Method Article

Tüm Murin Böbreğinin Vibratom Kesiti: Murin Böbreğinin İnce Kesitlerini Oluşturmak İçin Bir Teknik

April 30th, 2023

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kaynak: Grainger, N. et al. Fare renal pelvisinin canlı, sağlam kalp pili bölgelerini vibratom kesiti ile izole etmek ve görüntülemek. J. Vis. Uzm. (2021)

Bu videoda, ince dilimler elde etmek için bütün bir fare böbreğinin vibratom kesitini gösteriyoruz. Bu dilimlenmiş doku bölümleri, daha sonraki aşağı akış analizine kadar düşük sıcaklıklarda saklanabilir.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. Çözümler Hazırlayın

  1. 120.35 mM NaCl, 5.9 mM KCl, 15.5 mM NaHCO3, 1.2 mM Na2HPO 4,1.2 mM MgCl2, 11.5 mM glikoz ve 2.5 mM CaCl2 içeren 1 L Krebs-Ringer Bikarbonat (KRB) çözeltisi hazırlayın. Kullanım gününde, KRB çözeltisini ice.
    not: KRB, 4 ° C'de bir haftaya kadar saklanabilir ve kullanımdan önce en az 10 dakika boyunca% 97O2 ve% 3 CO2 karışımı ile ö....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Herhangi bir çıkar çatışması beyan edilmedi.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
24 oyuklu kültür plakasıThermoFisher Bilimsel142485Böbrek dilimlerini saklamak için
48 oyuklu kültür plakasıThermoFisher Bilimsel152640Böbrek dilimlerini saklamak için
Emici kağıtBalıkçı Bilimsel06-666ATutkal uygulamadan önce böbreği kurutmak için
Siyanoakrilat yapıştırıcıAmazonB001PILFVYBöbreği numune plakasına yapıştırmak için
B6; 129S-GT(ROSA)26Sor / JJackson Laboratuvarı13148GCaMP3 Fareler
B6; 129S-GT(ROSA)26Sor / JJackson Laboratuvarı24105GCaMP6f Fareler
B6. FVB-Tg(Myh11-cre/ERT2)1Soff/JJackson Laboratuvarı19079smMHC-CRE Fareler
C57BL / 6-Tg (Pdgfra-cre) 1Clc / JJackson Laboratuvarı13148PDGFRa-CRE Fareler
İnce uçlu forsepsGüzel Bilim Araçları11254-20Böbreğin ince diseksiyonu için kullanılır
Gillette Silver Blue çift kenarlı bıçaklarAmazonB009XHQGYOVibratomun bıçak tutucusuna yerleştirmek için
Öğrenci Adson ForsepsGüzel Bilim Araçları91106-12Böbreği nazikçe tutmak ve hareket ettirmek için
Öğrenci Dumont ForsepsGüzel Bilim Araçları91150-20İç diseksiyon forsepsleri için kullanılır
Vibro kontrolüLeica Belediyesi14048142075Kesme sırasında bıçak hareketini kalibre etmek için isteğe bağlı bileşen
VT1200 S Titreşimli Bıçak MikrotomuLeica Belediyesi14912000001Protokolümüzde konfigürasyon 1 kullanılmaktadır
Adet arası

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Vibratome SectioningMouse KidneyTissue SectioningCyanoacrylate GlueSpecimen HolderBuffer TrayIce BathBlunt ended ForcepsChilled BufferLow Temperature Storage

Related Articles