Yöntem makalesi

Doku Bölümlerinin Deparafinizasyonu ve Rehidrasyonu: FFPE Doku Slaytlarından Parafin Mumu Çıkarmak İçin İki Aşamalı Bir Prosedür ve ardından doku rehidrasyonu

30 Nisan 2023

Bu makalede

Özet

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kaynak: Sugimoto, K. et al. Gastrointestinal Kanserde DNA Metilasyonunun Genom Çapında Analizi. J. Vis. Uzm. (2020)

Bu videoda, gastrointestinal tümör dokusundan elde edilen FFPE veya formalinle sabitlenmiş parafine gömülü kesitlerin işlenmesini gösteriyoruz. Deparafinizasyon ve rehidrasyon adımları, sonraki analitik uygulamalar için doku örneğinin işlenmesine izin verir.

Protokol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

İnsan katılımcıları içeren tüm prosedürler, insan refahı için kurumsal, ulusal ve uluslararası yönergelere uygun olarak gerçekleştirilmiş ve yerel kurumsal inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. Slaytları Yıkamak

  1. 10 μm boyanmamış formalinle sabitlenmiş parafine gömülü (FFPE) bölümler hazırlayın.
  2. Slaytları bir cam slayt tutucuya yerleştirin: doku minimum olmadıkça ve daha fazla slayta ihtiyaç duyulmadıkça yaklaşık 3-5 en büyük kesitli slayt kullanın.
  3. Sürgü tutucuyu Ksilen ile doldurun ve sürgüdeki tüm dokunun suya batırıldığından emin olun. 15 dakika bekletin.
  4. 15 dakika sonra, slaytların düşmemesi için bir pipet ucu ile tutulan slaytlarla Ksilen'i dökün.
  5. Daha önce olduğu gibi aynı seviyeye kadar daha fazla Ksilen dökün. 15 dakika daha bekletin.
  6. 15 dakika sonra Ksileni tekrar dökün.
  7. Sürgü tutucuyu %100 etanol (EtOH) ile doldurun ve sürgüdeki tüm dokunun tamamen suya batırıldığından emin olun. 3 dakika bekletin.
  8. Slaytları dikkatlice tutarken EtOH'yi dökün. Daha fazla EtOH ile aynı seviyeye kadar doldurun. 2 dakika bekletin.
  9. EtOH'yi tekrar dökün ve sürgüyü çıkarın. Kuruması için temiz bir kağıt havluya yüzü yukarı bakacak şekilde dikkatlice yerleştirin. 10 dakika bekletin.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Herhangi bir çıkar çatışması beyan edilmedi.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Ksilen Sigma-Aldrich214736
%100 Etanol Sigma-Aldrich24194
Gazetesi Gazetesi

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

DeparaffinizationRehydrationFFPE TissueXylene TreatmentEthanol GradientTissue SectioningHistological PreparationParaffin RemovalTissue ProcessingSlide Holder

İlgili makaleler