Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.
1. Vertikal Sleeve Gastrektomi ve Sahte İşlemler
- Ameliyat gününde, temel bir ağırlık ölçümü elde etmek için fareleri tartın.
- Ameliyathaneyi anestezi sistemi, ısıtılmış su banyosu ve ısıtma yastığı ile donatın. Su banyosunu 37 °C'ye ayarlayın ve sulama için% 0,9 tuzlu su çözeltisini ısıtmak için kullanın. Cerrahi alanı %70 etanol ile temizleyin ve otoklavlanmış cerrahi paketini ve aletlerini açmak için steril teknik kullanın.
not: Isıtma yastığı, ameliyat ve anesteziden iyileşme sırasında hayvanı sıcak tutmak için kullanılır.
- Bir indüksiyon odası kullanarak, fareyi% 5 izofluran ve% 1 L / dakO2 akış hızı ile uyuşturun. Bir ayak parmağını kıstırarak farenin uygun anestezi düzleminde olduğunu onaylayın. Tutarlı bir anestezi düzlemi elde edildikten sonra fareyi% 1-3 izofluran ve 0.6 L / dak'lık birO2 akış hızı ile koruyun.
- Fare uyuşturulduktan sonra, ameliyat sırasında nemli kalmalarını sağlamak için gözlerine göz merhemi (Malzeme Tablosuna bakınız) yerleştirin. Bu sırada, meloksikam (deri altından 2 mg / kg) gibi bir analjezik de uygulayın. Gerginlik sağlamak için cildi nazikçe aşağı tutarak kılları göbekten koltuk altına doğru kırpın.
- Farenin cildi ince ve hassas olduğundan, tüyleri keserken cilt lezyonlarına neden olmamaya dikkat edin. Cildi povidon-iyot ve alkol ile temizleyin.
- Steril eldivenler giyin ve steril cerrahi alanı ve aletleri hazırlayın. İşlemin geri kalanını steril teknik kullanarak gerçekleştirin. Farenin her iki tarafına steril cerrahi örtüler yerleştirerek steril cerrahi alan hazırlayın. Fare için cerrahi bir örtü oluşturmak için otoklavlanmış kalay folyo kullanın.
- Farenin karnına erişim sağlamak için kalay folyoda küçük bir delik açın.
- Bir iris makası kullanarak karın ortasından (göbek) ksifoid kıkırdak seviyesine kadar cildi kesiyi yapın. Linea alba'yı tanımlayın ve linea alba boyunca vücut duvarını kesmek için iris makası kullanın. Mideyi karın bölgesinden nazikçe kaldırmak için CTA'ları kullanın ve ardından midenin daha büyük eğriliğinden daha büyük omentumu kör bir şekilde inceleyin.
- Midenin fundusu ile dalak arasında uzanan kısa gastrik arteri, 7-0 monofilament emilebilir sütür kullanarak iki ligatür yerleştirerek bağlayın. İki bitişik harf arasında kesmek için yaylı makas kullanın. Arter kesildikten sonra, mideyi karın boşluğundan tamamen çıkarın. Gazlı bezi midenin altına yerleştirin ve dokuyu nemli tutmak için tuzlu su ile ıslatın.
- VSG işlemi için, mide arterinin ve venin belirgin dallarını 7-0 monofilament emilebilir sütür ile konik bir iğne ile her düğüm için 3 atış olacak şekilde bağlayın. Ligatürleri istenen transeksiyon çizgisinin hemen altına (yani midenin daha küçük eğriliğine doğru) yerleştirin.
not: Amaçlanan transeksiyon çizgisi, midenin kalp çentiğinin ~ 2 mm yukarısında (yani midenin daha büyük eğriliğine doğru) ve margo pilcatus'un en az 2 mm altında başlar ve pankreasın sağ lobunun proksimal ucuna kadar uzanır. Tipik olarak, mide duvarı başına bağlanması gereken 4 damar vardır; Ancak, bu fareler arasında değişebilir.
- Gastrektomi sırasında mide içeriğinin dökülmesini önlemek için, konik bir iğne ile 6-0 monofilament emilebilir bir sütür kullanarak, amaçlanan transeksiyon hattının hemen altına her iki mide duvarından geçen basit bir sürekli sütür hattı yerleştirin. Cerrahın yemek borusunun sağındaki dikiş hattına ve margo pilcatus'un altına başlayın ve pankreasın hemen üzerinde bitirin.
