Peritoneal Yağ Depolarının Toplanması: Fare Modellerinde Peritoneal Yağ Dokularının Yumurtalık Kanseri Kolonizasyonunu İncelemek İçin Bir Teknik

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. Hayvanların Deneysel Çalışmalara Hazırlanması

1. Hayvanların yeni barınaklara ve çevreye alışmalarına, taşıma ve elleçlemenin potansiyel fizyolojik etkilerinden kurtulmalarına izin verin.
   not: Aşağıdaki teknik, ticari olarak temin edilebilen tüm fare suşlarına uygulanabilir. Bir deney için kullanılacak hayvan sayısı, çalışma tasarımına bağlıdır ve bir istatistikçiye danışılarak yapılmalıdır.

2. Peritoneal Yağ Depolarının Tanımlanması ve İzolasyonu

1. Hayvanları CO₂ doz aşımı ve ölümü doğrulamak için ikincil bir fiziksel yöntemle ötenazi yapın.
2. Peritoneal yağ depolarının toplanması iç organın çıkarılmasını oluşturduğundan (sekonder yöntem), iç organları ortaya çıkarmak için periton duvarından kasık papillasına yakın bir orta hat insizyonu yapın (Şekil 1A).
3. Omental Yağ (OM) için, dalağı periton boşluğundan forseps ile uzatarak omental/pankreas kompleksini açığa çıkarın (Şekil 1C). Tüm doku bağlantılarını yakından keserek pankreas ve dalaktan omentumu serbest bırakın. Kalan pankreas dokusunun eksize edildiğinden emin olun.
4. Gonadal Yağ (GF) için, yumurtalıkları çevreleyen gonadal yağı kaldırmak için forseps kullanın ve doku bağlantılarını keserek eksize edin (Şekil 1A sağ üst).
5. Rahim Yağı (UF) için, rahim boynuzlarını çevreleyen rahim yağını kaldırmak için forseps kullanın ve doku bağlantılarını keserek eksize edin (Şekil 1A sağ altta).
6. Mezenterik Yağ (MF) için, ince bağırsak ile pilor arasındaki bağlantıyı kesin. İnce bağırsağın serbest ucunu sıkıca kavramak için forseps kullanın ve mezenterik yağdan yavaşça "soyun". Diseksiyon makası kullanarak mezenterik kökten mezenterik yağı serbest bırakın (Şekil 1A, sol alt).
7. Splenoportal Yağ (SF) için, dalağın hilusunu pankreasa bağlayan ince yağlı doku bandını ortaya çıkarmak için forseps kullanarak dalağın distal ucunu kaldırın. Splenoportal yağını önce pankreastan serbest bırakarak ve ardından dalaktan dikkatlice inceleyerek çıkarın (Şekil 1B).

Şekil 1. Ana peritoneal yağ depolarının göreceli konumları ve yapıları. (Bir)Beş ana peritoneal yağ kaynağından dördünün göreceli yerleşimini gösteren brüt anatomik diseksiyon. Omentum (OM; ana hatlarıyla), gonadal yağ (GF), uterus yağı (UF), mezenter (MY), yumurtalık (ov), uterus boynuzları (uh) ve ince bağırsaklar (si) gösterilmiştir. (B) Dalağın forseps ile kaldırılmasıyla açığa çıkan splenoportal yağ (SP; ana hatlarıyla). (C) Fare omentumu, görselleştirmeyi iyileştirmek için pankreastan serbest olarak diseke edilmiştir. (D)Eksize edilen peritoneal yağın nispi boyutları ve yapıları; Mezenter, mezenterik köke bağlı olarak gösterilmiştir. (E) Sütlü lekelerin varlığı için periton yağının histolojik değerlendirmesi – (A) adipositler, (MS) sütlü nokta.