Prostattan Bireysel Lob Ekstraksiyonu: Fare Prostatından Bireysel Prostat Loblarını Toplama Tekniği

Özet

Kaynak: Nath, D. et al. In Vitro 3D Küresel Kültür Modelleri için Fare Prostat Loblarının Tanımlanması, Histolojik Karakterizasyonu ve Diseksiyonu. J. Vis. Uzm. (2018)

Bu videoda, bir fare modelinin prostat bezinden tek tek lobları toplama tekniği açıklanmaktadır. Bireysel loblar daha sonra histolojik analiz ve kanser araştırmaları için kullanılabilir.

Protokol

Hayvanlarla ilgili tüm prosedürler yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. Prostatın Brüt Anatomisi ve Bireysel Lob Mikrodiseksiyonu

NOT: Bu, Şekil 1(i-n) ve Şekil 2'de gösterilmiştir

.

1. Dokuyu bir çift künt forseps ile çevirin, böylece sırt tarafı yukarı bakacak ve bir kelebeğin kanatlarını andıran sırt loblarını gösterecektir.
2. Lobları forseps ile tutarak ve tabandan makasla keserek sırt loblarını toplayın (Şekil 1j).
3. Kalan dokuyu ventral tarafa çevirin.
4. Anterior, ventral ve dorsal loblar arasında sıkışmış olan küçük ve genellikle üretrayı yana saran lateral lobları toplayın (Şekil 1k).
5. Daha sonra, lateral loblardan daha büyük olan ventral lobları toplayın ve üretra ventral üzerinde uzanın (Şekil 1l).
6. Son olarak, dördünün en büyüğü olan ön lobları, üretrayı kesip atarak hasat edin (Şekil 1m).
7. Doku parçalarını deneysel ihtiyaçlara göre işleyin.

Sonuçlar

Şekil 1: Fare prostatının diseksiyonu. Fare prostatının UGS'den diseksiyonu için adım adım görüntüler: (a) yağın alınması, (b) idrar kesesinin çıkarılması, (c) vas deferensin çıkarılması, (d) üretra ile prostatın ventral görünümü, (e) üretra ile prostatın dorsal görünümü, (f-h) seminal veziküllerin çı...

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
Fare cerrahi aletleri (Fare Diseksiyon kiti)	Dünya Hassas Aletler	FARE KİTİ
Diseksiyon mikroskobu
RPMI ortamı	Thermofisher Bilimsel	11875093
Diseksiyon ortamı (DMEM + %10 FBS)	Thermofisher Bilimsel	11965-084
Fetal Sığır Serumu	Thermofisher Bilimsel	10438018
PBS (Fosfat tamponlu tuzlu su)	Thermofisher Bilimsel	10010031
Kollajenaz	Thermofisher Bilimsel	17018029	RPM'de 10x stok (10mg / ml) yapın, filtreleyin, sterilize edin, alikotlayın ve -20 ° C'de saklayın
Şırıngalar ve İğneler	Balıkçı Bilimsel