- İnce uçlu kanama durdurucuları dikiş çizgisinin üzerine yerleştirin ve dikiş hattı ile kanama durdurucular arasında kesmek için yaylı makas kullanın. Kesilen mide dokusunu steril cerrahi alandan çıkarın. Mideden kanı temizlemek ve sindirmek için CTA'ları kullanın.
- Basit bir süreksiz model kullanarak konik bir iğne ile 6-0 monofilament emilebilir sütür kullanarak mide duvarlarının yerleşimini güçlendirin.
not: Basit bir süreksiz dikiş paterni önerilir çünkü bu, basit sürekli dikiş paterninden daha güvenli bir kapatma sağlar.
- Dokuyu nemli ve temiz tutmak için mide kalıntısını işlem boyunca tuzlu su ile yıkayın. Tuzlu su ile mide lavajı yapmak için 20 mL'lik bir şırıngaya bağlı 20 G'lik bir gavaj iğnesi kullanın. Aşırı basınçtan kaynaklanan mide dokusu hasarı veya normal sivri uçlu iğne kullanımından kaynaklanan kazara mide dokusu hasarı riski olmadan yeterli basıncın sağlandığından emin olmak için bu boyutu kullanın.
- Mideyi güvenli bir şekilde kapatmak için en az 20 düğüm kullanın; özofagus tarafı boyunca kapanmaya dikkat edin, çünkü bu tarafa erişmek daha zordur ve bu nedenle genellikle bir ayrışma bölgesidir.
- CTA'lar ile mideye hafifçe bastırarak sızıntı olmadığından emin olun. Sızıntı tespit edilirse, sızıntı alanlarına ek basit süreksiz düğümler yerleştirin ve ardından tekrar sızıntı testi yapın. Herhangi bir sızıntı tespit edilmeyene kadar sızıntı testi.
- Geride bulaşıcı partikül madde kalmadığından emin olmak için en az 60 mL salin kullanarak midenin son bir kapsamlı lavajını yapın.
- Bir CTA kullanarak mideyi karaciğerin altındaki karın boşluğuna geri yerleştirin. Tüm fazla sıvıyı emmek için CTA'ları karın boşluğunun dorsal yönü boyunca yerleştirin. Künt bir 18G iğne kullanarak, antibiyotikli veya antibiyotiksiz (0.5 mL LRS +/- 20 mg / kg Enrofloksasin) laktatlı Ringer solüsyonunu (LRS) kapatmadan hemen önce doğrudan karın boşluğuna enjekte edin.
not: Bu, ameliyat sırasında yaşanan sıvı kaybının yerini alır ve iyileşmeye yardımcı olmak için cerrahi bölgeye doğrudan antibiyotik uygulanması için bir yöntem sağlar.
- Karın kas tabakasını 6-0 monofilament emilebilir sütür kullanarak basit bir süreksiz modelde konik bir iğne ile kapatın. Daha sonra 6-0 monofilament emilebilir sütür ile cilt tabakasını basit bir sürekli desende kapatın.
- Doku yapıştırıcısını cilde yerleştirin ve dikişi gömmek için cildi dikiş hattının üzerine katlayın, böylece fare ameliyat sonrası yara kapanmasını bozamaz.
- İzofluranı kapatın ve fareyi ev kafesine geri koymadan önce 10-15 dakika ısıtma yastığı üzerinde iyileşmesine izin verin. Bilincini geri kazanana ve hareket edebilene kadar hayvanı gözetimsiz bırakmayın.
- Ameliyattan tamamen iyileşene kadar hayvanları tek tek barındırın.
not: Çalışma boyunca doğru gıda alımı ölçümleri elde edilecekse, fareler çalışma boyunca tek başına barındırılmaya devam edilmelidir. Ev kafesi yatak takımlarını yemekten dolayı yabancı cisim tıkanıklığı riski vardır. Hayvanlar, zenginleştirme sağlamak için yuvalama malzemeleri dışında, yatak takımları olmayan kafeslerde barındırılmalıdır (bkz.
