temsili ekokardiy...

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
Ultrason iletim jeli; Jel Aquasonic 100	Parker
Lineer ultrason probu; L15-7io	Philips Sağlık Hizmetleri
Ekokardiyografi; IE33 xMATRIX	Philips Sağlık Hizmetleri
Kemirgen tıraş makinesi	Harvard Aygıtı	34-0243