Yöntem makalesi

Fonksiyonel Kemorezistans Karakterizasyonu: Klonojenik Test Kullanarak Kanser Hücrelerinde İlaç Direncini Değerlendirmek İçin Bir Yöntem

30 Nisan 2023

Bu makalede

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kaynak: Mohr, L. et al. Anti-mitotik Ajan Dosetaksele Direnç Prostat Kanseri Hücre Modellerinin Oluşturulması. J. Vis. Uzm. (2017)

Bu videoda, koloni oluşumu testi kullanılarak prostat kanseri hücrelerinde kemoterapötik ilaç direncini değerlendirmek için bir yöntem açıklanmaktadır. Bu test, kanser hücrelerinde kemorezistansın yeni moleküler ve hücresel mekanizmalarını tanımlamak için fonksiyonel bir araç olarak kullanılabilir.

Protokol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Koloni Oluşum Testi ile Edinilmiş Dosetaksel Direncinin Fonksiyonel Karakterizasyonu

NOT: Bu protokolde kemorezistans koloni oluşum testleri kullanılarak değerlendirilmiştir. Hücre canlılığını değerlendirmek için kullanılan alternatif yöntemler (yani, MTS tahlilleri) araştırmacıların tercihlerine göre kullanılabilir.

  1. Plaka 2,000 hücre (DU145 veya 22Rv1, hem ebeveyn hem de Dosetaksel dirençli) 6 oyuklu plakalarda, oyuk başına 2 mL ortam kullanarak.
  2. 24 saat sonra, artan konsantrasyonlarda Docetaxel ekleyin (ebeveyn hücreleri: 0.25, 0.5, 1, 2.5 ve 5 nM; DR hücreleri: 5....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
Şekil 1: Dosetaksele dirençli hücre modellerinin fonksiyonel ve fenotipik karakterizasyonu.(A) 72 saat boyunca belirtilen Docetaxel konsantrasyonları ile muamele edilen ebeveyn ve Docetaxel'e dirençli hücrelerin temsili koloni oluşum testleri. Her tedavi konsantrasyonu için kolonilerin yüzdesi dahil edilen grafikte temsil edilmektedir. Deneyler üçlüdür ve veriler SD ± ortalamayı temsi.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Herhangi bir çıkar çatışması beyan edilmedi.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
DU145 hücreleri ATCC (Uzay Servisi) HTB-81
22Rv1 hücreleri ATCC (Uzay Servisi)CRL-2505
Dosetaksel Selleck Kimyasalları S1148 Serisi DMSO'da (10mM)
Doku kültürü şişesi 150 sq cm doğan355001
6 oyuklu doku kültürü plakaları doğan353046
RPMI 1640 Orta Gibco (Gibco)11875093%10 FBS ve %1 Penicilin/Streptomisin ile desteklenmiştir
Fondöten B Fetal Sığır Serumu Gemini900208
1X Fosfat Tamponlu Salin (PBS) Corning 21-040-CM
% 0.05 Tripsin-EDTA Gibco (Gibco) 25300-062
Penisilin-Streptomisin Gibco (Gibco)15140122
Kristal Menekşe Sigma-AldrichC0775
% 10 Formalin Çözeltisi Sigma-AldrichHT501128
Serisi Serisi Gazetesi Serisi Gazetesi

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

la Direnci De erlendirmesiKoloni Olu um AnaliziProstat Kanseri H creleriDosetaksel TedavisiH cre Canl l AnaliziKristal Viyole BoyamaKoloni Say m Y ntemiFonksiyonel Diren Analizi

İlgili makaleler