Biyobankacılık için Prostat Kanseri Dokusu Örneklemesi: Taze Tümör Dokusundan Biyopsi Zımbalarını Çıkarmak için MRI Kılavuzluğunda Hedefli Bir Teknik

İnsan katılımcıları içeren tüm prosedürler, insan refahı için kurumsal, ulusal ve uluslararası yönergelere uygun olarak gerçekleştirilmiş ve yerel kurumsal inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. Prostat Dilimleme Aparatı

1. Prostat dilimleme aparatını satın alın (Malzeme Tablosu). Alternatif olarak, bir 3D yazıcı kullanarak bir bıçak sapı yazdırın.

2. Tümör Hedefleme

1. Tanısal biyopsi ile belirtildiği gibi indeks lezyonunu tanımlamak için klinik notları gözden geçirin, ör., sol posterior.
2. Yukarıdaki tümörün yerini ölçmek için MRI görüntülerini gözden geçirin.
   1. Tümörün eksenel düzlemde en görünür olduğu diziyi bulun, örneğin T2 ağırlıklı.
   2. Tümörün en büyük olduğu görüntüyü bulmak için eksenel görüntüler arasında kaydırın ve referans için görüntüyü yazdırın.
   3. İlgili koronal görüntüde, prostatın tabanından seçilen eksenel pozisyona olan mesafeyi ve prostatın apeksten tabana (mm) tam uzunluğunu ölçün ve referans için yazdırın.

3. Prostatın Toplanması

1. Bu prosedür ve herhangi bir alt araştırma uygulaması için uygun bilgilendirilmiş onamın alındığından emin olmak için hasta notlarını kontrol edin.
2. Radikal prostatektomiyi takiben prostatı kuru bir kapta toplayın. Prostata formalin veya başka bir fiksatif eklenmediğinden emin olun.
3. Numune almak için uygun bir steril yere, örneğin bir patoloji laboratuvarında laminer akış başlığına aktarın.
4. Taze doku gerekiyorsa mümkün olan en kısa sürede numune almaya devam edin.
   NOT: Bazı uygulamalar için (örneğin, RNA kadar hızlı bozulmaması gereken DNA'nın değerlendirilmesi), numuneyi soğutmak ve ertesi gün numune almak uygun olabilir.

4. Numune Hazırlama

1. Steril teknikler kullanarak lokal dekontaminasyon prosedürlerine göre laminer akış başlığı ve prostat dilimleme aparatı hazırlayın. Burada% 70 etanol püskürtün ve tüm yüzeyleri silin. Steril tek kullanımlık iğneler ve neşterler kullanın. Dilimleyici bıçaklarını en fazla üç kez kullanın; Her kullanımdan sonra sıcak sabunlu suda yıkayın, ardından püskürtün ve %70 etanol ile silin.
2. Standart bir ölçek kullanarak prostatı (g) tartın.
3. Prostatı mürekkeple yazın. Sol tarafı mavi mürekkeple ve sağ tarafı siyah mürekkeple boyayın. Daha sonra cerrahi kenarları belirtmek için tam kapsülü ve seminal vezikülleri mürekkeple kaplayın.
   NOT: Mürekkep oluşturma prosedürleri yerel olarak değişebilir ve buna göre değiştirilebilir.

5. Prostat Dilimleme

1. Duvarları standın tabanına dik olarak yerleştirerek dilimleme aparatını monte edin (Şekil 1A).
2. Prostatı, arka tarafı aşağı ve ön tarafı yukarı bakacak şekilde, taban ve tepe zıt duvarlara bakacak şekilde yerleştirin. Prostatın etrafına altın iğneler yerleştirin. Dilimleme sırasında prostatı destekleyecek şekilde tam oturması için gerekirse prostatı hafifçe içeri doğru itin.
3. Bir cetvel kullanarak prostat uzunluğunu tabandan apekse kadar ölçün ve MRI ile ölçülen prostat uzunluğu ile karşılaştırın. Prostat küçülmüşse, tabandan hedef enine dilime beklenen mesafeye geçici bir düzeltme uygulayın. Örneğin, MR görüntüsünde prostatın tam uzunluğu 50 mm ise, ancak bu noktada bir cetvelle ölçüldüğünde 45 mm'ye kadar küçüldüğünü gösteriyorsa, beklenen dilimleme pozisyonunu %10 oranında azaltın.
4. Tabandan istenen enine dilime kadar ölçün. Dilimlemek için bu ölçüme en yakın olan pimi seçin.
5. Yaralanmayı önlemek için zincir eldiven giyin, dilimleme cihazını tutun (Şekil 1B), bıçakları tanımlanan pimin her iki tarafına yerleştirin ve bıçakları 5 mm aralıklı tutmak için ara parçayı kullanın. Bıçakları uzun vuruşlarla yavaş ve sıkı bir şekilde aşağı, ileri ve geri hareket ettirerek bir dilim alın (Şekil 1C). Cihazı sökmeden önce tam bir dilimin ayrıldığından emin olun.
6. Duvarları ve pimleri çıkarın ve dilimi eldiven kullanarak steril bir mantar levha üzerine dikkatlice çıkarın.

6. Doku Örneklemesi

1. Enine dilimi görsel olarak inceleyin ve eksenel MRI görüntüsü ile karşılaştırın. Bazı durumlarda, tümör alanı çevre dokudan daha soluk görünebilir.
2. Enine dilimi nazikçe palpe edin. Bazı durumlarda, tümör çevredeki dokudan daha sıkı hissedilebilir.
3. Eksenel MRG görüntüsünü kılavuz olarak kullanarak, örnekleme için bir veya daha fazla alan seçin.
4. İstenilen doku bölgesinden biyopsi yumrukları alın.
   1. 6 mm'lik bir zımba kullanarak, istenen doku alanını aşağı doğru bastırın.
   2. Tam ayrılmayı sağlamak için doku zımbasını yerinde ve mantara doğru aşağı çevirin ve gerekirse ayırmak için keskin bir neşter kullanın.
   3. Zımbayı çıkarın ve pistonu kullanarak çıkararak gerektiği gibi tüplere/kalıplara yerleştirin.
   4. Ayrı steril biyopsi zımbaları ile gerektiği gibi daha fazla tümör ve iyi huylu numune için tekrarlayın. Zımbaların alındığı delikleri kırmızıyla mürekkepleyin.
   5. Prostatın ağırlığı ve doku rengi/sertliği ile ilgili gözlemlerle birlikte her bir yumruğun konumuna dikkat edin.

Resim 1: Prostat dilimleme aparatı.(A) Duvarlar tabana dik olarak yerleştirilir ve prostatı çevreleyen tabana altın pimler yerleştirilir (prostat resimde gösterilmemiştir). (B) Değiştirilebilir paralel bıçaklar bıçak sapına yerleştirilmiştir. (C) Prostatın 5 mm'lik bir bölümünü kesmek için bıçaklar altın pimlerin arasından geçer