Fareden Sağlam Böbreğin Çıkarılması: Murin Modellerinden Böbrek Kapsülü Olmadan Böbrek Elde Etme Tekniği

Özet

Kaynak: Grainger, N. et al. Fare Renal Pelvisinin Canlı, Sağlam Kalp Pili Bölgelerinin Vibratom Kesiti ile İzole Edilmesi ve Görüntülenmesi. J. Vis. Uzm. (2021)

Bu videoda, farenin retroperitoneal boşluğundan böbrek çıkarma prosedürünü açıklıyoruz. Çıkarılan böbrek, böbrek kapsülü ve çevresindeki yağ tabakası olmadan sağlam bir böbrek elde etmek için ayrıca mikrodiseke edilebilir.

Protokol

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. Böbrek Diseksiyonu

1. Havalandırmalı bir başlıkta% 3-4 izofluran soluyarak fareleri uyuşturun. Ayak parmağı ve / veya kuyruk sıkışma refleksi kaybı ile derin anestezinin indüksiyonunu onaylayın ve ardından fareleri servikal çıkık ile ötenazi yapın.
2. Kürkü nemlendirmek için göğse% 70 etanol uygulayın. Dış diseksiyon makası kullanarak, iç organlara zarar vermemek için makas bıçakları hayvandan uzağa açılı olacak şekilde karın boşluğunu ....

Sonuçlar

Şekil 1: Temel böbrek anatomisi ve PKJ kalp pili bölgesinin yeri.(A) RP ve üreterin oryantasyonunu gösteren sağlam böbreğin diyagramı. Renal arter ve renal ven sırasıyla kırmızı ve mavi renkte gösterilir. (B) Sağlam böbrek, medulla, papilla (toplama kanallarının birleştiği distal medulla) ve proksimal ve distal RP dahil olmak üzere böbreğin iç yönünü ortaya çıkarmak i.......

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
60 mm x 15 mm Petri kabı	Sigma Aldrich	P5481 Serisi	Böbrek keskin diseksiyon tabağı
Emici kağıt	Balıkçı Bilimsel	06-666A	Uygulamadan önce böbreği kurutmak için tutkal
B6; 129S-GT(ROSA)26Sor / J	Jackson Laboratuvarı	13148	GCaMP3 Fareler
B6; 129S-GT(ROSA)26Sor / J	Jackson Laboratuvarı	24105	GCaMP6f Fareler
B6. FVB-Tg(Myh11-cre/ERT2)1Soff/J	Jackson Laboratuvarı	19079	smMHC-CRE Fareler
C57BL / 6-Tg (Pdgfra-cre) 1Clc / J	Jackson Laboratuvarı	13148	PDGFRa-CRE Fareler
etanol	Phamco-Aaper	SDA 2B-6	Diseksiyon için
Ekstra İnce Bonn Makası	Güzel Bilim Araçları	14083-08	İç diseksiyon makası için kullanılır
İnce makas	Güzel Bilim Araçları	14060-09	Dış diseksiyon makası için kullanılır
İnce uçlu forseps	Güzel Bilim Araçları	11254-20	Böbreğin ince diseksiyonu için kullanılır
İzofluran	Baxter	NDC 1001936060	Anestezi için
Silikon elastomer	Balıkçı Bilimsel	NC9285739	Sylgard 184
Öğrenci Adson Forseps	Güzel Bilim Araçları	91106-12	Nazikçe tutmak ve hareket ettirmek için böbrek
Öğrenci Dumont Forseps	Güzel Bilim Araçları	91150-20	İç diseksiyon forsepsleri için kullanılır
Vannas yaylı makas	Güzel Bilim Araçları	15000-03	Keskin diseksiyon ve temizlik için İzole böbrek

· Adet arası